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人B淋巴細胞的培養條件與方法及保存與應用!

來源:北京百歐博偉生物技術有限公司   2025年07月10日 16:54  

細胞簡介

平臺編號:Bio-132213

規格:1×10?Cells/T25培養瓶

細胞信息:WIL2-S

細胞名稱:(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞

細胞生長:懸浮生長

細胞形態:淋巴母細胞樣

細胞數量:1×106個細胞數

細胞特性:不分泌免疫球蛋白HAT敏感

細胞純度:94%

細胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)

細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

細胞凍存:液氮凍存(基礎培養基+10%DMSO+20%FBS)

細胞運輸:干冰運輸(1Vial)或活細胞運輸(T-25flasks)

細胞用途:只可用于科研不可用于臨床診斷和治療

注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產品信息以出庫為準)

 

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞培養條件:

1、培養基:RPMI-1640培養基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗+800ng/ml Taxol

2、溫度:37.0°C

3、氣體:空氣 95%,CO2 5%

 

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞培養方法:

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況:

如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,留10ml培養液繼續培養。

如果細胞已長滿(達80-90%)。即可進行傳代,具體步驟如下:

a,棄去培養液,用PBS洗1-2次。

b,向瓶內加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培養液,輕輕吹打細胞。

c,加入等量的的培養液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養

d,傳代比例:1:2-1:3

溫馨提示:培養瓶里面的培養液是加入*高藥物濃度的,為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是,首先加含200ng/mlTaxol藥物的培養液,放入培養箱,這段時間會有小部分細胞懸浮起來,屬于正常情況,通過換液可以去掉,等細胞待長滿就可以消化傳代了,這時可以一直用含藥物培養液來消化培養細胞,一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml,兩代后可以將藥物濃度提高至*高水平800ng/ml,含藥物培養液用于細胞培養都沒有問題,凍存的時候就不要在凍存液里加藥物了。

 

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞保存和應用:

客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。

 

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞復蘇的原則:

在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。

 

如何選購上等的(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞?

1)該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。

2)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

3)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

4)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

5)請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定。

 

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞售后服務:

1)發貨時附:細胞實拍圖片兩張、細胞培養說明、細胞操作處理方法、細胞質量問題反饋表等。

2)細胞污染問題,請在收到產品48小時內給我們真實的實驗結果;細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們真實的實驗結果,我們調查核實后予免費調換,不收取任何費用。

3)如用戶收到細胞8-15天之內因處理不當造成細胞死亡或污染,我公司將以6.5折優惠價重新提供一株原細胞。

4)如用戶在16-30天內因處理不當造成細胞死亡或污染,我公司將以8折優惠價重新提供一株原細胞。

 

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