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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>細胞生物學(xué)試劑>原代細胞> 人膽囊動脈內(nèi)皮細胞

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人膽囊動脈內(nèi)皮細胞

參考價7750.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海撫生實業(yè)有限公司
  • 品牌其他品牌
  • 型號
  • 所在地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時間2025/4/9 10:53:01
  • 訪問次數(shù) 214
規(guī)格
5×10^57750.00元15 瓶可售

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上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)

先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。








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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1310 主要用途 僅供科研研究實驗
組織來源 膽囊組織 種屬來源
生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 上皮樣,多角形細胞

QQ截圖20240123162116.png

一、細胞基本屬性:

細胞名稱

人膽囊動脈內(nèi)皮細胞

商品貨號

A01X1310

組織來源

膽囊組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

種屬來源

傳代特性

細胞特性確定傳代

生長特性

貼壁培養(yǎng)

細胞形態(tài)

上皮樣,多角形細胞

 

細胞簡介

膽囊,  是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造,有濃縮和儲存膽汁之作用。 膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。動脈由內(nèi)膜、中膜和外膜構(gòu)成,  其中內(nèi)膜 主要由內(nèi)皮細胞構(gòu)成。

包被條件: 

培養(yǎng)基:原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

傳代比例:

消化液:0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件:氣相:  空氣,95%;CO2 ,5%

1.jpg

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原代細胞實驗步驟:

一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。

五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM

漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。

原代細胞使用方法:

是一種貼壁培養(yǎng)細胞,細胞形態(tài)呈上皮樣,多角形細胞,在技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人多形性惡性膠質(zhì)瘤T98G(STR鑒定正確)

兔肝臟間質(zhì)細胞(永生化)
鴨胚胎成纖維細胞(永生化)
小鼠腎小球系膜細胞(永生化)
小鼠脂肪干細胞(永生化)
豬子宮內(nèi)膜上皮細胞(永生化
小鼠胚胎成纖維細胞
小鼠結(jié)腸癌帶熒光素酶
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞
人宮頸癌細胞
人膀胱癌細胞
人骨肉瘤細胞
急性髓系細胞白血病細胞
豬扁桃體上皮細胞(永生化)
豬(萊蕪)腹部脂肪干細胞(永生化)
Halomonas hydrothermalis熱液口鹽單胞菌
Halomonas sulfidaeris硫化物礦鹽單胞菌
Algoriphagus halophilus嗜鹽噬冷菌
Algoriphagus mannitolivorans食甘醇噬冷菌
Algoriphagus ornithinivorans食酸噬冷菌
Halomonas ventosae樊氏鹽單胞菌
Pediococcus claussenii克氏片球菌
Halovibrio denitrificans反硝化鹽弧菌
Haloferax sulfurifontis硫泉富鹽菌
Haloarcula aidinensis艾丁鹽盒菌
人膽囊動脈內(nèi)皮細胞Halomonas campisalis鹽田鹽單胞菌
Halomonas desiderata期望鹽單胞菌
Pseudomonas alcaliphila嗜堿假單胞菌
Marinobacter maritimus近海海桿狀菌
Thermus thermophilus嗜熱棲熱菌

 




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