N7-甲基鳥苷（N7-methylguanosine，m7G）是真核生物tRNA、rRNA和mRNA 5'cap中豐富的修飾之一。作為一種重要的表觀遺傳修飾，m7G RNA甲基化在基因表達、加工代謝、蛋白質合成、轉錄穩定等方面發揮著重要的作用，參與疾病發生發展等多種生命過程。

對于m7G RNA甲基化修飾的檢測，易基因采用基于抗體富集的m7G-MeRIP-seq，利用m7G特異性抗體富集發生m7G甲基化修飾的RNA片段（包括mRNA、lncRNA等rRNA去除所有RNA），結合高通量測序，對RNA上的m7G修飾進行定位與定量，總RNA起始量可降低至10μg，僅需1μg總RNA。

技術優勢：

?  起始量低：樣本起始量可降低至10-20μg，僅需1μg總RNA；

?  高通量測序：全轉錄組m7G位點高通量測序，可同時檢測mRNA和lncRNA；

?  樣本要求：可用于動物、植物、細胞及組織的m7G檢測；

?  重復性高：m7G-MeRIP-seq的IP富集重復性高，降低抗體富集偏差；

?  應用范圍廣：廣泛應用于組織發育、干細胞自我更新和分化、熱休克或DNA損傷應答、癌癥的發生與發展、藥物應答等研究領域。

技術路線：

RNA樣品→文庫構建→上機測序→數據分析

送樣要求：

典型案例

哺乳動物轉錄組范圍mRNA內m7G RNA甲基化圖譜

Transcriptome-wide Mapping of Internal N7-methylguanosine Methylome in Mammalian Messenger RNA

背景

m7G RNA甲基化在真核mRNA中的存在和分布有待研究。

方法

本研究開發了基于抗體富集m7G RNA甲基化修飾測序方法：基于抗體富集的m7G-MeRIP-seq。

結果

本研究作者使用m7G-MeRIP-seq對RNA內m7G甲基化進行轉錄組范圍的高通量測序分析，揭示了人和小鼠細胞內m7G甲基化水平（mRNA分布、富集的共有motif等）。另外，作者將METTL1基因鑒定為在mRNA內催化m7G修飾的一種甲基轉移酶，表明RNA內m7G甲基化可影響mRNA翻譯。

Zhang LS, et al. Transcriptome-wide Mapping of Internal N7-Methylguanosine Methylome in Mammalian mRNA. Mol Cell. 2019 Jun 20;74(6):1304-1316.e8.

圖：m7G-MeRIP-seq繪制的人和小鼠細胞系內m7G位點的轉錄組范圍分布圖

參考文獻：

①    Zhang LS, et al. Transcriptome-wide Mapping of Internal N7-Methylguanosine Methylome in Mammalian mRNA. Mol Cell. 2019 Jun 20;74(6):1304-1316.e8.