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倒置熒光數字顯微鏡的使用與注意事項

來源：徠卡顯微系統（上海）貿易有限公司 2025年07月16日 14:01

倒置熒光數字顯微鏡是一種常用于生物學、材料科學等領域的實驗室儀器。它能提供高分辨率的熒光圖像，幫助研究者觀察樣品的微觀結構和分析細胞、組織或材料中的熒光標記物。以下是倒置熒光數字顯微鏡的使用方法及注意事項：

使用方法：

準備樣品：

將樣品處理并染色（如使用熒光標記物），確保樣品適合在熒光顯微鏡下觀察。

樣品通常需要固定并涂布在顯微鏡載玻片上。

安裝樣品：

將載玻片放置在顯微鏡的樣品臺上。調節樣品臺位置，使其與顯微鏡的光路對準。

倒置顯微鏡的樣品臺位于鏡頭下方，因此需要確保樣品的位置正確，避免光路中斷。

選擇適當的光源和濾光片：

根據所使用的熒光標記物，選擇合適的光源（如激發光源）和濾光片組。這些濾光片組用于激發和捕捉特定波長的光。

調整激發光源的強度，以確保熒光標記物能夠充分激發。

調整聚焦：

使用粗調焦和精調焦輪進行聚焦。由于熒光圖像通常需要較高的分辨率，因此需要小心調整，確保觀察到清晰的圖像。

觀察與拍攝圖像：

啟動數字相機或計算機連接的設備進行圖像捕捉。選擇合適的分辨率和圖像處理設置，以獲得高質量的圖像。

在觀察過程中，記得調整顯微鏡的其他參數，如曝光時間、增益等，以獲得最佳的圖像質量。

記錄和分析數據：

使用配套的軟件進行圖像的分析，如計數、測量、對比等。對于多重標記樣品，還可以使用軟件進行不同通道的分離和合成。

注意事項：

避免過度曝光：

長時間的曝光可能導致熒光標記物的漂白或圖像噪聲增加。因此，盡量避免過度曝光，并在必要時調節曝光時間。

避免熒光漂白：

熒光漂白會導致標記物喪失其熒光特性。使用較低強度的激發光并縮短曝光時間來減少漂白現象。

樣品固定：

確保樣品在制備過程中得到適當固定，避免細胞或組織的變形或流失。

定期清潔顯微鏡：

定期清潔顯微鏡鏡頭和濾光片，以保持圖像的清晰度和準確性。

小心操作光源：

熒光顯微鏡的光源（如激發燈）通常發熱，需小心操作，避免燙傷或對設備造成損害。

適當的溫度和濕度：

確保顯微鏡工作環境的溫度和濕度適宜，防止設備損壞或影響圖像質量。

使用倒置熒光數字顯微鏡時，嚴格遵循這些步驟和注意事項，可以幫助你獲得更高質量的熒光圖像，為科研工作提供準確的數據支持。

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