ODS色譜柱的鍵合化學解析

來源：深圳市恒譜生科學儀器有限公司 2025年08月13日 10:13

　　ODS色譜柱，即十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（Octadecylsilyl），是一種常用的反相色譜柱固定相。其鍵合化學解析如下：

　　一、鍵合原理

　　ODS色譜柱的鍵合原理主要是將十八烷基氯硅烷試劑與硅膠表面的硅醇基，經過多步反應脫去氯化氫（HCl），生成ODS鍵合相。這個過程中，硅膠表面的硅醇基（Si-OH）與十八烷基氯硅烷的氯硅基（Si-Cl）發生縮合反應，形成共價鍵，從而將十八烷基牢固地鍵合在硅膠表面。

　　二、鍵合相的分類

　　根據含碳量的不同，ODS鍵合相可以分為高碳、中碳及低碳型。這些類型的差異主要在于鍵合反應中剩余的硅醇基數量和鍵合相的表面覆蓋度，進而影響其極性和載樣量。一般來說，高碳ODS鍵合相載樣量大、吸附性能也大。

　　三、鍵合相的特性

　　1.非極性：ODS鍵合相為非極性固定相，適用于反相色譜。在反相色譜中，溶質按其疏水性大小進行分離。極性越大、疏水性越小的溶質越不易與非極性的固定相結合，因此會先被洗脫下來。

　　2.高效與耐用：ODS鍵合填料效率高、耐用，并能應用于很多種物質的分析。由于其長鏈烷基結構和高碳含量，使得ODS柱對各種類型的生物大分子有更強的適應能力。

　　3.廣泛的應用范圍：ODS色譜柱在生物化學分析工作中應用廣泛，特別是在氨基酸、小肽等生物分子的分析中表現出出色的性能。同時，它也適用于多種流動相，如甲醇、乙腈、水等極性物質。

　　四、使用注意事項

　　1.流動相的選擇：ODS色譜柱在使用時，應選擇合適的流動相。常用的流動相組合包括“甲醇-水”和“乙腈-水”。由于乙腈具有一定的毒性，通常優先考慮使用“甲醇-水”作為流動相。

　　2.pH值的控制：硅膠基質的鍵合相只能在一定的pH范圍內使用（如pH=2~7.5）。在分離肽類和蛋白質等生物大分子的過程中，經常要加入修飾性的離子對物質（如C?HF?O?）來調節流動相的pH值，以抑制氨基酸上α羧基的離解，增加其疏水性，從而延長洗脫時間并提高分辨率。

　　3.柱子的清洗與保存：實驗后應對ODS色譜柱進行清洗，以去除殘留的樣品和流動相。如果實驗中使用緩沖鹽，應用洪水相（如水或甲醇等極性物質）清洗較長時間以去除鹽分。清洗后，應將柱子保存在高比例的有機相中（如85%~95%的甲醇或乙腈）以防止硅膠的干裂和鍵合相的脫落。

　　ODS色譜柱的鍵合化學是基于硅膠表面的硅醇基與十八烷基氯硅烷的縮合反應。這種鍵合相具有非極性、高效與耐用以及廣泛的應用范圍等特點。在使用時，需要注意流動相的選擇、pH值的控制以及柱子的清洗與保存等問題。

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