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IHC常見問題分析及處理

來源:上海研謹生物科技有限公司   2025年06月12日 14:36  

問題

原因

建議

結果中顯色過深

抗濃度過高或孵育時間過長

降低一抗濃度或減少孵育時間

孵育溫度過高

室溫或4℃孵育

辣根標記二抗教育時間長

縮短時間

IHS結果中非常異色顯著

石蠟切片脫蠟不徹底

延長脫蠟時間

操作過程中沖洗不充分

增加沖洗的次數與沖洗時間

組織富含內源性的生物素與過氧化物酶

使用相關試劑進行封閉

發生抗原異位


蛋白封閉不充分

增加蛋白封閉時間

IHS弱結果中顯色強

抵抗力過低或教育時間過短

增加一抗濃度或延長孵育時間

試劑超過保質期

實驗前確認試劑的保質期

操作過程沖洗過度

適度沖洗

IHS結果中無染色

組織中無目的抗原的表達


一抗種屬來源與二抗不匹配

實驗前確認一抗的種屬來源

色物質與辣根系統不匹配

實驗前確認顯色體系

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