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RAW 264.7細胞功能驗證:吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖

來源:武漢普諾賽生命科技有限公司   2025年08月18日 16:52  

RAW 264.7細胞(別名:RAW264.7、RAW-264.7等)是一種源自Abelson鼠科白血病病毒誘導腫瘤的小鼠單核巨噬細胞白血病細胞系,具有典型的巨噬細胞功能特性。該細胞系廣泛用于免疫學、炎癥反應及腫瘤微環境研究,因其無需胰酶消化、易傳代的特點,成為實驗中常用的工具細胞。

核心特性

種屬:小鼠(Mus musculus)
組織來源:Abelson病毒誘導的腫瘤;單核細胞/巨噬細胞起源
生長特性:貼壁生長,禁用胰酶消化(胰酶會誘導分化)
細胞形態:不規則形,存在少量分化細胞(屬正常現象)
生物安全等級:BSL-2(需在二級生物安全柜操作)



培養方案(默認方案A)

培養基配方

  • 基礎培養基:DMEM([PM150210])

  • 添加物:10% FBS([164210]) + 1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])

  • 無需額外成分:已包含細胞生長所需全部營養,直接使用

培養條件

  • 氣體環境:空氣(95%)+ CO?(5%)

  • 溫度:37℃

  • 推薦傳代比例:1:2 至 1:8(根據細胞密度調整)

  • 換液頻率:每2-3天更換新鮮培養基

關鍵注意事項

  1. 胰酶禁忌:嚴禁使用胰酶消化!胰酶會刺激細胞分化,建議用細胞刮刀輕柔吹打傳代。

  2. 傳代時效性:超過3天未傳代可能導致細胞自發分化,需密切監控密度。

  3. 分化現象:培養過程中出現少量分化細胞屬正常,無需過度處理。

  4. 凍存與復蘇: 

    • 凍存液配方:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO

    • 儲存條件:液氮(-196℃)長期保存,避免反復凍融。

生物學功能與應用場景

  • 吞噬與抗原呈遞:可胞飲中性紅,吞噬乳膠顆粒或酵母聚糖,具備巨噬細胞典型功能。

  • 免疫調控研究:LPS或PPD刺激后可誘導紅細胞分解,適用于炎癥信號通路(如TLR4)研究。

  • 腫瘤微環境模型:用于模擬巨噬細胞與腫瘤細胞相互作用,篩選免疫調節藥物。

背景與來源

  • 細胞起源:由Abelson病毒誘導的小鼠白血病模型建立,表面抗原sIg?、Ia?、Thy-1.2?。

  • 病毒安全性:XC斑點形成試驗陰性,無病毒顆粒分泌。

  • 保藏信息:ATCC(TIB-71)、ECACC(91062702)權-威機構保藏。

推薦操作流程

  1. 傳代步驟: 

    • 吸棄舊培養基,PBS輕洗1-2次。

    • 加入適量新鮮培養基,用細胞刮刀輕柔刮取貼壁細胞,吹打分散后分瓶。

  2. 凍存技巧: 

    • 收集對數期細胞,離心后重懸于預冷凍存液,逐步降溫(-1℃/min)后轉入液氮。

  3. 復蘇要點: 

    • 快速融化(37℃水?。?,離心去除DMSO后重懸,避免過度吹打。

RAW 264.7細胞以其穩定的巨噬細胞功能和便捷的培養特性,成為免疫與腫瘤研究中的理想模型。嚴格遵循無胰酶操作及傳代時效性,可最大限度維持細胞活性與功能。


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