組蛋白去乙酰化酶(HDACs)通過催化從修飾蛋白中的乙酰賴氨酸上水解乙酰基團來調節細胞過程。在HDAC檢測中,熒光染料分子被連接到含有乙酰賴氨酸的肽段上。與肽段的結合會猝滅染料的熒光。經過HDAC處理后,將反應混合物與特異性針對非乙酰化賴氨酸的顯色溶液混合。如果HDAC從賴氨酸上去除了乙酰基團,該溶液將釋放染料從而產生熒光。因此,熒光與HDAC活性直接相關。
熒光HDAC2檢測試劑盒是一個完整的檢測系統,旨在用于檢測組蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的活性,適用于篩選和分析應用。該試劑盒采用方便的96孔板格式,包含進行100次熒光HDAC2活性測量所需的所有試劑。此外,試劑盒還包含純化的HDAC2酶和一種強效的HDAC抑制劑——三氟司汀(Trichostatin A),分別用作陽性和陰性對照。熒光HDAC2檢測試劑盒基于特別的熒光底物和顯色劑組合。該檢測方法消除了傳統檢測中涉及的放射性、萃取和色譜分析的步驟。使用該試劑盒,僅需在微孔板上進行兩個簡單步驟即可分析HDAC活性水平。首先,將含有乙酰化賴氨酸側鏈的HDAC熒光底物與純化的HDAC2進行孵育。去乙酰化作用使底物變得敏感,隨后用賴氨酸顯色劑處理時會產生可使用熒光讀取器測量的熒光團。
艾美捷BPS Bioscience-HDAC2熒光檢測試劑盒:
貨號:50062
同義詞:組蛋白去乙酰化酶、HDAC2、HDAC2檢測試劑盒、HDAC-2
試劑盒格式:熒光法
適用物種:人
儲存/穩定性:按照指示儲存時,該試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。試劑盒組分需要不同的儲存條件。務必在到達后將每個組分儲存于適當的溫度。
應用:
用于研究酶動力學。
篩選HDAC2的小分子抑制劑,用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用。
運輸溫度:-80℃
所需材料但未提供
水中0.1%(1 mg/ml)的牛血清白蛋白(BSA)溶液
能夠在350-380 nm激發和440-460 nm檢測的熒光光度計
可調節微量移液器及無菌吸頭
旋轉或搖擺平臺
結果示例:
圖:使用BPS Bioscience的HDAC2熒光檢測試劑盒(目錄編號#50062)測得的HDAC2酶活性。熒光強度是通過Bio-Tek熒光微孔板讀取器測量的。所展示的數據是特定批次的。
文獻參考:
1. Santo, L., et al., Blood. 2012 Mar 15;119(11):2579-89.
2. Bradner, J.E., et al., Nat Chem Biol. 2010 Mar;6(3): 238-243.
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