疏水相互作用色譜

疏水相互作用色譜 (Hydrophobic Interaction Chromatography，簡(jiǎn)稱HIC) 是一種蛋白質(zhì)分離、純化和表征的傳統(tǒng)技術(shù)。近些年來(lái)，隨著單克隆抗體、雙抗、三抗以及抗體偶聯(lián)藥物 (ADC) 的不斷發(fā)展，HIC 在抗體以及抗體偶聯(lián)藥物的表征與分析上應(yīng)用越來(lái)越廣泛。

疏水作用色譜的方法開(kāi)發(fā)

疏水作用色譜的方法開(kāi)發(fā)一方面是色譜柱的選擇，一方面是方法的優(yōu)化。

與其他技術(shù)不同，疏水作用色譜技術(shù)允許蛋白質(zhì)在非變性條件下保持天然結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。利用抗體蛋白類藥物疏水相互作用色譜根據(jù)疏水性的不同進(jìn)行分離。

色譜柱選擇方面，疏水作用色譜柱的填料基質(zhì)和鍵合相都可以影響選擇性。對(duì)于填料基質(zhì)而言，常見(jiàn)的HIC色譜柱既有硅膠基質(zhì)的，也有聚合物基質(zhì)。而鍵合相的差異，則主要影響疏水性，常見(jiàn)鍵合相的疏水性從弱到強(qiáng)依次是：丁基<辛基<苯基。

方法優(yōu)化方面，疏水相互作用色譜一般是運(yùn)行鹽梯度。高濃度的緩沖鹽，由于“占據(jù)水分子"導(dǎo)致蛋白質(zhì)疏水內(nèi)核發(fā)生翻轉(zhuǎn)，疏水殘基暴露出來(lái)，與鍵合相相互作用，而緩沖鹽濃度降低的時(shí)候，疏水殘基可逆的進(jìn)行翻轉(zhuǎn)，疏水作用減弱，從而洗脫。蛋白質(zhì)分子按其疏水性大小被依次洗脫出來(lái)，疏水性小的先流出。具體的方法受到離子強(qiáng)度、溶劑種類、溫度以及pH值的影響。

聚合物無(wú)孔HIC色譜柱

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產(chǎn)品信息