Petrifilm Coliform^TM Coliform測試片含有VRB培養劑 （Violet Red Bile），一種冷水可溶性的凝膠劑和四唑翁（tetrazollium）指示劑，可增強菌落計數效果。絕大多數E .coli（約占97%）能產生-葡萄糖甘酸酶與培養基中的指示劑反應，產生藍色沉淀環繞在大腸桿菌菌落周圍，表面覆蓋的膠膜，可留住發酵乳糖的大腸菌群產生的氣體，約有95%的大腸桿菌產生，形成藍色或深藍上菌落并有氣泡相連接，氣泡大小約為1個菌落直徑。

AOAC和FDA細菌學分析手冊（RAM）規定大腸菌群為革蘭氏陰性桿菌，發酵乳糖產酸產氣。大腸菌群菌落在Petrifilm EC測試片上生長產酸，PH指示劑使培養基顏色變深，在紅色菌落周圍有氣泡者，為大腸菌群細菌。大腸桿菌鑒定，在不同國家可以有變更（見培養時間和溫度部分指示）。