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雙光束紫外可見分光光度計的核心在于其特殊的光學設計與檢測機制，旨在準確測量樣品對不同波長光的吸收特性，進而分析樣品成分與濃度。
儀器內部光源發出涵蓋紫外及可見光范圍的連續光譜，經光學系統處理后，被巧妙分割成兩束強度相同、波長對應的光線，一束為參比光束，另一束則為樣品光束。參比光束直接通過空白參比池，此參比池通常放置溶劑等不含待測物質的溶液，以模擬樣品所處的光學環境但無吸光物質干擾；樣品光束則穿過裝有待測樣品的樣品池。當這兩束光經過樣品池與參比池后，由于樣品中的物質對特定波長光存在吸收、散射等作用，致使樣品光束強度發生變化，而參比光束強度保持相對穩定(假設參比池無吸光干擾)。
隨后，兩束光分別聚焦于光電探測器上，探測器將光信號轉化為電信號。通過精密的電子電路與數據處理系統，對這兩個電信號進行比較與運算，依據朗伯 -比爾定律(A = εlc，其中 A 為吸光度，ε 是摩爾吸光系數，l 為光程長度，c 為待測物質濃度)，準確得出樣品在各波長處的吸光度信息，從而繪制出吸光度隨波長變化的光譜曲線，實現對樣品的定性與定量分析。
雙光束紫外可見分光光度計的使用注意事項：
1.環境要求：
-儀器應安裝在干燥、無塵的地方，避開外部光源和震動等對測試環境產生影響，以確保測試結果的準確性和牢靠性。
-實驗環境需要通風良好，有條件的地方可設置強制排氣裝置或在通風櫥中操作儀器。
2.電源與接地：
-需要使用穩定的電源電壓，工作環境附近不能有功率較大、頻率啟動的電氣設備。接地線需要可靠接地，不能用零線代替接地線。
3.儀器維護：
-定期對儀器進行保養和維護，如清潔光學元件、更換燈泡等。
-在進行能量校準時，應使用合適的能量校準標準，確保光源強度的準確性。
4.安全操作：
-在操作過程中，注意避免強光直射樣品室，以免影響測量結果。
-燃燒室與煙囪罩等高溫部件在操作過程中非常燙，不能將身體湊近或者用手觸摸這些地方，也不要從上而下張望。
-從廢液杯里流出的排放液要集中收集，適當處理，不要隨意處置。
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