MDCK [NBL-2](犬腎上皮細胞)滲透模型:在藥物轉運研究中的核心應用
MDCK [NBL-2](犬腎上皮細胞)
別稱:Madin-Darby Canine Kidney (NBL-2) Cells;NBL-2;MDCK (NBL-2)
種屬與組織來源
物種:家犬(Canis lupus familiaris)
組織來源:成年雌性英國小獵犬腎臟(1958年分離自外觀正常的個體)
細胞類型:自發永生化上皮細胞
細胞特性與生物學特征
生長特性:貼壁依賴性生長,典型上皮細胞樣形態(多角形,緊密連接成單層)
功能特征:
角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性,明確上皮來源;
廣泛用于病毒學研究(如流感病毒、冠狀病毒培養)、藥物跨膜轉運模型及極性細胞功能分析;
在β-淀粉樣蛋白前體加工及蛋白水解產物研究中具有重要應用價值。
生物安全等級:BSL-1(基礎安全級別,適用于常規實驗室操作)
質量控制與鑒定
純度驗證:上皮細胞標志物(如E-cadherin、角蛋白)陽性表達;
無菌檢測:無細菌、真菌、支原體、HIV-1、HBV、HCV污染;
穩定性:傳代后保持典型形態與功能特性,可穩定擴增。
培養指南
推薦培養基:MEM(ATCC改良配方,貨號PM150467)+10% FBS(貨號164210)+1%青霉素-鏈霉素(P/S,貨號PB180120)
培養條件:37℃,5% CO?,飽和濕度;氣相環境為95%空氣+5% CO?
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養基
傳代操作:推薦1:2至1:4比例傳代,使用0.25%胰蛋白酶(含EDTA)消化
凍存條件:凍存液配方為55%基礎培養基+40% FBS+5% DMSO,液氮長期保存
應用與研究價值
MDCK [NBL-2]細胞是病毒學、藥理學及細胞生物學研究的經典模型,尤其適用于:
病毒復制機制研究(如流感病毒宿主適應性、抗病毒-藥物篩選);
藥物跨膜轉運模型(極性上皮細胞屏障功能分析);
阿爾茨海默病相關β-淀粉樣蛋白代謝研究。
保藏與來源信息
保藏機構:ATCC(CCL-34, CRL-6253)、ECACC(84121903, 85011435)
分離歷史:由S. H. Madin與N. B. Darby于1958年首-次建立,為最早的自發永生化犬腎細胞系之一。
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