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抗體使用常見問題解答2010/01/19: 使用抗體常見問題解答1、如何選擇合適的一抗？請先確定您要檢測的種屬和使用的實驗方法，然后查找相關(guān)產(chǎn)品，根據(jù)說明書上描述的“適用種屬和實驗方法”來確定合適的抗體。如果說明書中有明確您要檢測的種屬和實驗方法均經(jīng)過檢測，則您可以放心地購買該產(chǎn)品。2、如何選擇合適的二抗?二抗的選擇原則：針對一抗來源的二抗（比如一抗是小鼠來源的，二抗就要是抗小鼠的）針對一抗Ig亞型的（比如一抗是IgM，二抗就要是抗IgM的抗體）為了增加特異性、降低背景：可以選擇Fab段的抗體（去除Fc段的）、經(jīng)過標(biāo)本來源種屬血清吸附的的

植物RNA提取方法2009/12/31: 植物RNA提取方法1.取適量丹參材料于液氮中充分研磨，然后迅速轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中，立即加入異硫氰酸胍提取緩沖液600μl和60μl2MNaAc混勻。2.向管中加入600μl酚∶氯仿∶異戊醇（25∶24∶1），渦旋混勻10s，冰上靜置5min，4℃，12000g離心15min。3.取上清于另一離心管中，加入等體積600μl異丙醇，混勻，-20℃沉淀20min。4.4℃，12000g離心10min，棄上清。5.用75%乙醇洗滌RNA沉淀2次。6.室溫下晾干沉淀，用40μlDepcH2O溶解RNA

區(qū)分紫外可見分光光度計與可見分光光度計2009/12/23: 紫外可見分光光度計與可見分光光度計的區(qū)別是測定波長范圍不同，紫外一般用氫燈，測定波長范圍180～350nm,可見一般用鎢燈，測定波長范圍320～1000nm。所謂紫外可見分光光度計也就是說這個儀器可以更換光源，能夠測定吸收峰在紫外和可見光部分的化合物。發(fā)現(xiàn)吸光度超過2，便不再顯示，是正常現(xiàn)象。吸光度是透光率的負(fù)對數(shù)，吸光度超過2就是說透光率小于1％，低于儀器的檢出限，就不再顯示了。至于能不能用分光光度計，取決于你測定的波長。

酶標(biāo)儀酶免檢測項目2009/12/21: 目前國內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目，如：乙肝五項、愛滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法，報出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規(guī)定為：陰性對照品的OD值×2.5，通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。國內(nèi)多家機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀，酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀，并

常見的免疫檢測五大技術(shù)2009/12/18: （一）免疫酶染色試驗（immunoenzymestainingtest，IEST）免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養(yǎng)物涂片為固相抗原，當(dāng)其與待測標(biāo)本中的特異性抗體結(jié)合后，可再與酶標(biāo)記的第二抗體反應(yīng)形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物，后者可與酶的相應(yīng)底物作用而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見的呈色反應(yīng)。（二）皮內(nèi)試驗（intraderrpmaltest,ID）宿主在病原體刺激后，體內(nèi)產(chǎn)生親細(xì)胞性抗體（IgE和IgG4）。當(dāng)其與相應(yīng)抗原結(jié)合后，肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒，釋放生物活性物質(zhì)，引起注射抗原的局部

酸度計使用與保養(yǎng)電極2009/12/16: 目前實驗室使用的電極都是復(fù)合電極，其優(yōu)點是使用方便，不受氧化性或還原性物質(zhì)的影響，且平衡速度較快。使用時，將電極加液口上所套的橡膠套和下端的橡皮套全取下，以保持電極內(nèi)氯化鉀溶液的液壓差。下面就把電極的使用與維護(hù)簡單作一介紹：⒈復(fù)合電極不用時，可充分浸泡3M氯化鉀溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑浸洗。⒉使用前，檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下，電極應(yīng)該透明而無裂紋；球泡內(nèi)要充滿溶液，不能有氣泡存在。⒊測量濃度較大的溶液時，盡量縮短測量時間，用后仔細(xì)清洗，防止被測液粘附在電極上而污染電極。⒋清

移液器移液的兩種方法2009/12/11: 移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。zui后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)

酸度計標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配制及其保存2009/12/10: ⒈pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)保存在干燥的地方，如混合磷酸鹽pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在空氣濕度較大時就會發(fā)生潮解,一旦出現(xiàn)潮解,pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即不可使用。⒉配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級pH計測量，則可以用普通蒸餾水。⒊配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用較小的燒杯來稀釋，以減少沾在燒杯壁上的pH標(biāo)準(zhǔn)液。存放pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的塑料袋或其它容器，除了應(yīng)倒干凈以外，還應(yīng)用蒸餾水多次沖洗，然后將其倒入配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液中，以保證配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確無誤。⒋配制好的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液一般可保存2—3個月，如發(fā)現(xiàn)有渾濁

檢測收集標(biāo)本的成份是否足夠穩(wěn)定2009/12/07: 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。組

轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展2009/12/02: 轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)在本質(zhì)上都是通過獲得優(yōu)良基因進(jìn)行遺傳改良。但在基因轉(zhuǎn)移的范圍和效率上，轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)育種技術(shù)區(qū)別于兩點：首先，傳統(tǒng)技術(shù)一般只能在生物種內(nèi)個體間實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移，而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所轉(zhuǎn)移的基因則不受生物體間親緣關(guān)系的限制；第二，傳統(tǒng)的雜交和選擇技術(shù)一般是在生物個體水平上進(jìn)行，操作對象是整個基因組，所轉(zhuǎn)移的是大量的基因，不可能準(zhǔn)確地定位于某個基因進(jìn)行操作和選擇，對后代的表型預(yù)見性較差。而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所操作和轉(zhuǎn)移的是經(jīng)過明確定義的基因，功能清楚，可準(zhǔn)確預(yù)測后代。故轉(zhuǎn)基因技術(shù)是對傳統(tǒng)技術(shù)的發(fā)

細(xì)胞株培養(yǎng)細(xì)胞2009/11/27: 細(xì)胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞，也就是說，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限，可稱為有限細(xì)胞系，如可以連續(xù)培養(yǎng)，則稱為連續(xù)細(xì)胞系，培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。所以細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)

區(qū)分酸度計與ph計2009/11/26: 酸度計，pH計小常識。酸度是指樣品能與堿溶液進(jìn)行中和反應(yīng)的能力，PH值是指樣品溶液中氫離子活度的負(fù)對數(shù)·PH計測量的核心技術(shù)在于PH計電極，測量不同類型的樣品需要選擇相適應(yīng)得PH電極·PH計測量的誤差來源于PH計電極，PH計主機(jī)，PH標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的誤差·PH計溫度補(bǔ)償后的顯示值是樣品實際溫度下的PH值

實驗動物標(biāo)本采集方法2009/11/24: 實驗動物的體液（標(biāo)本）采集方法一、血液的采集常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈（動脈）采血、股動脈（靜脈）采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。二、尿液的采集實驗動物的尿液常用代謝籠采集，也可通過其他裝置來采集。（一）用代謝籠采集尿液代謝籠用于收集實驗動物自然排出的尿液，是一種特別設(shè)計的為采集實驗動物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠，有的代謝籠除可收集尿液外，又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實驗動物

移液器的移液方法2009/11/20: 移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。zui后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)

酶標(biāo)儀工作原理及結(jié)構(gòu)2009/11/19: 酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同.是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,zui后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果.微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方

Roche A（H1N1） RT-PCR檢測方案推薦2009/11/17: RocheA（H1N1）RT-PCR檢測方案推薦病毒核酸純化手動純化產(chǎn)品HighPureViralRNAKit配備去抑制緩沖液，有效去除抑制成分，后續(xù)實驗更有保證。操作時間更短，20min完成，節(jié)約1/3時間。病毒RNA得率更高。HighPureViralRNAKit11858882001100次自動化純化設(shè)備MagNAPureLC2.0/MagNAPureCompact全自動分離純化DNA、RNA和總核酸（PCR級純度）。適用樣本包括：全血、白細(xì)胞、外周血、單核細(xì)胞、培養(yǎng)細(xì)胞、動植物組織、石蠟

ph計配套使用的電極介紹2009/11/17: 酸度計（PH計）上配套使用的電極大多數(shù)采用的是復(fù)合電極，老一代酸度計尚在使用玻璃電極與甘汞電極。由于復(fù)合電極使用比較廣泛，以下主要討論復(fù)合電極。目前實驗室使用的復(fù)合電極主要有全封閉型和非封閉型兩種，全封閉型比較少，主要是以國外企業(yè)生產(chǎn)為主。復(fù)合電極使用前首先檢查玻璃球泡是否有裂痕、破碎，如果沒有，用pH緩沖溶液進(jìn)行兩點標(biāo)定時，定位與斜率按鈕均可調(diào)節(jié)到對應(yīng)的pH值時，一般認(rèn)為可以使用，否則可按使用說明書進(jìn)行電極活化處理。活化方法是在4%氟化氫溶液中浸3～5s左右，取出用蒸餾水進(jìn)行沖洗，然后在0.1

ELISA中三個必要的試劑2009/11/16: 在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進(jìn)行測定。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應(yīng)終止液。

分析影響ELISA中非特異性顯色的原因2009/11/13: 影響ELISA中非特異性顯色的原因很多，如試劑盒特異性、檢驗標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物，操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度，從而提高檢測的特異性，并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別，各

酸度計的適用領(lǐng)域2009/11/11: 酸度計是一種常用的儀器設(shè)備,主要用來精密測量液體介質(zhì)的酸堿度值,配上相應(yīng)的離子選擇電極也可以測量離子電極電位MV值，廣泛應(yīng)用于工業(yè),農(nóng)業(yè),科研,環(huán)保等領(lǐng)域.酸度計是測定溶液pH值的儀器。酸度計的主體是精密的電位計。測定時把復(fù)合電極插在被測溶液中，由于被測溶液的酸度（氫離子濃度）不同而產(chǎn)生不同的電動勢，將它通過直流放大器放大，zui后由讀數(shù)指示器（電壓表）指出被測溶液的pH值。酸度計能在0～14pH值范圍內(nèi)使用。酸度計有臺式、便攜式、表型式等多種，讀數(shù)指示器有數(shù)字式和指針式兩種（目前找不到指針式的

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