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3D細胞培養--子宮內膜基質細胞eSCs和腫瘤血管內皮細胞2016/05/26
Eph和ephrin蛋白在協調細胞、細胞導向、細胞與細胞之間的相互作用中發揮著非常重要的作用,與發展的組織模式和器官和血管生成都有關系。Eph家族成員在人類腫瘤的發展過程中有著非常關鍵功能,在正常的子宮內膜的血管化再生組織和人子宮內膜具有多向分化潛能的間充質干細胞(EMSC)有能檢測到Eph家族的蛋白表達,而其他高度血管化的人體器官卻沒有Eph的表達。澳大利亞的科學家發現,將EphA3+orEphA3-depletedeSCs和tumour-derivedendothelialcells(TEC
傷口愈合實驗-干細胞侵襲2016/05/26
傷口愈合實驗是體外研究細胞遷移的的一個有用的實驗。原理是人為的在鋪板的單層細胞中制造一個空白的無細胞的地帶,然后對這個無細胞地帶的邊緣的細胞進行觀察;這些邊緣的細胞會開始進行遷移活動,并且終覆蓋整個無細胞的區域,重新互相接觸在一起。法國的科研人員在2015年的STEMCELL上發的文章中提出神經生長因子(NGF)和神經生長因子前體(proNGF)會自動的激活乳腺癌干細胞,并且發生侵襲。文中,使用乳腺癌細胞系和腫瘤分離的細胞進行傷口愈合實驗,得出,由NGF處理的腫瘤離的乳腺癌細胞的傷口愈合速率有非
細胞趨化實驗細胞 對高濃度的IIIA4有負趨向行為2016/05/24
細胞趨化性(Chemotaxis,亦被稱為化學趨向性)是趨向性的一種,指細胞、細菌及其他單細胞、多細胞生物依據環境中某些化學物質而趨向的運動。趨化性對細胞的發展和其他正常功能一樣*。EphA3在間充質細胞(eMSCs)中發現表達,但沒有在其他的血管連接組織有表達。澳大利亞的科研人員發現在人間充質細胞(MSCs)中表達的EphA3能夠在成人血管生成的早期發揮作用。在研究MSCs細胞對于血管生成的信號相應的實驗中,研究人員使用過表達EphA3的MSCs處于EphA3的一個“興奮劑”IIIA4的一個穩
鈣離子成像顯著增強了B細胞受體介導的Ca2+活動2016/05/23
在生物有機體內,鈣離子傳遞了各種各樣的胞內信號,這些信號幾乎在每種類型的細胞中都存在,而且在很多方面都有非常重要的作用。在很多細胞活動的時候,胞內鈣離子的濃度會顯著升高。鈣離子成像是利用鈣離子特異染料,將細胞中的鈣離子濃度通過熒光強度表現出來,從而達到檢測細胞活動的目的。德國的科學家通過研究B細胞胞質中鈣離子濃度來研究RhoGTPaseRac對于B細胞功能的重要影響,研究發現,RacPLCγ2可以通過增強胞漿內的Ca2+濃度來影響B細胞受體(BCR)發揮作用。文中,研究人員用BCR和Ca2+分別
細胞共培養--CD34前體干細胞對內皮細胞團的旁分泌影響2016/05/17
細胞共培養實驗是將2種或2種以上的細胞共同培養在同一環境中的實驗,更好的模擬體內細胞互相通信的生理情況。一般有兩種共培養方法:1)直接接觸共培養體系:是指直接將2種或2種以上的細胞按照一定比例混合,鋪在一個孔中;2)間接接觸共培養體系:是指將不同種類的細胞共用一種培養環境,而不互相接觸,查看細胞分泌因子對另外的細胞的影響。這里我們介紹的是采用間接接觸共培養的方法,研究CD34祖細胞的分泌物對由內皮細胞組成的細胞團在血管形成上的影響。文中,研究人員將CD34祖細胞和內皮細胞團共培養后發現,CD34
細胞剪切力實驗2016/05/16
生物體內存在的機械力,比如流體剪切力對內皮細胞有著非常多的影響。在血管中,不規則的亂流通常和血管的疾病(比如,動脈粥樣硬化)是相關的,并且能直接影響內皮細胞的分化和凋亡。因此,2015年,瑞士的一個研究小組在淋巴管中研究不規則的剪切力的作用中發現,不規則的剪切力和轉錄因子FOXC2共同在在淋巴管形成中有著非常關鍵的作用。在體外培養的淋巴管內皮細胞中,FOXC2受到振蕩剪切力的刺激會高表達,并且增強細胞間的,降低細胞的增殖率;而FOXC2的失活會使細胞對不規則的剪切力敏感,使細胞連接分解并且促進細
細胞成團和細胞出芽實驗2016/05/12
導言近幾年來,3D(threedimensional)細胞培養系統開始成為生物學研究新的研究方法。使用3D系統培養系統能更好的模擬生物體內的真實生理環境,而2D(傳統的貼壁培養)細胞培養系統不能有效的模擬細胞在生物體內的生理環境。3D細胞技術有很多種方法,使用多細胞形成的細胞團是其中主要的研究應用之一。細胞團是微小的細胞聚集簇,可以用來研究3D情況下向外生長的情況(細胞出芽)。一.實驗原理目前有幾種方法可以用來生成細胞團。所有方法的原理都是防止細胞貼壁,并且創造環境增強臨近細胞間的細胞外基質的粘
共聚焦成像——如何讓細胞在玻璃底培養皿更好地貼壁2016/05/11
很多童學做共聚焦成像的時候都會遇到細胞貼壁難的問題。今天分享下如何處理玻璃底培養皿、如何選擇玻璃底培養皿,讓細胞妥妥地貼壁,大家做共聚焦時候能夠更得心應手。市面上常見的玻璃底培養皿,通常是在塑料培養皿底部打個洞,再將厚度為170-220μm的蓋玻片或細胞爬片用無影膠水或硅膠粘于培養皿底部。并不是整個培養皿的底部都是玻璃材質的。適用于觀測的區域僅僅在打孔的區域。但是由于玻璃的疏水性,往往在培養細胞的時候,細胞不能在玻璃上很好地貼壁,生長狀態并不好,甚至在做共聚焦掃描成像的時候發生細胞脫片的現象。圖
通道載玻片--新的免疫熒光方法2016/05/11
細胞的免疫熒光實驗是一個基礎的細胞實驗,傳統的方法是在培養板中放入預先處理好的蓋玻片,待細胞貼壁后,使用鑷子將蓋玻片拿出再開始進行固定,染色等系列工作。現在分享一種簡便的免疫熒光方法,無需爬片,培養-操作-鏡檢,在一個培養皿/載玻片上完成所有工作!一氣呵成!使用如圖的培養皿和載玻片,免疫熒光步驟將簡化為:1.直接細胞培養2.沖洗玻片/培養皿3.固定細胞4.沖洗玻片/培養皿5.染色6.沖洗玻片/培養皿7.凍存液處理細胞8.直接鏡檢觀察免去了指甲油封片的傳統免疫熒光方法中的冗長步驟:1.無需對蓋玻片
激光共聚焦實驗的樣品準備方法對比2016/05/05
激光共聚焦實驗的樣品準備方法對比——無需細胞爬片的樣品準備新方法VS傳統方法激光共聚焦顯微鏡可以觀察到細胞內已經標記好的蛋白質和分子,為生物學研究提供了更直觀的觀測方法。如今,激光共聚焦成像已經是一個非常常規的實驗操作,應用于生物學各個研究領域中。在細胞實驗中,如果要進行一次激光共聚焦成像,除了要知道相關的顯微鏡參數設置和操作以外,樣品的準備也是非常重要的一環。傳統方法由于激光共聚焦實驗對觀測耗材的底部有著比較高的要求,普通的培養皿,培養板或者培養瓶都不能直接用于激光共聚焦成像。1.比較常用的是
探討流體剪切力對細胞活動的影響2016/05/05
探討流體剪切力對細胞活動的影響--流體剪切力對細胞吸收人造細胞器的影響丹麥奧胡斯大學的納米科學近日在SMALL雜志上發表了一篇關于納米材料作為有細胞活性人造細胞器的文章。文章介紹了個有趣的現象:細胞在剪切力條件下培養的時候,會吸收更多的納米顆粒,并且沒有附加的細胞毒性。文章中采用了內皮細胞和巨噬細胞做為實驗細胞。將細胞培養在ibidi通道載玻片中,之后使用含有納米顆粒的培養基,以一定的剪切力刺激細胞,細胞吸收的納米顆粒的量比靜置狀態下有顯著的升高。分享一下這個實驗的細節,或許大家可以從中找到自己
流體剪切力實驗2016/04/26
流體剪切力實驗:流體環境下的HUVEC細胞培養,真實還原體內環境這里我們以HUVEC細胞為例,使用ibidi流體剪切力系統進行一個流體條件下的細胞培養與靜置狀態下的細胞培養的對比實驗。一.實驗準備實驗材料及設備細胞:HUVECs細胞系培養基:EndothelialCellGrowthMedium(PromoCell,Germany,C-22010)胎牛血清培養耗材:ibidi單通道載玻片μ-SlideI0.6Luer(ibidi,Germany,80186)灌流管,15cm,1.6mm直徑(ib
細胞趨化實驗新方法(二)--實時觀察細胞動態2016/04/26
細胞趨化實驗新方法(二)--實時觀察細胞動態案例:細胞作為趨化因子上篇ibidi細胞趨化應用中(見鏈接:)以Dendriticcell對CCL19細胞趨化反應為例介紹了細胞趨化的新方法。本案例將介紹如何用細胞作為細胞運動的化學趨化因子。如圖所示:觀測通道中可以使用貼壁細胞,或者是3D培養的細胞。用于趨化的細胞可以直接注入其中一個儲液池中(圖一)。圖一:A待觀察細胞為貼壁細胞,受到左邊的儲液池中細胞影響具有了趨化行為。B待觀察細胞為3D培養細胞,在基質膠中同樣也受到了儲液池中的細胞的影響具有趨化行
細胞趨化實驗新方法:可實時觀察細胞動態2016/04/26
細胞趨化實驗新方法:可實時觀察細胞動態細胞趨化性(Chemotaxis,亦被稱為化學趨向性)是趨向性的一種,指細胞、細菌及其他單細胞、多細胞生物依據環境中某些化學物質而趨向的運動。趨化性對細胞的發展和其他正常功能一樣*。在這里,我們以小鼠樹突狀細胞為例,介紹一個細胞的化學趨化實驗。一、實驗材料準備:儀器:細胞培養箱(高濕度,37℃,5%CO2)倒置顯微鏡,具有10X相差物鏡和定時拍照功能鏡載加熱孵育系統(37℃,5%CO2)可選配置:全自動載物臺,自動對焦系統分析軟件:可選用手動分析軟Image
傷口愈合/細胞劃痕實驗新方法-如何劃出筆直均一的劃痕2016/03/31
前言傷口愈合實驗是體外研究細胞遷移的一個有用的實驗。原理是人為的在鋪板的單層細胞中制造一個空白的無細胞的地帶,然后對這個無細胞地帶的邊緣的細胞進行觀察;這些邊緣的細胞會開始進行遷移活動,并且終覆蓋整個無細胞的區域,重新互相接觸在一起。傳統實驗方法細胞在培養皿內貼壁后,使用移液槍的槍頭在貼壁細胞的中間劃過,人為造成一道傷口(劃痕),之后定時測量劃痕的寬度,進而得到傷口愈合的細胞遷移數據。實驗缺點:1.手動劃痕,不能保證每次劃痕的一致;2.有時候在劃細胞的同時會刮壞一片細胞,對劃痕的邊緣的細胞造成機
如何快速找回之前觀察過的細胞2016/03/29
前言無論原發性腫瘤還是繼發性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。多數惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此,血管生成在腫瘤的發展轉移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發展和擴散轉移。于是體外的血管生成實驗就能很好的模擬腫瘤的血管發生過程,并且適合研究藥物對這一過程的影響實驗。本實驗以HUVEC細胞為例,介紹這一實驗的詳細過程。圖1培養皿底部帶計數格坐標圖2培養皿底部計數格的示意圖步驟:找到感興趣的細胞后,記下
血管生成實驗步驟-實驗方法完善版2016/03/29
前言無論原發性腫瘤還是繼發性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。多數惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此,血管生成在腫瘤的發展轉移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發展和擴散轉移。于是體外的血管生成實驗就能很好的模擬腫瘤的血管發生過程,并且適合研究藥物對這一過程的影響實驗。本實驗以HUVEC細胞為例,介紹這一實驗的詳細過程。圖一血管生成鏡檢圖一.實驗材料和實驗方法1.實驗材料2.實驗方法:2.1實驗流程介紹
高通量組織冷凍研磨機用途與特點2016/01/25
高通量組織冷凍研磨機產品用途:1.適用于各種植物組織包括根、莖、葉、花、果、種子等樣品的研磨破碎;2.適用于各種動物組織包括大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結、肌肉、骨骼等樣品的研磨破碎;3.適用于真菌、細菌等樣品的研磨破碎;4.適用于食品、藥品成分分析檢測的研磨破碎;5.適用于易揮發樣品包括煤炭、油頁巖、蠟制品等樣品的研磨破碎;6.適用于塑料、聚合物包括PE、PS、紡織品、樹脂等樣品的研磨破碎。高通量組織冷凍研磨機具有什么特點1、可干磨、濕磨以及低溫研磨。2、研磨快速,2-4分鐘
玉米種子高通量研磨提取DNA、RNA、蛋白質2015/08/13
大量提取玉米種子核酸和蛋白質時,離不開對樣本的高通量研磨。上海凈信經過反復研究檢測,研發出的全自動樣品快速研磨儀有效實現了高通量研磨、研磨效果出色等特點。只要4步!得到夢寐以求的樣本質量:1.根據離心管/研磨罐容量,放入適量玉米種子和研磨珠2.如果是濕磨,加入適量提取液3.將離心管/研磨罐放入適配器中,將適配器固定在研磨儀中4.設置對應參數,啟動研磨儀,研磨1-2min研磨效果圖圖1玉米種子干磨圖2玉米種子濕磨研磨后提取DNA圖3不同研磨方式的玉米種子提取DNA效果對比想了解更多實驗結果對比,歡
第二軍醫大學教您如何用凈信研磨儀破碎動物心血管組織樣品2015/07/24
第二軍醫大學某實驗室近期心情非常愉悅,因為老師們解決了一件非常煩心的事情。他們在做藥物代謝原理分析實驗時,需要對采集到的大量的受試大鼠心血管組織樣品進行破碎處理,用于后續做不同方法的對比分析。然而,使用實驗室現有的組織勻漿器,不僅一次處理通量少、易污染且難清洗,還會浪費實驗樣本,處理后的樣品還不夠均勻細致,基本達不到做后續分析實驗的要求。為此,實驗項目一度無法大規模開展。2014年6月,實驗室人員網上找到上海凈信實業發展有限公司,并申請試用JXFSTPRP全自動樣品快速研磨儀進行樣品破碎處理,在
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