恒溫?fù)u床在蛋白質(zhì)免疫反應(yīng)中的應(yīng)用

來(lái)源：上海錦玟儀器設(shè)備有限公司 2019年09月11日 11:41

恒溫?fù)u床在蛋白質(zhì)免疫反應(yīng)中的應(yīng)用：

① 封閉：將轉(zhuǎn)膜后的PVDF膜浸沒(méi)在5%脫脂奶粉封閉液中封閉，搖床 50～60轉(zhuǎn)， 2 小時(shí)（室溫）。

② 一抗孵育：根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)選擇適當(dāng)濃度稀釋抗體，將稀釋好的抗體加入抗體孵育盒，并將PVDF膜放入其中，搖床50～60轉(zhuǎn),4℃孵育過(guò)夜。次日取出，TBST洗膜（3次/15 min，60轉(zhuǎn)）。

③ 二抗孵育：將二抗稀釋為合適的濃度，PVDF膜放入稀釋的二抗工作液中，室溫孵育1小時(shí)，搖床80轉(zhuǎn)。孵育結(jié)束后，取出PVDF膜，TBST洗膜（3次/15 min，80轉(zhuǎn)）

④ 顯影：吸取適量的化學(xué)發(fā)光試劑A液和B液，等體積混合，均勻加在PVDF膜上，孵育數(shù)十秒，使用凝膠成像系統(tǒng)曝光并獲取圖像。經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)測(cè)量條帶灰度值，計(jì)算實(shí)驗(yàn)蛋白的相對(duì)表達(dá)量

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

聯(lián)系我們