久久国产精品午夜一区_91精品國產高清久久久久久91_?级毛片免费全部播放_欧美色图在线视频一区二区三区_国产综合亚洲一区二区三区_中文字幕熟女网_国产精品男人爽免费视频_九九无码网战_亚洲日本三级电影在线观看_欧美日韩DVD手机在线不卡

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

幾種核酸提取方法

來源:上海申知心生物科技有限公司   2017年08月24日 09:16  

(1)濃鹽法 

利用RNPDNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉淀出來

也可用0.15 MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白

兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些

以稀鹽酸溶液提取DNA ,加入適量去污劑,SDS可有助于蛋白質與DNA 的分離。在提取過程中為抑制組織中的DNaseDNA 的降解作用,在氯化鈉Nacl溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,并稱SSC溶液,提取DNA. 

2)陰離子去污劑法

SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取DNA .由于細胞中DNA與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA

3)苯酚抽提法

苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由于蛋白與DNA 聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。離心分層后取出水層,多次重復操作,再

合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性質,用乙醇沉淀DNA 。此時DNA是十分粘稠的物質,可用玻璃漫漫繞成一團,取出。此法的特點是使提取的DNA保持天然狀態 . 

4)水抽提法

利用核酸溶解于水的性質,將組織細胞破碎后,用低鹽溶液除去RNA,然后將沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,離心后收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6M.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然后分別用66% ?80%和95%乙醇以及丙銅洗滌

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 琼海市| 大方县| 河西区| 枣庄市| 榕江县| 霍林郭勒市| 星子县| 周至县| 苏州市| 永仁县| 江西省| 应城市| 新竹市| 汝南县| 海南省| 安岳县| 砚山县| 乐东| 承德市| 闸北区| 玛纳斯县| 辽中县| 城市| 宁都县| 嘉定区| 若羌县| 公安县| 陆丰市| 从化市| 汝南县| 邢台县| 巴彦县| 仁化县| 周宁县| 五原县| 曲阳县| 太湖县| 合江县| 闻喜县| 廊坊市| 东海县|