產品介紹:
一、產品概述
Alexa Fluor 532蛋白標記試劑盒是一種用于將熒光染料高效、穩定地偶聯至蛋白分子的實驗工具。所包含的Alexa Fluor 532染料具有明亮的橙黃色發射光譜,激發峰約為532 nm,發射峰約為554 nm,適用于多種常見激光光源(如532 nm固態激光器或Ar離子激光器的532 nm線)。該試劑盒可實現對抗體、酶、受體蛋白及其他生物大分子的標記,從而在后續的熒光檢測、成像和定量分析中提供穩定的信號輸出。
二、標記原理
Alexa Fluor 532分子通常通過活化的琥珀酰亞胺酯(NHS ester)與蛋白分子上的伯胺基團反應生成穩定的酰胺鍵。蛋白分子中賴氨酸殘基側鏈上的氨基是主要反應位點。標記過程一般在中性至弱堿性緩沖體系(pH 7.2–8.5)中進行,以保證NHS酯的反應活性并減少水解。
整個偶聯反應步驟相對簡單,反應時間短,可在室溫下完成,反應結束后可通過試劑盒提供的純化介質去除未結合的染料,從而獲得高純度的熒光標記蛋白。
三、性能特點
高熒光效率:Alexa Fluor 532具有較高的摩爾消光系數與量子產率,能夠在低標記度下提供強信號。
光穩定性良好:染料分子結構穩定,在常規顯微成像或流式檢測條件下不易褪色,可滿足長時間檢測的需求。
標記反應條件溫和:在生理條件下進行偶聯,不易破壞蛋白的結構和活性。
光譜特性兼容性好:與常用熒光團如FITC、Cy3等相比,Alexa Fluor 532的發射波長區間與多色檢測中的通道分離度較高,減少信號串擾。
試劑盒組件齊全:包含反應所需的緩沖液、純化材料和詳細的使用說明,方便實驗人員直接操作。
四、應用范圍
Alexa Fluor 532蛋白標記試劑盒適合多種生物分析與檢測場景,包括:
流式細胞分析:用于標記抗體或配體,實現細胞表面分子定量檢測。
熒光顯微成像:適用于共聚焦顯微鏡、寬場熒光顯微鏡等成像平臺。
免疫檢測:可用于ELISA、免疫印跡及免疫沉淀等技術中的熒光信號檢測。
蛋白質相互作用研究:通過熒光標記跟蹤分子結合與解離過程。
高通量分析:與多色檢測體系配合,實現復雜樣本中多靶標的同時檢測。
五、操作注意事項
緩沖液選擇:標記反應前需將蛋白溶液置換為不含伯胺的緩沖體系,如PBS(不含胺)或碳酸鹽緩沖液,避免Tris等含氨基組分影響偶聯效率。
蛋白濃度與標記度控制:蛋白濃度通常保持在1–10 mg/mL范圍,標記度建議控制在適中水平,避免過量標記影響蛋白功能。
避光操作:Alexa Fluor 532對光較為敏感,標記反應及純化過程需盡量避光,以減少光降解。
儲存條件:標記完成后的蛋白應分裝保存于4°C短期保存或-20°C長期保存,避免反復凍融。
純化充分:確保游離染料被去除,以減少背景信號并提高檢測靈敏度。
六、光譜信息與檢測建議
激發波長(λ_ex):約532 nm
發射波長(λ_em):約554 nm
建議使用的濾光片組合:激發濾光片 525 ± 15 nm,發射濾光片 555 ± 20 nm
適配檢測平臺:流式細胞儀、熒光顯微鏡、熒光酶標儀等。
七、總結
Alexa Fluor 532蛋白標記試劑盒以其較高的熒光亮度、良好的光穩定性以及與常見光學系統的高度匹配性,能夠為科研人員在蛋白標記與檢測領域提供可靠工具。通過優化的反應體系和
產品名稱:Alexa Fluor 532蛋白標記試劑盒
產地信息:陜西 · 西安
包裝規格:產品提供瓶裝形式,常規包裝規格包括100 mg、250 mg 和 500 mg,亦可根據需求定制。
產品形態:可根據實驗需要提供為固體、粉末或溶液狀態,便于不同應用場景。
儲存建議:為保持產品的活性與穩定性,建議低溫冷藏保存。
廠家信息
西安暉瑞生物科技有限公司是一家集研發、生產和銷售為一體的科研試劑企業,專注于功能分子與高分子材料的開發與定制服務。公司擁有成熟的合成技術體系和豐富的實驗經驗,產品類型覆蓋多個研究方向,廣泛服務于高校、科研院所及企業實驗室。
主營產品包括:合成磷脂、PEG衍生物、嵌段共聚物、順磁/超順磁納米顆粒,金納米材料(納米金、金納米棒)、近紅外染料及其標記物、熒光標記的葡聚糖、BSA、鏈霉親和素、多種蛋白交聯劑、小分子PEG化合物等
此外,公司還提供點擊化學試劑、樹枝狀聚合物、環糊精、大環配體、熒光量子點、透明質酸修飾物、石墨烯及其氧化物、碳納米材料(包括碳納米管、富勒烯)等前沿材料,并支持客戶根據具體實驗目標進行分子結構與功能的定制開發。
暉瑞生物以技術驅動和服務導向為核心理念,致力于為科研人員提供穩定可靠的材料解決方案,助力科學研究高效推進。
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