3． 加樣反應(yīng)    每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔（分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100ul）。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。

4． 加酶反應(yīng)    除空白對(duì)照孔外，每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液） 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

5. 顯色反應(yīng)    加底物液（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴，終止反應(yīng)（加終止液后，藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。

●結(jié)果判斷

       以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長(zhǎng)）讀取吸光度（A值）。當(dāng)待檢樣本孔A值大于等于陰性對(duì)照A值的2.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對(duì)照A值低于0.07時(shí)，按0.07計(jì)算。

●注意事項(xiàng)

1.試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清或血漿。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

6. 37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無(wú)條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。