BD6034 LPO含量試劑盒 氧化系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BD6034
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/7/17 10:23:28
- 訪問次數(shù) 209
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純度 | BD6034 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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規(guī)格 | 50T/48S | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | LPO(lipid peroxidation,LPO)含量試劑盒 |
LPO(lipid peroxidation,LPO)含量試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:
脂質(zhì)過氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS 與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動(dòng)脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
LPO 在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA 與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在 535nm 有最大吸收峰。
LPO含量試劑盒 氧化系列-常備現(xiàn)貨
組成:
產(chǎn)品名稱 | BD6034-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 48ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 18ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
臨用前注意試劑二是否wan全溶解,如未溶解,可以 70℃-90℃加熱,并振蕩以促進(jìn)溶解。
自備儀器和用品:
分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
LPO 提取:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 535 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在EP 管中依次加入如下試劑
測(cè)定管 | 空白管 | |
試劑一(µl) | 900 | 900 |
樣本(µl) | 90 | |
蒸餾水(µl) | 90 | |
試劑二(µl) | 300 | 300 |
立即混勻,95℃水浴 40min 后,流水冷卻。3000g 離心 10min,吸取 1ml 上清加入 1ml 玻璃比色皿,測(cè)定
535nm 下各管吸光值,記作 A 測(cè)定和A 空白。ΔA=A 測(cè)定-A 空白。
LPO 含量計(jì)算:
用玻璃比色皿的計(jì)算公式如下
y = 1.1446x - 0.0076,R2 = 0.9997,x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度μmol/ml,y 為吸光度。
1、血清(漿)中 LPO 含量的計(jì)算:
LPO 含量(nmol/ ml)=(ΔA+0.0076)÷ 1.1446×V 標(biāo)÷V 樣×1000
=873.6×(ΔA+0.0076)
2、細(xì)菌、細(xì)胞或動(dòng)物組織中 LPO 含量計(jì)算
(1) 按照蛋白濃度計(jì)算
LPO 含量(nmol/ mg prot)=(ΔA+0.0076)÷ 1.1446×V 標(biāo)÷(Cpr×V 樣)×1000
=873.6×(ΔA+0.0076)÷Cpr
需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA 蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
(2) 按照樣品質(zhì)量計(jì)算
LPO 含量(nmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0076)÷ 1.1446×V 標(biāo)÷(W ×V 樣÷V 樣總)×1000
=873.6×(ΔA+0.0076)÷W
(3 ) 按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
LPO 含量(nmol/104)=(ΔA+0.0076)÷ 1.1446×V 標(biāo)÷(500×V 樣÷V 樣總)×1000
=1.747×(ΔA+0.0076)
V 標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)曲線中加入標(biāo)品體積,0.06ml;V 樣:加入樣本體積,0.06ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬;1000,μmol 到nmol 換算系數(shù)。