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凝膠滲透色譜儀啟動秘籍:準備五步曲

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2025年06月03日 15:45  
  凝膠滲透色譜儀(GPC)是一種基于凝膠滲透色譜(GPC)或體積排阻色譜(SEC)原理的分析儀器,主要用于高分子物質的分離與分子量分布測定。其核心功能是通過色譜柱對不同分子量的物質進行精確篩分,利用體積排除機理實現分離:色譜柱內裝有多孔性凝膠或微粒,孔徑大小與待分離的聚合物分子相似,體積大的高分子化合物不能進入凝膠孔,最先從凝膠粒間流出,高聚物依分子量從大到小依次淋出。
  該儀器由泵系統、進樣器、色譜柱和檢測系統等核心部件構成。泵系統提供穩定的流動相輸送,進樣器用于將聚合物溶液導入溶劑流路,色譜柱通過填料孔徑差異實現分子量分級,檢測系統則測定經色譜柱分離后的不同分子量聚合物的含量。通過建立已知分子量的高分子聚合物的標準曲線,可分析同系未知待測高分子化合物。
  凝膠滲透色譜儀在使用前需要進行以下準備工作:
  1、環境與儀器放置
  環境要求:凝膠滲透色譜儀應放置在平穩、穩定、通風的地方,避免放在受潮或溫度變化過大處,且要遠離強磁場或電磁場。
  儀器檢查:確保儀器放置在干燥、清潔的工作臺上,周圍無雜物干擾。檢查儀器及相關附件的完好性,如有損壞或松動,應及時修復或更換。
  2、儀器部件檢查與準備
  管路與接頭檢查:仔細檢查管路和接頭,確保它們沒有損壞或者堵塞,保證流動相能夠順暢通過。
  溶劑儲存罐檢查:查看流動相和溶劑的儲存罐,確保有足夠量的合適溶劑供應,并且溶劑應符合實驗要求,無雜質或變質。
  電源連接檢查:確認儀器與電源的連接牢固可靠,并有良好的接地保護措施,防止漏電等安全問題。
  3、儀器預熱與平衡
  開機預熱:打開色譜儀的電源,按照儀器說明書的要求進行預熱,使儀器各部件達到穩定的工作溫度。
  柱子平衡:選擇合適的柱子,用流動相充分平衡柱子一段時間,以確保柱子的狀態穩定,為后續樣品分析提供良好的分離條件。
  4、樣品準備
  溶解與過濾:將樣品溶解在適當的溶劑中,使用過濾器過濾樣品以去除任何懸浮物,防止堵塞色譜柱和影響分離效果。
  樣品裝瓶與標記:將過濾后的樣品放入樣品瓶中,并貼上標簽,注明樣品的名稱、濃度、日期等相關信息,以便準確識別和記錄。
  5、儀器參數設置
  柱子與流動相選擇:根據樣品類型和需要,選擇合適的柱子和流動相,確保柱子的孔徑范圍與樣品分子大小相匹配,流動相的性質適合樣品的溶解和分離。
  流速與溫度設置:合理設置色譜儀的流速和溫度。流速的選擇應保證樣品在適當的時間內通過柱子,同時不影響分離效果;溫度的選擇應根據樣品性質和流動相的特性,以保證良好的分離效果和儀器的穩定性。
  檢測器與數據采集系統設置:確保檢測器和數據采集系統都已正確設置并校準,能夠準確檢測和記錄樣品的信號。

 

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