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腫瘤細胞體外傳代培養及保種2023/12/21

一.細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養基質混勻細胞沉淀，再1500轉/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養基質，將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質會變黃，5.0ml細胞懸液可傳代一個方瓶培養，可用3

組織切片的免疫熒光標記實驗2023/12/21

免疫熒光標記技術（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PBS抗體儀器、耗材玻片加濕盒實驗步驟1.將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。2.待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片

免疫熒光實驗方法中需要注意的環節2023/12/21

免疫熒光方法中的重要環節:1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內部結構破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰丙酮等固定液進行固定5-10min，尤其要較長時間保存的白片，一定要及時固定和適當保存。3、血清封閉：為防止內源性非特異性蛋白抗原的結合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調整的，一般10-30min。4、一抗孵育條件：在免疫組化反應中最重要，包括孵育

多重 PCR 擴增實驗2023/12/21

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發現Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數需要.如果需要提高PCR產物的特異性，應該使用熱啟動聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，應該在PCR反應混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板，選擇的STR標記的大小應該是78~250bp,因為這些DNA模板的完整性不定。參照D

細胞黏附技術2023/12/21

細胞黏附性是維持組織結構穩定的基本條件，也是細胞運動和發揮功能的調節因素，并且對細胞的增殖、分化有重要影響。通常可分為兩類，即細胞與細胞黏附和細胞與基質黏附。機體內許多細胞，如上皮細胞，需要牢固地定在某處發揮功能；另一些細胞，如白細胞，活躍運動，就需要不斷調節細胞黏附。細胞黏附性的改變在腫瘤轉移過程中也發揮著重要作用。體外測定細胞粘附性實驗方法的建立，為粘附分子的發現、細胞間粘附影響的研究提供了極為有效的方法。公司擁有專業的實驗室、先進的實驗設備和經驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員（博士

動物實驗在現在的意義2023/12/21

動物實驗（又名動物實驗或者動物研究），當今有爭議的話題之一，是指在科學研究中使用動物進行試驗。雖然使用動物來研究人類成為流行是在1859年查爾斯.達爾文提出進化論之后，但是文獻記載早在公元前4世紀，希臘杰出古典哲學家亞里士多德就已經開始使用活體動物做試驗。動物實驗(AnimalExperiment)指在實驗室內，為了獲得有關生物學、醫學等方面的新知識或解決具體問題而使用動物進行的科學研究。動物實驗必須由經過培訓的、具備研究學位或專業技術能力的人員進行或在其指導下進行。實驗動物科學發展的終目的，就

大鼠腦缺血再灌注損傷模型2023/12/20

大鼠腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦缺血再灌注損傷模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內動脈，用無菌縫合線結扎，血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準：大鼠出現癥狀如偏癱，對側前肢下垂和站立不穩。Bederson評分在1-3分，48小時內沒有死亡，就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。大鼠腦缺血再灌注損傷模型優點：無需開顱，創傷較小；缺血部位相對固定，可控性好；可實現腦缺血后再灌注，是理想的標準局灶性腦缺血動

動物實驗的小鼠為啥總不能生？2023/12/20

1生不出來一般小鼠生不出幼崽存在以下幾個原因：1、周齡太長。一般小鼠最適配種周齡6-8周，不會超過3月齡。超過3月齡配種，容易影響繁育能力。2、遺傳因素導致胚胎發育到一定階段后死亡。3、雌鼠生殖系統有問題，比如雙陰道、陰道閉鎖等導致無法生育。4、雄鼠不給力，比如生殖器異常，無法完成交配行為等。5、營養狀況：過度肥胖和過度瘦弱的雌鼠，都不能有效哺乳幼崽。順帶一提，肥胖雄鼠不能進行正常的爬跨和交配，質量也不好。2已生育但是成活率低小鼠幼崽成活率低主要是因為這幾個頗有“戲劇性"的原因。一、母性差。小鼠

達為科動物實驗中心經典模型目錄2023/12/20

我們擁有專業的實驗室、先進的實驗設備和經驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、較好的服務平臺，為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。我們的目標是為了使您的工作更輕松、更快捷。為了實現一站式服務我們不斷更新實驗方法和引進新的產品，控制和降低各種成本，為您的研究加油。這既是一項長期而艱巨的工作，又是一項光榮的

MPTP誘導的帕金森氏模型技術服務2023/12/20

藥品：1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)是一種廣泛使用的化學物質，用于在動物體內誘導類似于PD的狀態，注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動物：成年雌性Balb/c小鼠，10周齡。造模：成年雌性Balb/c小鼠，連續7天給予MPTP(15mg/kg/天)，腹腔注射。模型的評價：1.曠場活動測試（Openfieldlocomotionactivitytest）：曠場(45cm×45cm×25cm)準備好，將小鼠放入盒子中，熟悉

肺功能檢測2022/10/28

實驗周期：4-6weeks建模方法：建模方式：SPF小鼠，適應性飼養1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香煙的方法建立COPD小鼠動物模型分別于第1、29經鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香煙法，將小鼠放入自制的玻璃熏箱，10支/次，30min/次，5d/周，共4周。模型評價一般觀察：一般情況空白對照組小鼠無死亡，毛發光澤，呼吸均勻，活動正常；模型對照組小鼠毛發無光澤，部分有脫毛現象，躁動，熏煙時喜扎堆，倦怠蜷縮，汗出，腹部脹大，呼吸急促，出現點頭運動，甚者張口呼吸明

慢性阻塞性肺病(COPD)小鼠模型的建模方法2022/10/28

實驗周期：4-6weeks建模方法：主要試劑：紅金龍香煙（湖北中煙工業有限責任公司生產，烤煙型，每支含焦油量9mg、煙氣煙堿量0.7mg、煙氣一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美國Sigma公司），TNF-alpha和IL-18ELISA試劑盒cloud-clone公司）。建模方式：SPF小鼠，適應性飼養1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香煙的方法建立COPD小鼠動物模型分別于第1、29經鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香煙

大鼠子宮內膜薄型模型簡介2022/10/14

實驗動物健康，成熟未交配過的雌性，SD大鼠，220~250g造模方法（附件8）（1）進行陰道涂片檢查,在大鼠的動情期建立模型。（2）麻醉:手術在無菌條件下進行,10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(0.2ml/100g)。（3）固定、備皮:將大鼠四肢及頭部固定于手術板上,腹部剪毛備皮。（4）開腹:絡合碘溶液消毒皮膚,從尿道口上端約3cm處正中縱向切開皮膚約2~3cm，逐層分離進入腹腔,在膀膚后方找到子宮,暴露子宮,見大鼠子宮呈“V”型,在兩子宮下端匯合處用血管夾夾住，用無齒鑷將一側子宮拉直,子宮周圍墊

血栓動物模型操作步驟2022/10/14

實驗動物B6小鼠，4-6周造模方法1、動脈血栓造模：實驗組和對照組小鼠麻醉后，充分暴露小鼠頸總動脈，用浸過10%FeCl3的1X2mm濾紙覆蓋于頸總動脈上3分鐘，然后移除濾紙，激光多普勒記錄血栓形成曲線。2、下腔靜脈血栓：實驗組和對照組小鼠將腹腔內小腸等器官拖出放置于小鼠左側，暴露出下腔靜脈，動作要輕柔，避免損傷器官，拖出的器官用浸潤過生理鹽水的紗布包裹，防止長期置于空氣中造成脫水。移至體視顯微鏡下，鈍性分離血管周圍結締組織暴露下腔靜脈及其分支，在腎靜脈下方將腹主動脈和下腔靜脈剝離開，然后用7/

輸卵管炎模型技術文章2022/09/29

常用動物SD大鼠，雌性，8-10周齡造模方法金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌按1：1：2比例用無菌生理鹽水配成3×10^9／ml的混合液采用混合菌造模法，用10％水合氯醛溶液0.3ml/100g腹腔注射后，仰臥固定、剃毛、消毒、鋪布，行縱形切口，打開腹腔，找到Y形子宮，分別在子宮角附近輸卵管處注射細菌混懸液0.05ml，緩慢注射，每側注射混合菌液0.05mL，然后將輸卵管納回腹腔，用1號絲線先縫合腹壁再縫合皮膚，75％酒精消毒手術傷腸后輸卵管口，正常組不做任何處理。術后將大鼠側臥位放于

骨關節炎模型技術文章2022/09/29

骨關節炎模型骨關節炎（OA）是一種關節疾病，其特征是軟骨退化，關節內炎癥，軟骨下骨重塑和關節痛。為了模仿人類OA疾病的不同的病理情況，吉妮歐生物提供了各種模型，包括手術和化學誘導的嚙齒動物模型。此外，我們會依據不同的評估方式來定制研究方案，以以滿足客戶特定的需求。碘乙酸鈉誘導的OA模型動物關節內注射碘乙酸鈉（MIA）是一種*有效的誘發OA方法，碘乙酸鈉是甘油醛-3-磷酸脫氫酶活性的抑制劑，可誘導軟骨細胞死亡，從而產生軟骨損傷，其蛋白聚糖基質丟失和功能性關節損傷與人OA的情況相似。該模型的優點：·

大鼠子宮內膜薄型模型步驟2022/09/23

實驗動物健康，成熟未交配過的雌性，SD大鼠，220~250g造模方法（附件8）（1）進行陰道涂片檢查,在大鼠的動情期建立模型。（2）麻醉:手術在無菌條件下進行,10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(0.2ml/100g)。（3）固定、備皮:將大鼠四肢及頭部固定于手術板上,腹部剪毛備皮。（4）開腹:絡合碘溶液消毒皮膚,從尿道口上端約3cm處正中縱向切開皮膚約2~3cm，逐層分離進入腹腔,在膀膚后方找到子宮,暴露子宮,見大鼠子宮呈“V”型,在兩子宮下端匯合處用血管夾夾住，用無齒鑷將一側子宮拉直,子宮周圍墊

小鼠帕金森病（PD）模型2022/09/23

實驗動物C57/BL6，雄性8-10周齡，25-30g造模方法MPTP（1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶），腹腔注射，20mg/kg，每隔2小時1次，共4次（急性），總劑量為72mg/kg。對照組注射等量的生理鹽水。亞急性：腹腔注射MPTP30mg/kg，連續5d。慢性：C57小鼠注射MPTP，同時給予丙磺舒，每周給藥2次，連續5周。其他方法（1）腦內紋狀體黑質單側或雙側注射6-OHDA（6-羥基多巴胺）（2）魚藤酮（灌胃、靜脈注射、腦內注射、皮下注射、腹腔注射等）（3）轉基因模型（

慢性阻塞性肺疾病模型（COPD）簡介2022/09/16

常用動物大鼠建模方法煙熏4個月，中間脂多糖刺激1次模型制備：香煙熏煙聯合氣管內注射脂多糖法制作大鼠慢阻性肺疾病第一天禁食12h后，腹腔注射10%的水合三氯乙醛（0.3ml/100g）麻醉大鼠，固定大鼠于鼠臺，75%酒精消毒頸部皮膚，逐層切開皮膚、淺筋膜、深筋膜，暴露氣管，抬高大鼠頭部，用1ml注射器向氣管內注入脂多糖（200ug/200ul），握大鼠于手，捏頸部皮膚，左右搖晃，使藥物盡可能均勻分布兩肺，縫合頸部皮膚并消毒手術創口，待大鼠清醒后，置籠內正常飼養。第1天和第20天各注入脂多糖1次。第

腎纖維化模型簡介2022/09/02

動物：大鼠造模試劑：陽離子牛血清白蛋白cationicbovineserumalbumin，C-BSA造模方法：試劑準備：（1）將60mg的C-BSA用30ml的PBS充分溶解，制成2mg/ml的C-BSA溶液，再與等體積的弗氏不*佐劑充分混勻為乳白色懸液，使乳化*。（2）稱取C-BSA1625mg，與650mlPBS充分混勻，制成2.5mg/mlC-BSA溶液。（3）將C-BSA冷凍干燥后測等電點，使PI=10（4）造模前將大鼠放入代謝籠中，每籠一只，收取大鼠24h尿液，進行24h尿蛋白定量測