河豚毒素檢測試劑盒說明書

     本測試盒用直接競爭免疫分析法定量測定河豚魚中的河豚毒素（TTX）。該測試盒反應孔可拆卸，可測單份樣品，也可測多份樣品。定量分析時需有含450nm波長的微孔板酶標儀。
1.概要
     河豚魚是近海底棲居的肉食性有毒海產魚類，其內臟有劇毒。其毒性物質主要是河豚毒素，河豚毒素是一種劇烈的神經毒素，其性質穩定，加熱、鹽腌及高溫烹煮均不能使其破壞，其毒性比氰化鈉大1000倍。因誤食或食用加工不當的河豚魚而發生人畜中毒的事件每年都有發生。故準確檢測河豚魚中的河豚毒素對預防和控制河豚毒素中毒，具有重要意義。本檢測方法具有靈敏、快速、簡便、特異性好、取樣量小、不破壞魚體結構，并可同時檢測大量樣品等優點。

 2 測定原理

     本測試盒利用固相酶聯免疫吸附原理，采用直接競爭ELISA法進行測定。用抗原包被微孔板，加入河豚毒素標準品或樣品、抗河豚毒素酶標單克隆抗體進行免疫反應后，加入底物顯色，終止液終止后，用酶標儀在450nm處測定OD值。

3 提供的物品

微孔板

5個濃度的TTX標準溶液（各1mL）

標準1：0ng/mL    ……………………………………………………………直接使用

標準2：5.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用

標準3：20.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標準4：50.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標準5：200.0ng/mL     ………………………………………………………直接使用

抗TTX抗體溶液（6mL）       ………………………………………………………直接使用

顯色液（12mL）       …………………………………………………………………直接使用

終止液（6mL）  ………………………………………………………………………直接使用

濃縮洗液（30mL）   …………………………………………………………………稀釋使用

4 盒中未提供，需自備物品

微孔板酶標儀（含450nm）、振蕩器、粉碎機、微量移液器

量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙

乙酸、甲醇（分析純）、去離子水或蒸餾水

5 操作者注意事項

標準溶液中含有TTX毒素，應特別小心。

終止液為1N硫酸，避免接觸皮膚。

每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。

每步加樣時間應控制在5min內。

孵育過程中應避光。

不要使用過期試劑盒。

不要交叉使用不同批號的試劑盒中的試劑。

6 儲存條件

       保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍

       顯色液對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

       將不用的微孔板放進原鋁箔袋中，置2~8℃保存。

 7 試劑變質的標志

      標準1的吸光度值小于0.5個單位（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。