熒光定量 PCR 一站式解決方案(3)
實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time polymerase chain reaction)是一種在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。它結(jié)合了PCR技術(shù)和實時熒光檢測技術(shù),能夠在PCR反應(yīng)過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況 [1],從而實現(xiàn)對靶DNA的定量分析。
【主要優(yōu)勢】
1全流程閉環(huán)
樣本→RNA質(zhì)檢→引物設(shè)計→qPCR→熔解曲線→2-??Ct差異分析→發(fā)表級圖表。
2 三大質(zhì)控
• RNA 260/280≥2.0,28S/18S≥2倍亮帶;
• 每對引物Blast+Oligo雙重驗證,確保單峰熔解曲線;
• ABI 7900經(jīng)典機型,96孔板CV<5%,Ct重現(xiàn)性
3樣本“不挑”
動物組織、細胞、血液、拭子、FFPE、外泌體……統(tǒng)統(tǒng)搞定!50 ng/μl RNA即可上機。
4真實案例
• 阿爾茨海默病:一次性驗證224個差異基因,qPCR結(jié)果與RNA-Seq趨勢100%一致,客戶3個月即接收《Journal of Neuroinflammation》。
• 植物抗逆:PbNHX1鹽脅迫研究,從RNA到數(shù)據(jù)僅用18天,助力客戶拿下國家自然科學基金。
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