BY-0107 A-431人皮膚鱗癌細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0107
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/6/6 10:19:09
- 訪問次數(shù) 253
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A-431人皮膚鱗癌細(xì)胞系
A-431人皮膚鱗癌細(xì)胞系于 1973 年從一位 85 歲女性表皮樣癌患者病灶中分離建立,作為皮膚癌研究的經(jīng)典模型,其高 EGFR 表達(dá)特性為靶向治療探索提供了關(guān)鍵載體。該細(xì)胞系的建立,不僅推動了皮膚鱗癌發(fā)病機(jī)制研究,更為全球范圍內(nèi)抗 EGFR 藥物研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
在細(xì)胞生物學(xué)特性方面,A-431 細(xì)胞呈現(xiàn)多邊形上皮樣形態(tài),以緊密簇狀或片狀貼壁生長。其最tu出特征為表皮生長因子受體(EGFR)的超量表達(dá),每細(xì)胞表面受體密度高達(dá) 5×10^6 個,約為正常細(xì)胞的 200 - 300 倍。這種過表達(dá)使細(xì)胞對 EGF 的親和力顯著增強(qiáng),結(jié)合常數(shù)(Kd)達(dá) 1.5 nM,遠(yuǎn)低于正常細(xì)胞。當(dāng) EGF 與受體結(jié)合后,PI3K/Akt 和 MAPK 通路被迅速激活,促使細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)活性提升 60%,推動細(xì)胞從 G1 期向 S 期快速轉(zhuǎn)換。實驗數(shù)據(jù)顯示,在添加 10 ng/mL EGF 的培養(yǎng)基中,A-431 細(xì)胞的 DNA 合成速率提升 45%,72 小時細(xì)胞數(shù)量可達(dá)對照組的 2.3 倍。在侵襲能力方面,Transwell 實驗中,A-431 細(xì)胞穿過 Matrigel 基質(zhì)膠的數(shù)量是 HaCaT 正常角質(zhì)形成細(xì)胞的 7.8 倍;劃痕愈合實驗表明,其傷口閉合速度達(dá) 56 μm/h,展現(xiàn)出ji強(qiáng)的遷移能力。動物實驗證實,皮下接種 1×10^6 個 A-431 細(xì)胞,7 - 10 天即可形成直徑超 5 mm 的實體瘤,成瘤率穩(wěn)定在 97% 以上。
A-431 細(xì)胞的培養(yǎng)需嚴(yán)格把控條件。推薦使用含 10% 熱滅活胎牛血清(FBS)、1% 雙抗(100 U/mL 青mei素與 100 μg/mL 鏈mei素)的高糖 DMEM 培養(yǎng)基,其中 FBS 提供的胰島素樣生長因子(IGF)可協(xié)同 EGF 增強(qiáng)細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境設(shè)定為 37℃、5% CO?、95% 相對濕度,當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時,以 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 按 1:3 比例傳代,傳代周期約 3 天。復(fù)蘇后細(xì)胞 2 小時開始貼壁,24 小時貼壁率超 90%。需特別注意,過高的細(xì)胞密度(>90% 融合度)會導(dǎo)致接觸抑制,使 EGFR 表達(dá)量下降 15% - 20%,影響實驗結(jié)果。日常培養(yǎng)中,應(yīng)每日通過相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),若出現(xiàn)細(xì)胞間隙增大、折光性減弱等現(xiàn)象,需警惕支原體污染,可采用 PCR 法進(jìn)行快速檢測。
在科研與藥物開發(fā)領(lǐng)域,A-431 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在機(jī)制研究層面,最新研究發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼 RNA LINC00665 通過海綿吸附 miR-125b,解除對 EGFR 的抑制,使 A-431 細(xì)胞的遷移能力提升 38%。在藥物篩選方面,該細(xì)胞系已驗證吉非ti尼、西妥昔單抗等 20 余種 EGFR 靶向藥的有效性,其中新型雙特異性抗體 Amivantamab 在 A-431 模型中,可使細(xì)胞增殖抑制率達(dá) 82%,誘導(dǎo) 35% 的細(xì)胞發(fā)生凋亡。在新興治療技術(shù)探索中,基于 A-431 構(gòu)建的 3D 腫瘤球模型,成功驗證了納米顆粒負(fù)載的 siRNA 對 EGFR 的沉默效果,為 RNA 干擾療法的臨床轉(zhuǎn)化提供數(shù)據(jù)支持。不過,由于該細(xì)胞系存在基因漂移風(fēng)險,建議每 20 代進(jìn)行 STR 分型鑒定,并與 ATCC 標(biāo)準(zhǔn)圖譜比對,確保細(xì)胞系的遺傳穩(wěn)定性。
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