ACC-2人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系
ACC-2人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系源自人涎腺腺樣囊性癌組織,作為研究該惡性腫瘤的經(jīng)典模型,自建立以來便在涎腺腫瘤領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在顯微鏡下,ACC-2 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣形態(tài),多為多邊形或不規(guī)則形,細(xì)胞間連接緊密,常聚集成團(tuán)簇狀或條索狀結(jié)構(gòu),形似蜂巢般有序排列。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,經(jīng)染色后呈弱嗜酸性,細(xì)胞核大且深染,形態(tài)不規(guī)則,部分細(xì)胞可見明顯的核仁,這些形態(tài)學(xué)特征與患者體內(nèi)的涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞高度相似,為科研人員直觀研究細(xì)胞形態(tài)變化和腫瘤發(fā)生發(fā)展提供了理想樣本。
從生物學(xué)特性來看,ACC-2 細(xì)胞具備顯著的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力。在增殖方面,細(xì)胞周期蛋白 Cyclin D1、CDK4 等基因的異常高表達(dá),打破了細(xì)胞正常的生長周期調(diào)控,促使細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶活性增強(qiáng),驅(qū)動細(xì)胞快速且持續(xù)地分裂增殖。研究表明,在適宜培養(yǎng)條件下,ACC-2 細(xì)胞的倍增時(shí)間約為 36 - 48 小時(shí)。在侵襲轉(zhuǎn)移過程中,ACC-2 細(xì)胞展現(xiàn)出du特的 “嗜神經(jīng)性”,這也是涎腺腺樣囊性癌的重要病理特征。細(xì)胞能夠分泌多種細(xì)胞外基質(zhì)降解酶,如基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2、MMP-9,以及絲an酸蛋白酶類,高效降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分,為癌細(xì)胞突破組織屏障創(chuàng)造條件。同時(shí),細(xì)胞表面高表達(dá)神經(jīng)生長因子受體(NGFR)和層粘連蛋白受體(LN-R),通過與神經(jīng)組織周圍的細(xì)胞外基質(zhì)成分相互作用,引導(dǎo)癌細(xì)胞沿神經(jīng)束膜侵襲,向周圍神經(jīng)組織擴(kuò)散。此外,ACC-2 細(xì)胞中 PI3K/AKT、MAPK 等信號通路持續(xù)激活,不僅促進(jìn)細(xì)胞增殖和存活,還參與調(diào)控細(xì)胞遷移相關(guān)基因的表達(dá),進(jìn)一步增強(qiáng)其侵襲轉(zhuǎn)移能力。
培養(yǎng) ACC-2 細(xì)胞需嚴(yán)格遵循特定條件。常用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,胎牛血清為細(xì)胞生長提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和激素;同時(shí)添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,以防止細(xì)菌污染。培養(yǎng)環(huán)境設(shè)定為 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱,在此條件下,細(xì)胞呈貼壁生長狀態(tài)。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液進(jìn)行傳代操作,消化時(shí)需在顯微鏡下密切觀察,待細(xì)胞變圓、間隙增大,及時(shí)終止消化,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:4 。凍存時(shí),凍存液由 90% 胎牛血清和 10% 二甲基亞砜組成,采用程序降溫法,先將細(xì)胞置于 - 80℃冰箱過夜,隨后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存,以確保細(xì)胞的活性和生物學(xué)特性穩(wěn)定。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,ACC-2 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在涎腺腺樣囊性癌發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員利用基因編輯、RNA 干擾等技術(shù),深入探究關(guān)鍵基因和信號通路在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用,發(fā)現(xiàn) Notch 信號通路異常激活與癌細(xì)胞的增殖、侵襲及 “嗜神經(jīng)性” 密切相關(guān),為揭示疾病發(fā)病機(jī)制提供了新方向。在藥物研發(fā)方面,ACC-2 細(xì)胞系是篩選抗涎腺腺樣囊性癌藥物的重要模型,可用于評估不同藥物對癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響,以及藥物的毒性和副作用。例如,新型的多靶點(diǎn)酪an酸激酶抑制劑在 ACC-2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,能夠顯著抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并降低細(xì)胞的侵襲能力;針對其 “嗜神經(jīng)性” 研發(fā)的神經(jīng)生長因子受體拮抗劑,也在該細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中展現(xiàn)出良好的抑制癌細(xì)胞神經(jīng)侵襲效果,為臨床治療提供了有力的理論依據(jù)和潛在藥物靶點(diǎn)。
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