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賽默飛質(zhì)譜利用 TSQ Quantiva 定量肉類摻假比例

閱讀:1104      發(fā)布時間:2017-12-14
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引言 :

“掛羊頭,賣狗肉”是日常用的一個熟語。雖然隨著時間的發(fā) 展,這句話已經(jīng)難以反應(yīng)zui真實的情況,在世界上大部分地 方,狗已經(jīng)不作為食用肉的來源,即使在極少數(shù)食狗肉的地 方,狗肉的價格也往往比羊肉還高,已經(jīng)失去了造假的意義。 但是,這種商品標識與實際商品的組成不一致的情況,卻是長 期存在的。 自從 2013 年歐盟“馬肉風(fēng)波”之后,中國肉類 摻假的現(xiàn)象也屢見報道,進一步加深了人們對肉類真實性的擔 憂。這種非標明的添加,極大的擾亂的市場次序,影響相關(guān)宗 教人士、特殊風(fēng)俗與部分肉類禁食人士的情感與健康,也帶來 了潛在致病性和疾病控制的難題。目前zui常用檢測的方法有: 基于核酸的聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)(PCR),和基于抗體抗原結(jié) 合的酶聯(lián)免疫法(ELISA)。前者受到 DNA 降解,復(fù)雜基質(zhì)的 干擾和樣品提取與擴增方法的影響,干擾了定性和定量的準確 性。后者往往受制于抗體的制備,加工過程中蛋白變性,復(fù)雜 基質(zhì)和近親緣種屬之間同源干擾導(dǎo)致的假陽性的影響 [1, 2]。

隨著生物質(zhì)譜技術(shù)的成熟,大規(guī)模的定性和定量研究蛋白表達 譜的技術(shù)已經(jīng)很成熟。因此,利用質(zhì)譜技術(shù)尋找不同肉類樣 品特征性蛋白或者多肽,并進行定量,能夠避免現(xiàn)在zui常用的 PCR 技術(shù)和 ELISA 所面臨的上面的種種問題,其優(yōu)點包括:不 受食品加工的過程影響,因為氨基酸序列比核酸序列在加工過 程中更容易保存;同時實現(xiàn)定性與定量,避免假陽性且定量結(jié) 果更加準確可靠;能夠同時監(jiān)測多種添假 [2]。 豬肉,禽肉,牛肉和羊肉是世界上消耗量zui大的四種肉類 [3]。 大多數(shù)情況下,羊肉zui貴,可能比*的禽肉貴到 5 倍以上, 在實際生活中,對不法商人具有zui大的摻假誘力。我們基于 超高分辨的 Q Exactive 質(zhì)譜平臺,研究了五種常見肉類彼此之 間的特征性專屬多肽。選取其中找到的部分多肽,通過人為的 將幾種不同的肉類進行混合研究,模擬現(xiàn)實中摻假的情況,用 TSµantiva 建立了基于 SRM(Selected Reaction Monitoring) 的摻假比例定量方法。

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