【參數信息】
英文名稱:iFluor 488 Phalloidin
中文名稱:iFluor 488 鬼筆環肽
分子量:~1900
激發波長:493nm
發射波長:517nm
溶解性: 溶于 DMSO
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
iFluor 488 Phalloidin 是一種熒光標記的鬼筆環肽(Phalloidin)衍生物,由以下兩部分構成:
鬼筆環肽(Phalloidin):
來源于劇毒蘑菇 鬼筆鵝膏(Amanita phalloides) 的環狀七肽毒素(bicyclicheptapeptide)。
分子量<2000 Da,尺寸約 12-15 ?,具有高度親脂性。
iFluor 488 熒光染料:
新一代綠色熒光染料,激發/發射波長 Ex/Em = 493/517 nm。
相比傳統 FITC 染料,具有高亮度、強光穩定性(光漂白速率僅為 FITC 的 1/3)及 pH不敏感性(pH 4-10) 。
核心功能:
特異性標記細胞內的 絲狀肌動蛋白(F-actin) ,用于細胞骨架可視化,適用于組織切片、細胞培養物及無細胞體系。
【常見問題與解決方案】
1. 熒光淬滅
原因:光照、封片不當。
預防措施:
全程避光操作。
使用抗淬滅封片劑(如SlowFade™ Gold、ProLong™)。
2. 多色成像串擾
問題:與發射光譜相近的染料(如Alexa Fluor 488)易交叉。
解決方案:
染料搭配:選擇發射波長差異大的染料(如iFluor 488配iFluor 647)。
軟件校正:使用光譜拆分軟件減少串色。
3. 染色效果差異
細胞類型影響:
貼壁細胞(如HeLa):標準流程即可。
懸浮細胞:需離心固定,增加通透步驟。
疑難樣本(如組織切片):延長染色至90分鐘,或提高通透劑濃度。
4. 背景信號高
可能原因:
固定不充分或通透過度。
工作液濃度過高或清洗不充分。
改進方案:
優化固定時間(10-30分鐘)。
染色后增加PBS清洗次數(3次×10分鐘)。
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。
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