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小鼠 CXC 趨化因子配體 14(CXCL14)ELISA 試劑盒|茁彩生物

來源:上海茁彩生物科技有限公司   2025年08月04日 11:00  

小鼠 CXC 趨化因子配體 14(CXCL14)是 CXC 趨化因子家族的成員之一,又被稱為 BRAK(B - 細胞趨化因子)或 MIP-2γ(巨噬細胞炎癥蛋白 - 2γ)。其基因定位于小鼠特定的染色體上,編碼的蛋白質由特定數量的氨基酸殘基組成,分子結構中含有典型的 CXC 趨化因子結構域,即兩個半胱氨酸(C)之間隔有一個其他氨基酸(X)。

CXCL14 在小鼠體內的組織分布具有一定的特異性,在肝臟、腎臟、肺臟、腸道以及多種免疫器官(如脾臟、淋巴結)中均有表達,其中在某些正常組織中的基礎表達水平相對較高。在生理狀態下,CXCL14 的表達處于動態平衡,參與機體的免疫調節和生理過程。而在病理狀態下,如炎癥反應、腫瘤發生、組織損傷等,其表達水平會發生明顯變化。例如,在腫瘤微環境中,CXCL14 的表達可能上調或下調,通過影響免疫細胞的浸潤和腫瘤細胞的生物學行為,參與腫瘤的發生發展,因此成為相關研究領域的重要指標。

生理功能

CXCL14 在小鼠體內具有多種重要的生理功能,主要圍繞免疫調節、細胞趨化以及組織穩態維持等方面展開。

首先,強大的趨化作用。CXCL14 能夠特異性地吸引多種免疫細胞,如單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等向其濃度梯度較高的部位遷移。這種趨化作用在機體的免疫防御中至關重要,當病原體入侵或組織發生損傷時,CXCL14 被釋放,招募免疫細胞到達炎癥或損傷部位,啟動免疫應答,清除病原體并參與組織修復。

其次,參與免疫調節。CXCL14 可以調節免疫細胞的活性和功能,例如促進巨噬細胞的活化和細胞因子的分泌,增強機體的 innate 免疫(固有免疫)應答。同時,它還可能參與 adaptive 免疫(適應性免疫)的調控,影響 T 細胞、B 細胞的增殖、分化和功能,維持免疫系統的平衡。

此外,在組織穩態和修復中發揮作用。CXCL14 可能參與多種組織的正常生理穩態維持,在組織損傷后,其表達水平的變化可能促進成纖維細胞等細胞的遷移和增殖,加速組織的修復和再生過程。例如,在皮膚損傷愈合過程中,CXCL14 可能通過趨化相關細胞,促進傷口的愈合。

同時,CXCL14 與腫瘤的發生發展存在關聯。研究發現,在不同類型的腫瘤中,CXCL14 的作用可能具有雙重性,既可能通過招募免疫細胞抑制腫瘤生長,也可能通過促進腫瘤血管生成、腫瘤細胞遷移等方式促進腫瘤進展,具體作用機制因腫瘤類型和微環境而異。

檢測原理

小鼠 CXC 趨化因子配體 14(CXCL14)ELISA 試劑盒是基于酶聯免疫吸附試驗(ELISA)原理,專門用于定量檢測小鼠樣本(如血清、血漿、組織勻漿、細胞培養液、腹腔液等)中 CXCL14 含量的專業檢測工具。

該試劑盒的檢測原理以抗原與抗體的特異性結合為核心,具體檢測流程如下:試劑盒中的酶標板預先包被了針對小鼠 CXCL14 的特異性單克隆抗體。當加入待檢測的小鼠樣本時,樣本中的 CXCL14 會與酶標板上包被的抗體發生特異性結合,形成抗原 - 抗體復合物,這一過程通常在 37℃下孵育一定時間(如 60 分鐘),以保證結合充分。

孵育結束后,進行洗滌步驟(通常洗滌 3-5 次),將未與包被抗體結合的其他雜質、干擾物質等清洗去除,避免對后續檢測步驟產生干擾。接著,向酶標板中加入酶標記的抗小鼠 CXCL14 多克隆抗體(常用的標記酶為辣根過氧化物酶,HRP),該酶標抗體可與已結合在包被抗體上的 CXCL14 發生特異性結合,形成 “包被抗體 - CXCL14 - 酶標抗體” 的夾心結構,再次在 37℃下孵育一定時間(如 30-60 分鐘)后,進行洗滌以去除未結合的酶標抗體。

隨后,加入底物溶液(如 TMB 底物液),酶標抗體上的 HRP 會催化底物發生氧化還原反應,生成藍色的產物。顯色反應的強度與樣本中 CXCL14 的含量呈正相關,即樣本中 CXCL14 含量越高,顯色反應越強烈,藍色越深。

最后,加入終止液(如 2M 硫酸溶液)終止反應,此時反應液的顏色會由藍色變為黃色。使用酶標儀在特定波長(一般為 450nm,部分試劑盒可能需要參考 630nm 作為校正波長)下測定各孔的吸光度(OD 值)。根據試劑盒提供的 CXCL14 標準品(不同濃度梯度)制作標準曲線,將待檢測樣本的 OD 值代入標準曲線,即可計算出樣本中 CXCL14 的具體濃度。


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