Foxp3/轉錄因子染色固定破膜試劑盒的操作方法

來源：北京信至利達商貿有限公司 2022年09月27日 18:24

Foxp3/轉錄因子染色固定破膜試劑盒是一款經過優化的專門針對轉錄因子、核蛋白（例如Foxp3和STAT3）以及細胞因子和趨化因子等流式抗體進行細胞內抗原染色時所用的固定、破膜試劑。

操作方法：

1.取100μL細胞/管（約1×106個細胞）于流式管內。

2.[可選步驟] 根據說明書進行Fixable Viability Dye（死活細胞鑒定染料）染色。

3.按照抗體說明書加熒光標記抗體染細胞表面Marker。

4.孵育完成后加入1mL細胞染色緩沖液，300g離心5min，棄上清，再加入100uL細胞染色緩沖液重懸細胞。

5.加入1mL 1× Fixation Working Solution，渦旋混勻，4℃反應30min，反應完后，600g離心5min，棄上清。

6.加入2mL 1× Permeabilization Working Solution，渦旋混勻，600g離心5min，棄上清。

7.重復步驟6。

8.加入100μL 1×Permeabilization Working Solution重懸細胞。

9.[可選步驟] 加2µL 2％正常小鼠/大鼠血清于細胞懸液中封閉Fc受體，室溫下孵育15min。

10.按照抗體使用說明書加熒光標記的核染色抗體，混勻后室溫避光孵育30min。

11.加入2mL 1×Permeabilization Working Solution，600g離心5min，棄上清。

12.加入適量細胞染色緩沖液重懸細胞，即可上機檢測。

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