人結(jié)蛋白ELISA試劑盒實驗的反應(yīng)步驟：

（1）嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
（2）加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
（3）封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。 
（4）用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
（5）合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
（6）加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
（7）顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
（8）加樣時保持顯色劑不外流；A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
（9）應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔，整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至低限度。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。