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Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型膠原酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

來源:上海谷研實業(yè)有限公司   2023年09月20日 16:55  

Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型膠原酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟


1. 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)


2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,


3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。


4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50%l,空白孔除外。


7. 溫育:操作同 3。


8. 洗滌:操作同 5。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。


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