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頂空氣相色譜系列講座(17)

來源:北京中儀宇盛科技有限公司   2015年08月31日 15:43  

頂空氣相色譜系列講座(17)  
人體血液中一氧化碳的分析——定量分析4  





二、氯化鈀法

原理——碳氧血紅蛋白與酸作用,釋放出CO氣體,它能定量地與氯化鈀作用。然后用紫外分光光度法測定反應后氯化鈀溶液的濃度,從剩余氯化鈀的量可求碳氧血紅蛋白的飽和率。

操作——1. 取擴散吸收池一個,在內槽中加入 3.0mL C(PdCl2 = 0.0025)mol/L溶液,在外槽一側加1.0mL C(H2SO4=1.8)mol/L溶液

              2. 取檢材血0.5mL置外槽另一側,立即蓋嚴蓋子,輕輕旋轉傾斜使硫酸與血混合,如室溫<5℃需水浴上稍加熱,放置1~2小時

3. 取出內槽中的氯化鈀溶液,過濾,濾液轉入50mL容量瓶中,用0.1mol/L鹽酸洗滌內槽三次,洗液濾入容量瓶中,然后用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,混勻后放置待測。

4. 取容量瓶中的清液置石英杯中,以0.1mol/L鹽酸作參比, 278nm處測紫外吸收。

5. 分別吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL( PdCl2 =0.025)mol/L溶液置50mL容量瓶中,用用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,同上平行操作分別測紫外吸收,得到氯化鈀的標準曲線。




計算——將檢血的氯化鈀吸收值與標準氯化鈀溶液的吸收值作比較,求出剩余氯化鈀容量,再求出相應的CO容量(見相關值表),然后根據檢材血的血紅蛋白含量計算碳氧血紅蛋白飽和率。

氯化鈀與一氧化碳相關值表

剩余 PdCl2(ml/50ml) CO(ml/100ml)   


碳氧血紅蛋白計算公式如下:

   HbCO% =     CO容量(ml/100ml)×100 ÷  血紅蛋白(g/100ml)×1.35



注意——1. 此法對新鮮檢材血可不考慮干擾問題,如是腐敗檢材血,可用醋酸鉛-醋酸

          溶液代替1.8mol/L硫酸溶液,以除去硫化物的干擾。

              2. 醋酸鉛-醋酸溶液配制,取10mL冰醋酸用水稀釋至100mL ,加醋酸鉛至飽

          和。

              3. 為保證檢材血和標準系列血中的血紅蛋白的濃度一致,平均校正因子為

          1.35

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