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上海達為科生物科技有限公司
中級會員 | 第6年

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細胞免疫組化

時間:2022/4/23閱讀:1535
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1. 對于貼壁細胞或細胞涂片PBS洗滌一次。

2. 如果細胞貼得不牢,可以干燥樣品使細胞貼得更牢。

3. 用4%多聚甲醛固定細胞15分鐘,用PBS洗滌一次。

4. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內源性過氧化物酶封閉液,室溫孵育10分鐘,PBS充分淋洗;

5. 滴加正常山羊血清封閉液,室溫30分鐘,甩去多余液體;

6. 滴加一抗工作液,37℃孵育2h(或4℃過夜),然后PBS充分淋洗;

7. 滴加兔/鼠二抗工作液,室溫孵育1h,PBS充分淋洗;

8. DAB顯色5-10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度 ;

9. PBS或自來水沖洗1分鐘 ;

10. 蘇木精復染3分鐘,鹽酸酒精分化,反藍;

11. 自來水沖洗1分鐘 脫水、透明、封片、鏡檢。


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