賽默飛(Thermo Scientific)NanoDrop One/OneC 微量紫外-可見分光光度計的技術使用說明,涵蓋儀器操作、測量步驟、注意事項及維護要點:
一、賽默飛NanoDrop One C儀器簡介
NanoDrop OneC 是一款用于微量樣本(0.5-2 μL)的紫外-可見分光光度計,無需比色皿,直接測量核酸、蛋白質、細胞培養物等的濃度和純度(如A260/A280比值)。
核心功能:
檢測核酸(DNA/RNA)、蛋白質(Bradford/Lowry/BCA法)、細胞密度(OD600)等。
波長范圍:190-850 nm(紫外-可見光)。
樣本體積:0.5-2 μL(無需稀釋)。
二、操作步驟
1、開機與初始化
開機:連接電源,按下儀器正面電源鍵,啟動配套軟件(NanoDrop One)。
初始化:
打開軟件后,儀器自動進行光源校準和基線校正(約1分鐘)。
確保測量 pedestal(檢測臂)清潔無殘留(用無塵紙蘸蒸餾水擦拭)。
2、選擇檢測模式
在軟件界面選擇檢測類型:
核酸(Nucleic Acid):DNA/RNA濃度(A260)及純度(A260/A280、A260/A230)。
蛋白質(Protein):A280或其他波長(如Bradford法測595 nm)。
其他應用(如OD600、用戶自定義波長)。
3、空白校正
抬起檢測臂,在上下 pedestal 各加1-2 μL空白溶液(如蒸餾水、緩沖液)。
放下檢測臂,點擊軟件中的“Blank”按鈕,完成基線校正。
4、樣本測量
抬起檢測臂,用無塵紙清潔 pedestal。
加1-2 μL樣本至下 pedestal(避免氣泡),放下檢測臂。
點擊“Measure”讀取數據,軟件自動顯示濃度、吸光度和比值。
測量后立即清潔 pedestal,防止交叉污染。
5、數據保存與導出
數據自動保存至軟件,可導出為Excel/CSV格式。
支持生成報告(PDF)或直接打印。
三、關鍵注意事項
1、樣本要求:
樣本需透明、無顆粒(避免散射光干擾)。
高濃度樣本可能導致信號飽和(DNA/RNA > 3700 ng/μL時需稀釋)。
2、清潔維護:
每次測量前后用無塵紙蘸蒸餾水或70%乙醇清潔 pedestal。
避免使用丙酮等腐蝕性溶劑。
3、校準與質控:
定期使用NIST標準參考物質(如SRM 2082)驗證準確性。
若基線漂移,重新執行空白校正。
4、常見問題:
誤差來源:樣本殘留、氣泡、 pedestal 污染。
A260/A280異常:蛋白質污染(比值<1.8)或苯酚殘留(比值>2.0)。
NanoDrop OneC 通過微量樣本快速檢測,適用于實驗室常規濃度分析。操作時需嚴格注意清潔和校準,以確保數據準確性。對于高通量需求,可搭配自動化模塊(如8聯板適配器)。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。