BY-0283 HBL100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0283
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- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/6/19 8:57:17
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HBL100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
HBL100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系,源自人乳腺上皮細胞,通過整合猿猴空泡病毒 40(SV40)基因實現(xiàn)永生化,是研究乳腺細胞生物學和乳腺疾病的重要工具。在顯微鏡下,HBL100 細胞呈現(xiàn)典型的上皮樣形態(tài),多為多邊形或不規(guī)則形,以貼壁方式緊密排列生長,細胞間連接緊密,常形成類似鋪路石狀的單層細胞片層結構。細胞胞質豐富,經(jīng)染色后呈嗜酸性,內部細胞器結構清晰且功能完備。線粒體呈短棒狀,均勻分布于胞質中,為細胞的生命活動提供穩(wěn)定能量;粗面內質網(wǎng)附著大量核糖體,參與蛋白質合成;高爾基體發(fā)達,呈網(wǎng)狀結構,負責蛋白質的糖基化修飾與運輸;溶酶體則承擔細胞內物質的分解代謝。細胞核大而圓,位于細胞中央,染色質分布均勻,核仁明顯,展現(xiàn)出細胞活躍的代謝和增殖能力。
SV40 基因的整合賦予了 HBL100 細胞du特的生物學特性。SV40 大 T 抗原與細胞內的抑癌蛋白 p53 和 Rb 結合,使 p53 失去對細胞周期檢查點的監(jiān)控作用,Rb 無法抑制 E2F 轉錄因子活性,從而促使細胞突破 G1/S 期限制點,持續(xù)進入增殖周期,實現(xiàn)細胞永生化。與正常乳腺上皮細胞相比,HBL100 細胞的增殖速度明顯加快,在適宜培養(yǎng)條件下,細胞倍增時間約為 24 - 36 小時。在細胞分化特性上,HBL100 細胞保留了部分乳腺上皮細胞的分化特征,能夠表達上皮細胞標志物如細胞角蛋白 18(CK18)、上皮膜抗原(EMA),但由于 SV40 基因的影響,其分化能力較原代細胞有所減弱,且細胞形態(tài)和功能的穩(wěn)定性在長期傳代過程中會發(fā)生一定改變。此外,HBL100 細胞對多種激素和生長因子具有響應性,如雌激素、表皮生長因子(EGF)等,這些物質可通過激活相應信號通路,調節(jié)細胞的生長、增殖和代謝活動。
培養(yǎng) HBL100 人整合 SV40 基因的乳腺上皮細胞系需遵循特定的操作規(guī)范。基礎培養(yǎng)基通常選用含 10% 優(yōu)質胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,胎牛血清中豐富的生長因子、激素和營養(yǎng)物質能夠滿足細胞生長和代謝需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,防止細菌污染;同時,可根據(jù)實驗需求添加胰島素、轉鐵蛋白等補充劑,維持細胞的良好狀態(tài)。將細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細胞內酸堿平衡與酶活性。當細胞匯合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實時觀察,避免過度消化損傷細胞,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,再轉移至液氮中長期保存。在培養(yǎng)過程中,需定期通過臺盼藍染色檢測細胞活力,利用免疫熒光染色檢測 CK18、EMA 等標志物的表達,確保細胞特性穩(wěn)定。
在科研應用領域,HBL100 細胞系發(fā)揮著關鍵作用。在乳腺癌研究中,科研人員利用該細胞系探究乳腺癌發(fā)生發(fā)展機制,通過對比 HBL100 細胞與乳腺癌細胞系的基因表達譜和信號通路差異,發(fā)現(xiàn) PI3K/AKT 通路在乳腺癌細胞的增殖和存活中起重要作用,為乳腺癌治療提供新靶點。在藥物研發(fā)方面,HBL100 細胞可用于評估藥物對正常乳腺上皮細胞的毒性,篩選具有潛在抗癌活性且對正常細胞毒性較低的藥物,例如新型的靶向 HER2 的小分子抑制劑,在 HBL100 細胞上進行毒性測試,確保其對正常乳腺細胞的安全性后,再進一步開展抗癌療效研究。此外,HBL100 細胞還用于研究乳腺細胞的生長發(fā)育、分化調控以及激素對乳腺細胞的影響機制,為乳腺疾病的預防和治療提供理論支持。
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