淋巴細胞介導的細胞毒性是一種針對細胞內病原體(包括病毒、某些細菌和寄生蟲)的細胞免疫形式。監測淋巴細胞介導的靶細胞毒性的最常見體外方法是細胞介導的細胞毒性檢測,例如ADCC(抗體依賴性細胞毒性)和TDCC(T細胞依賴性細胞毒性)。在這些檢測中,免疫效應細胞和靶細胞被共同培養。為了分析這種異質性細胞群體中免疫效應細胞的細胞毒性活性,能夠區分效應細胞和靶細胞群體是至關重要的,因為它們具有不同的表型。使用膜可滲透的熒光染料CSFE(羧基熒光素琥珀酰亞胺酯)在與效應細胞共培養之前對靶細胞進行標記,能夠清晰地區分活的效應細胞和靶細胞。與靶細胞孵育后,可以添加DNA嵌入染料7-AAD來標記正在死亡的靶細胞。這兩種染料具有不同的光譜特性,通過流式細胞術可以區分四種細胞群體:活靶細胞(CSFE?7-AAD?)、死靶細胞(CSFE?7-AAD?)、活效應細胞(CSFE?7-AAD?)和死效應細胞(CSFE?7-AAD?)。細胞毒性檢測對于理解CAR(嵌合抗原受體)T細胞和NK細胞以及基于抗體的免疫療法的效力至關重要。
細胞毒性染料試劑盒(CFSE,7-AAD)是用于確定效應細胞對感興趣靶細胞的細胞毒性特征的試劑盒。它包含用于在靶細胞和PBMC混合細胞群體中標記靶細胞的CFSE(羧基熒光素琥珀酰亞胺酯),以及用于標記死細胞的7-AAD(7-氨基放線菌素D)。CFSE和7-AAD標記使得通過流式細胞術在單細胞水平上檢測細胞毒性成為可能。試劑盒還包含檢測稀釋液。
艾美捷BPS Bioscience-細胞毒性染料試劑盒(CFSE,7-ADD):
貨號:82296
應用:在細胞毒性檢測中,通過流式細胞術分析活靶細胞、死靶細胞、活效應細胞和死效應細胞。
運輸溫度:-80℃
警告:避免凍融循環
科學分類:CAR-T細胞療法
監管狀態:僅供研究使用
儲存/穩定性:按照指示儲存時,該檢測試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。
所需材料但未提供
感興趣的效應細胞。
感興趣的靶細胞。
用于細胞培養的U型底96孔板。
T75細胞培養瓶。
結果示例:
圖:流式細胞術分析與效應PBMCs共孵育的CFSE標記NALM-6靶細胞。
將CFSE標記的NALM-6細胞與PBMCs以10:1(E:T)的細胞比例共孵育24小時,左側未添加,右側添加了抗CD19-抗CD3雙特異性分子(BPS Bioscience #100441),并用7-AAD染色15分鐘。密度圖中的CFSE?/7-AAD?群體對應于正在死亡的靶細胞(Q2-2)。
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