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組織研磨機(jī)對提取小鼠尾巴RNA的實驗步驟2016/12/12: 實驗步驟1、首先將上海凈信的組織研磨機(jī)上的制冷模塊預(yù)先置于-20℃，使用時取出安裝好。將研磨珠去RNA酶處理。2、隨機(jī)抽取小鼠的尾巴100µg，把樣本剪成盡可能小段，置于無RNA酶的2研磨單位離心管中（選擇耐液氮冷凍管子），同時加入1顆5號研磨珠和2顆3號研磨珠（如果選擇1.5研磨單位離心管，只需要加入4-5顆3號研磨珠）。3、放置于液氮中一起浸泡3分鐘，取出放置于預(yù)冷模塊中，在全自動樣品研磨儀上選擇13單位頻振研磨60s。（該步驟可以根據(jù)研磨的細(xì)微程度要求可以再重復(fù)一遍）4、把研磨好的樣本加入

高通量組織研磨儀研磨小鼠脛骨，人體關(guān)節(jié)軟骨，韌帶組織2016/11/15: 實驗?zāi)康难心テ扑榻Y(jié)締組織（小鼠脛骨，人體關(guān)節(jié)軟骨，韌帶組織）。實驗原理小鼠脛骨，人體關(guān)節(jié)軟骨，韌帶組織這些結(jié)締組織的韌性、硬度比普通樣品大，需配合液氮研磨才能得到較好的研磨效果。實驗材料和器具樣品：小鼠脛骨，人體關(guān)節(jié)軟骨，韌帶組織儀器：高通量組織研磨儀（上海凈信，JXFSTPRP-24）耗材：研磨罐（上海凈信，0.4研磨單位），研磨珠（上海凈信，6號，1顆）試劑：液氮若干實驗步驟1.準(zhǔn)備好0.4研磨單位（樣品量大的話，可選1研磨單位規(guī)格）不銹鋼研磨管，將研磨管和研磨球清洗干凈，并滅菌滅酶；2.將

植物組織研磨儀研磨玉米種子的試驗方法2016/10/27: 1）時間：2013/11/12注：***部分請與廠家工程師2）樣品：玉米種子3）儀器：主機(jī)，上海凈信科技植物組織研磨器（上海凈信實業(yè)有限公司生產(chǎn)）；配件，***毫升的鋼罐和直徑***毫米的研磨鋼珠4）實驗?zāi)康模悍N子檢測，選用高質(zhì)量的種子，杜絕或減少因種子質(zhì)量所造成的缺苗減產(chǎn)、減少盲目性和冒險性，控制有害雜草的蔓延和危害，充分發(fā)揮栽培品種的豐產(chǎn)特性，確保農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。5）步驟：a.取7、8顆預(yù)先烘干的玉米種子，分別放入***毫升的鋼罐中。b.每個鋼罐中放入直徑***顆***毫米的研磨鋼珠，分別將鋼罐蓋

高通量組織研磨儀針對中藥藥材DNA提取的研磨方法2016/09/19: 高通量組織研磨儀針對中藥藥材DNA提取的研磨方法實驗?zāi)康耐ㄟ^提取藥材的DNA，進(jìn)行DNA條形碼分子對照，進(jìn)而鑒定中藥。實驗原理通過對照藥材自身*的DNA條形碼記錄，可以準(zhǔn)確鑒定出中藥材品種。用DNA條形碼分子法鑒定中藥是藥典中一項重要的鑒定方法。實驗材料和器具樣品：甘草，陳皮，阿膠飲片儀器：高通量組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-24）耗材：不銹鋼研磨罐（上海凈信，10研磨單位），研磨珠（上海凈信）實驗步驟1.研磨樣品1.1分別稱取甘草、陳皮和阿膠飲片各1個研磨單位；1.2將樣品分別

高通量組織研磨儀對經(jīng)濟(jì)作物水稻、小麥種子的研磨2016/09/19: 高通量組織研磨儀對經(jīng)濟(jì)作物水稻、小麥種子的研磨實驗?zāi)康霓r(nóng)產(chǎn)品及種子檢驗，經(jīng)常需要對將植物種子進(jìn)行研磨以獲得DNA、RNA或蛋白質(zhì)等生物分子，從而進(jìn)行后續(xù)的分析和檢測。隨著實驗室科研進(jìn)度的日益加快，手動研磨已無法滿足科研工作的需要。本實驗通過高通量研磨破碎經(jīng)濟(jì)作物種子，進(jìn)而提取其核酸／蛋白質(zhì)進(jìn)行種子檢驗和分析。實驗材料和器具樣品：水稻，小麥種子儀器：多樣品組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-24）耗材：離心管，6號研磨珠（上海凈信）實驗步驟1.將烘干過的水稻，小麥種子若干，放入離心管中，

高通量組織研磨儀對動物器官組織的研磨2016/09/19: 實驗步驟每50～100mg組織加入0.2體積TRIzol1.加鋼珠1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿2.將上述勻漿液每0.2體積TRIzol試劑用量的勻漿液中加入0.04體積，蓋緊管蓋，手動劇烈震搖15秒鐘，然后室溫靜置2～3分鐘。3.4℃10,000g離心10分鐘。4.小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時計算所吸取的水相體積。不用過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)（中間層，白色）。5.加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙醇，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。6.室溫靜置10

提取動物關(guān)節(jié)軟骨組織總RNA2016/09/19: 提取動物關(guān)節(jié)軟骨組織總RNA實驗?zāi)康难心テ扑檐浌墙M織（大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨），提取其總RNA。實驗原理充分磨碎軟骨樣品（大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨），再用相關(guān)試劑提取其總RNA。實驗材料和器具樣品：大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨儀器：多樣品組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-24）耗材：研磨罐（上海凈信，***ml），研磨珠（上海凈信，***mm，***顆）試劑：液氮若干實驗步驟1.研磨軟骨組織1.1取適量大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨組織，剪切成約***立方厘米小塊；1.2將小塊軟骨組織置于液氮中***分鐘或放入***度冰箱冷凍30

ibidi血管生成、侵襲等實驗現(xiàn)象2016/08/24: 卡西波肉瘤是一種發(fā)生在包括口腔在內(nèi)的多種組織內(nèi)的，具有*的血管生成能力和侵襲能力的惡性腫瘤?？ㄎ鞑ㄈ饬鯧S已經(jīng)被鑒定出多種細(xì)胞標(biāo)記物，但是其來源依然是一個迷。美國的科學(xué)家之前發(fā)現(xiàn)卡西波肉瘤相關(guān)的皰疹病毒（KSHV）能夠使大鼠的原代間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）感染，變形，并且重新編輯，使其分化為類卡西波肉瘤細(xì)胞。在這次的實驗中，科研人員使用KSHV感染由多種組織來源的人原代間充質(zhì)干細(xì)胞，包括骨髓（MSCbm），脂肪組織（MSCa），牙髓，牙齦組織（GMSC），和乳牙?？蒲腥藛T成功的建立起來KSHV感染

活細(xì)胞成像：ASAP1直接影響細(xì)胞遷移機(jī)制2016/08/15: ASAP1調(diào)節(jié)以F-actin為基礎(chǔ)的結(jié)構(gòu)和功能，比如定點粘附性（focaladhesions,FAs）,質(zhì)膜折皺（circulardorsalruffles，CDRs），細(xì)胞伸展和遷移。ASAP1需要N端的BAR基團(tuán)發(fā)揮作用。美國的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)nonmusclemyosin2A(NM2A)在體外實驗中與ASAP1的BAR-PH串聯(lián)體直接結(jié)合。科學(xué)家用co-IP的方法在細(xì)胞內(nèi)定位了ASAP1和NM2A發(fā)現(xiàn)，如果下調(diào)ASAP1將會減少細(xì)胞內(nèi)NM2A和F-actin，并且會對細(xì)胞遷移，F(xiàn)As，細(xì)胞伸展

傷口愈合實驗2016/07/19: 傷口愈合實驗--TARBP2的類泛素化（SUMOylated）調(diào)節(jié)miRNA/siRNA作用小RNA介導(dǎo)的基因沉默對于基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄前調(diào)節(jié)尤其重要，但是，如何調(diào)節(jié)miRNA/siRNA的作用機(jī)理還并未研究清楚。上海交大醫(yī)學(xué)院的科研人員在2015年的NATURECOMMUNICATION上發(fā)的文章中研究調(diào)節(jié)miRNA/siRNA發(fā)揮作用的因子。研究表明，TARBP2的類泛素化（SUMOylated）不會對成熟的的miRNA的產(chǎn)物有左右，但是會影響miRNA/siRNA的效用。其會引入Ago2來形成R

炎癥應(yīng)答和單核細(xì)胞的粘附實驗之環(huán)境模擬2016/07/13: 愛爾蘭和瑞典科學(xué)家評估了一種抑制炎癥和平滑肌細(xì)胞增殖的新的藥物洗脫支架的治療效率。在這項研究中，科學(xué)家用CX3CR1作為靶向受體，用于預(yù)防單核細(xì)胞的粘附和炎癥反應(yīng)。使用AZ12201182（AZ1220），一種CX3CR1的拮抗劑，處理單核細(xì)胞；并且在流體狀態(tài)下，將AZ1220處理的單核細(xì)胞的在CX3CR1表面的粘附效率和沒有任何處理單核細(xì)胞的粘附效率進(jìn)行對比觀測。更進(jìn)一步，還研究了用AZ1220處理和沒處理的單核細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞表面的粘附效率。Biomaterials.2015Nov;69:22

活細(xì)胞骨架染色：實時觀察3D細(xì)胞培養(yǎng)微環(huán)境與細(xì)胞遷移的互作用2016/07/08: 2D細(xì)胞外基質(zhì)（ECMs）的物理特性會影響到細(xì)胞的粘附動態(tài)和形態(tài)，但是3D細(xì)胞外基質(zhì)的局部微環(huán)境對細(xì)胞的影響卻知之甚少。美國的科研人員構(gòu)建了幾種3D膠原基質(zhì)，研究其微結(jié)構(gòu)的變化對于調(diào)節(jié)3D狀態(tài)下的細(xì)胞粘附動態(tài)和細(xì)胞遷移的影響。細(xì)胞外基質(zhì)中有各種成束的纖維會加強局部可粘位點的堅固性，并且可以通過ECM/粘附偶聯(lián)點增強細(xì)胞的粘附穩(wěn)定性，并且高度柔軟的網(wǎng)狀聯(lián)合促進(jìn)了粘附的收縮力。3D粘附的動力學(xué)由局部的ECM的強度和整合素/ECM還有II型肌球蛋的收縮白共同調(diào)節(jié)。不同于2D遷移，3D的細(xì)胞遷移不僅受E

全內(nèi)反射熒光顯微實驗TIRF實驗2016/07/04: 整合素是一種跨膜蛋白，在介導(dǎo)細(xì)胞黏附到細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過程中發(fā)揮重要的作用。整合素在和配位體結(jié)合并發(fā)揮作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血細(xì)胞中介入激活整合素這一過程的原理并不十分清晰。美國的科研人員發(fā)現(xiàn)缺少成纖維細(xì)胞，talin或kindlin都不能激活β1整合素，從而不能粘附到纖維粘聯(lián)蛋白表面上；甚至不能由Mn2+介導(dǎo)的整合素粘連構(gòu)象發(fā)生轉(zhuǎn)變。使用Mn2+可以激活talin而不是kindlin缺陷細(xì)胞的部分整合素功能，使其活化和粘附在纖維粘連蛋白表面上。而具有方向性

通道載玻片--IL-33免疫熒光染色實驗2016/06/20: 細(xì)胞的免疫熒光實驗是一個基礎(chǔ)的細(xì)胞實驗，傳統(tǒng)的方法是在培養(yǎng)板中放入預(yù)先處理好的蓋玻片，待細(xì)胞貼壁后，使用鑷子將蓋玻片拿出再開始進(jìn)行固定，染色等系列工作。為了簡化這一工作，一系列底部適合直接成像的細(xì)胞耗材應(yīng)運而生，如圖：日本的科研人員在研究細(xì)胞因子IL-33在Ca9-22細(xì)胞中免疫熒光染色試驗時使用了一種通道載玻片。IL-33是一種在內(nèi)皮細(xì)胞中常規(guī)表達(dá)的細(xì)胞因子，其參與調(diào)節(jié)了先天免疫細(xì)胞的Th2細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。研究人員想研究增強IL-33表達(dá)的牙周內(nèi)皮細(xì)胞中牙周菌Porphyromonas

可視的細(xì)胞趨化實驗2016/06/17: 細(xì)胞趨化性（Chemotaxis，亦被稱為化學(xué)趨向性）是趨向性的一種，指細(xì)胞、細(xì)菌及其他單細(xì)胞、多細(xì)胞生物依據(jù)環(huán)境中某些化學(xué)物質(zhì)而趨向的運動。趨化性對細(xì)胞的發(fā)展和其他正常功能一樣*。在生物材料移植的時候，快速的纖維血管化是成功移植的先決條件之一。尿激酶型纖溶酶原激活物（uPA）和組織型纖溶酶原激活物（tPA）或纖溶酶原激活物抑制劑-1（PAI-1）在纖維蛋白溶解中都發(fā)揮了重要的作用。這三種蛋白近均被報道在無可溶纖維蛋白的細(xì)胞過程中有表現(xiàn)出*的作用，比如細(xì)胞粘附，遷移和增殖。德國的科研人員發(fā)現(xiàn)使用

免疫熒光實驗iPSC-derive神經(jīng)元的體外神經(jīng)毒性檢測2016/06/16: 如今神經(jīng)毒性檢測主要是依賴活體動物實驗，不僅有倫理問題，而且通常非常昂貴并且十分耗時。當(dāng)需要大規(guī)模的測試化合物的時候就不太合適了。因此，高通量的體外的神經(jīng)毒性測試就顯得十分必要了，而且可以使用人源的細(xì)胞直接進(jìn)行試驗，試驗結(jié)果的實用性也更佳。但是，到目前為止，人源干細(xì)胞誘導(dǎo)的神經(jīng)元并沒有適合進(jìn)行這類試驗的特質(zhì)，試驗時間較長，批次間差異大，并且有收到倫理和一些法律的制約，使得這種細(xì)胞都不太適用于做大規(guī)模的體外測試試驗。近，市面上出現(xiàn)了商用的人源iPSC-derive神經(jīng)元細(xì)胞，重復(fù)性好，可以用來做這

外分泌體含非編碼RNA影響內(nèi)皮細(xì)胞衰老和血管生成2016/06/16: 內(nèi)皮細(xì)胞，內(nèi)皮祖細(xì)胞，基質(zhì)細(xì)胞的信號在血管形成的時候是至關(guān)重要的。其中，外分泌體就是其中一種通信方式。有研究發(fā)現(xiàn)，外分泌體在免疫應(yīng)答，腫瘤存活，應(yīng)激反應(yīng)和血管生成上的細(xì)胞間通信有著非常重要的作用。在外分泌體中有mRNA和miRNA往往會對受體細(xì)胞產(chǎn)生影響。荷蘭的研究人員對外分泌體內(nèi)的microRNAmiR-214的研究發(fā)現(xiàn)，含有miR-214的外分泌體能夠抑制受體細(xì)胞的內(nèi)皮細(xì)胞的衰老，并且促進(jìn)血管生成的發(fā)生。與此同時，其還會抑制毛細(xì)血管失調(diào)癥突變體ataxiaangiectasiamutated

活細(xì)胞骨架染色中的應(yīng)用2016/06/06: Actin-肌動蛋白是細(xì)胞骨架*的一個組成部分，其在很多基礎(chǔ)的細(xì)胞活動中扮演著非常重要的角色。尤其在細(xì)胞形態(tài)，遷移和研究細(xì)胞機(jī)制中，肌動蛋白都是一個非常理想的觀測蛋白。肌動蛋白是由小球狀的G-actin聚合成絲狀的F-actin動態(tài)交互變化構(gòu)成的，從而參與了細(xì)胞活動中的各種細(xì)胞骨架的變化。通常研究活細(xì)胞中actin的活動用的是轉(zhuǎn)染actin-GFP融合蛋白的質(zhì)粒，可以同時標(biāo)記F-actin和G-actin，可以有效的反映出細(xì)胞骨架的相對活性，但是當(dāng)值需要觀測F-actin的時候，使用actin-

環(huán)形細(xì)胞侵襲實驗--使細(xì)胞侵襲的過程可視化2016/06/03: 腫瘤細(xì)胞的侵襲能力是腫瘤轉(zhuǎn)移的一個重要特征。為了研究腫瘤細(xì)胞侵襲過程的機(jī)制，一系列體外細(xì)胞實驗建立起來，用于研究細(xì)胞侵襲基底膜和基質(zhì)的過程。體外侵襲實驗首先是采用人工重構(gòu)基底膜材料Matrigel，可以在37℃逐漸凝固成膠，結(jié)構(gòu)與天然基質(zhì)膜結(jié)構(gòu)極為相似。通常的實驗是在孔徑8μm的濾膜上鋪上一層Matrigel，細(xì)胞不能自由穿過，必須分泌水解酶，并通過變形運動才能穿過。實驗之后通過對穿過“基質(zhì)膜”的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，來確定細(xì)胞的侵襲能力。這一方法非常仿真的模擬了細(xì)胞在生物狀態(tài)下的侵襲過程，但是其也有一

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1（TTG-1）影響肺癌細(xì)胞血管生成2016/06/03: 美國的科研人員通過對TTF-1的調(diào)控發(fā)現(xiàn)，TTF-1能直接調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），并且發(fā)現(xiàn)VEGF啟動子上有多處TTF-1響應(yīng)序列。比如，VEGF的主要受體，VRGFR2顯示出收到TTF-1的直接正調(diào)節(jié)。本文中顯示，低氧并沒有促進(jìn)TTF-1+肺癌細(xì)胞中的VEGF的表達(dá)。而采用外泌體培養(yǎng)基或者是去外泌體的培養(yǎng)基（EDM）時，TTF-1都能促進(jìn)VEGF表達(dá)。但在研究中意外的發(fā)現(xiàn)TTF-1+肺癌細(xì)胞的去外泌體培養(yǎng)基（EDM-TTF-1+）能夠內(nèi)皮細(xì)胞的血管形成。研究人員采用HUVECs，鋪在

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