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BIOGHSC一步法超級熒光定量PCR試劑盒(探針)說明書

來源:常州百代生物科技股份有限公司   2016年02月14日 13:50  

產品特點

◎逆轉錄和定量PCR在一個反應管內一步完成,操作簡便快速;

◎使用我們研發的超級熱啟動聚合酶,反應特異性更高,酶動力更強,特別適合多重PCR反應;

◎反應緩沖液經充分優化,靈敏度高,zui低可檢測1pg總RNA中的目標片段,特別適合低拷貝RNA的檢測;                     

◎添加了百代生物RT-PCR活素,可明顯提升RT-PCR的產量,CT值一般早3-5循環,S型曲線更加典型。

產品介紹  

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit專為以RNA為模板的定量PCR檢測而設計,適合熒光探針法定量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit,逆轉錄和定量PCR在一個反應管內一步完成,中間無開管和移液動作,操作非常簡便,也大大提高了實驗的效率,并降低了反應的污染風險。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit使用我們研制優化的緩沖液,確保了反轉錄和定量PCR反應能夠快速、地完成。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit的檢測靈敏度可達到1pg總RNA,與其它品牌的同類產品相比,具有更高的檢測靈敏度。各反應成分以 Mix的形式提供,非常方便實驗者使用。

 

 

產品成分                                                     反應體系 

組    分

100個反應

250個反應

RNase free ddH2O

1ml

1.25mlx2

BIOGHSC  Super MultiProbe  Mix

1ml

1.25mlx2

BIOGHS Super Enzyme Mix

50ul

125ul

RT-PCR Enhancer

25ul

62.5ul

2xBIOGHSC Super MultiProbe  Mix

10μl

BIOGHSC  Super Enzyme Mix

0.5μl

RT-PCR Enhancer

0.25ul

上下游引物 (10μM)

0.6μl

TaqMan Probe (10μM)

0.5μl

模板RNA

10ng-1μg

RNase free ddH2O

加至20µl

 

 

 

 

 

 

 

 

 

說明1BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP MixMg2+BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超級逆轉錄酶和BIOG超級熱啟動聚合酶、熒光保護素。2、一般來說反應體系中引物終濃度為0.3μM可得到較好的擴增效果。進行多重PCR反應時,不同靶基因引物的濃度搭配可以在0.1-1.0μM范圍內進行實驗優化。 3TaqMan探針終濃度可以在0.1μM-0.45μM之間調整,進行多重PCR反應時,不同靶基因探針的濃度搭配應進行實驗優化。4qPCR反應靈敏性高,模板量的準確性對結果影響很大,建議將模板適度稀釋后加入,或用50ul反應體系。5、模板體積不超過反應體積的10%6、擴增產物長度請選擇在100bp-500bp范圍內,為100-200bp 7、配制反應體系時,避免震蕩混勻,以防氣泡產生。8、反應條件:先于42℃逆轉錄反應20分鐘,再于95℃加熱10分鐘,以激活熱啟動DNA聚合酶,然后95 15秒,60 35秒,35-40個循環。該反應條件可根據目標片段的大小、引物的Tm值、檢測基因的多少等適當調整。8、如果模板具有復雜二級結構,可將反應溫度提高至55℃,有助于提高產量。

 

 

 

儲存和穩定性  

干冰或藍冰運輸,-20°C 儲存,避免反復凍融   

如每次使用量較少,推薦小份分裝使用。

有效期

-20℃保存條件下,有效期為1年。

質量控制

所有組分經檢測均無核酸外切酶,核酸內切酶,RNase殘留。

 

注意 

本產品僅用于科研

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