一、背景及概述

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂是平板計數法中的選擇性計數培養基，使用量巨大。現行的國標規定ＶＲＢＡ的配制需煮沸2min3次，耗時費力且操作容易有燙傷和培養基噴射的危險。如何配制高效ＶＲＢＡ、減少實驗中的操作風險，已成為食品微生物實驗室檢測大腸菌群面臨的一個急需解決的問題。

二、制備方法

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂用于大腸菌群的固體平板檢測。

1）用于檢測原料膠中大腸菌群含量。

方法包括：

(1)將原料膠置于含有生理鹽水的無菌均質袋中，進行均質處理，得到均質處理產物；

(2)將均質處理產物置于無菌均質袋中，再向無菌均質袋中加入結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基，并進行第二均質處理，得到第二均質處理產物；

(3)將含有第二均質處理產物的均質袋進行平整化處理；

(4)將經過平整化處理的含有第二均質處理產物的均質袋進行靜置培養，得到可疑大腸菌群菌落；

以及(5)將可疑大腸菌群菌落接種于含有煌綠乳糖膽鹽肉湯培養基的試管中進行培養，以便確定大腸菌群菌落數，進而確定對原料膠中大腸菌群含量。

本發明的方法能夠有效提高檢出率，準確性強。

2）制備一種大腸菌群選擇性顯色培養基，其中每1000mL培養基含有如下重量的組分：

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂15-25g、特異性酶顯色底物5-25g、二甲基甲酰胺0.05-20g、酵母粉1-5g、乳糖1-8g、氯化鈉5-10g、磷酸氫二鉀3-5g、磷酸二氫鉀0.5-2g、月桂基硫酸鈉0.1-0.3g。本發明還提供了一種含有所述大腸菌群選擇性顯色培養基的檢測試紙。

本發明采用兩種特異性酶顯色底物進行復配使用，其對于大腸菌群的特異性和敏感度較單獨使用任何一種顯色底物顯著增強，且檢出率高、檢出時間短。

北京百歐博偉生物技術有限公司的微生物菌種查詢網提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務,是中國微生物菌種保藏中心的服務平臺，并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細胞、培養基為一體的大型微生物查詢類網站，自設設備及技術的微生物菌種保藏中心！歡迎廣大客戶來詢！