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  • 漲知識(shí) | 克隆專題六:分子克隆篩選與鑒定技術(shù)

    克隆技術(shù),又稱為“生物放大技術(shù)”,目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”,即通過(guò)重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來(lái),在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生新的遺傳性狀的技術(shù)。大部分的分子克隆方法,諸如傳統(tǒng)分子克隆、TA克隆、Gatway克隆、TOPO克隆、無(wú)縫克隆等都繞不開(kāi)目的片段制備、載體制備、連接、轉(zhuǎn)化、篩選等等步驟。經(jīng)過(guò)前幾章專題的講解分子克隆中的關(guān)鍵步驟,接下來(lái)講解分子克隆流程中的最后一步——篩選與鑒定,小翌會(huì)具體解析一下篩選與鑒定陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子的過(guò)程,為您的實(shí)驗(yàn)提供好方法
  • 解決方案 | 病原NGS檢測(cè)超快速解決方案來(lái)襲

    近年來(lái),感染性疾病檢測(cè)一直是大家頗為關(guān)注的領(lǐng)域,已形成群雄逐鹿的市場(chǎng)格局。mNGS方興未艾,tNGS持續(xù)火爆,共建庫(kù)需求也日益激增。雖然mNGS、tNGS和共建庫(kù)等從技術(shù)到產(chǎn)品不斷推陳出新,但時(shí)效性、檢出率和低背景菌殘留一直是大家的追求。翌圣生物經(jīng)過(guò)匠心研發(fā),開(kāi)發(fā)出一系列超快速、高效率和低殘留產(chǎn)品解決方案,助力病原微生物快速、精準(zhǔn)診斷。方案一宏基因組快速DNA酶切建庫(kù)產(chǎn)品,實(shí)現(xiàn)病原DNA檢測(cè)更快捷HieffNGS®OnePotFlashDNALibraryPrepKit(Cat#12316)低起
  • 精品推薦 | 合成DNA片段,何不選用快且準(zhǔn)確的方式?

    給各位小伙伴們推薦精品之前,小翌先給大家出一道最近小翌碰到的問(wèn)題╰(*°▽°*)╯問(wèn):已知TaqDNA酶的最適變性和退火時(shí)間為30秒,最適延伸速度是60秒/kb,推薦循環(huán)數(shù)為35個(gè)循環(huán),在克隆實(shí)驗(yàn)中小翌合成5kb長(zhǎng)的DNA片段理論上需要多久呢?A.理論上大概要3個(gè)小時(shí)左右B.理論上大概要4個(gè)小時(shí)左右C.理論上大概要5個(gè)小時(shí)左右D.理論上3分鐘,安排師弟做(???)答案B:預(yù)變性5min+(變性30s+退火30s+延伸5min)×35+終延伸10min=225min實(shí)際上小翌用這類TaqDNA酶合
  • 上新 | 1至7片段通用克隆,連接總體系可低至6 μL(內(nèi)含福利)

    還在為多片段或超長(zhǎng)片段的同源重組效率低,菌落數(shù)少而煩惱嗎?還在為載體或片段較為珍貴、產(chǎn)量低,為了節(jié)省原料,使用小體系低濃度連接,但連接效率低下而煩惱嗎?小翌經(jīng)過(guò)多年潛心研究,重磅推出的新品通用型一步法快速克隆試劑盒(Cat#10923ES),解決您的煩惱!該試劑盒屬于HieffClone®系列,在文章累計(jì)IF達(dá)到1000+的一步法快速克隆試劑盒(10911ES、10922SE)的基礎(chǔ)上,顯著提升6個(gè)以上片段、低濃度、小體系和超長(zhǎng)片段的連接效率,陽(yáng)性克隆可達(dá)95%以上。該系列產(chǎn)品無(wú)需考慮酶切位點(diǎn),
  • 新品|T5核酸外切酶攜手無(wú)縫克隆,確保100%陽(yáng)性克隆率,讓實(shí)驗(yàn)更簡(jiǎn)單高效!

    T5Exonuclease是一種沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶。它既能從DNA5'末端起始消化,也可以從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)處起始消化,但不會(huì)降解超螺旋雙鏈DNA。可應(yīng)用于無(wú)縫克隆(同源重組克隆)、降解堿裂解提取質(zhì)粒中的變性DNA等。圖1.T5Exonuclease原理圖無(wú)縫克隆無(wú)縫克隆是目前常用于生物學(xué)研究的分子克隆技術(shù),它基于DNA同源序列的互補(bǔ)配對(duì),通過(guò)酶類的介入,將這些互補(bǔ)配對(duì)的DNA片段連接起來(lái),從而形成完整的雙鏈DNA。其組裝主要利用了T5E
  • 熱烈祝賀!英百瑞通用現(xiàn)貨型NK細(xì)胞療法IND申請(qǐng)獲CDE受理

    翌圣生物重要戰(zhàn)略合作伙伴——英百瑞(杭州)生物醫(yī)藥有限公司于今年9月收到國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心(CDE)發(fā)布的IBR733細(xì)胞注射液臨床試驗(yàn)(IND)申請(qǐng)的受理(受理號(hào):CXSL2300643)。IBR733細(xì)胞注射液是同源異體外周血來(lái)源的通用現(xiàn)貨型CAR-raNK細(xì)胞產(chǎn)品,主要用于治療復(fù)發(fā)/難治急性髓系白血病。翌圣生物在此項(xiàng)目中提供了全面的支原體NAT快速檢測(cè)相關(guān)的技術(shù)服務(wù)與驗(yàn)證支持,其中MycAway™支原體qPCR檢測(cè)試劑盒已根據(jù)EP2.6.7和JPG3對(duì)其專屬性、檢測(cè)限和耐用性進(jìn)
  • 誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞 (iPSC)分化小工具—細(xì)胞因子

    01什么是iPSC細(xì)胞?誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(inducedpluripotentstemcells,iPSC)是將一系列誘導(dǎo)因子導(dǎo)入到成熟體細(xì)胞中,并重編程為具有類似胚胎干細(xì)胞特征的一種多能干細(xì)胞,其可以分化成人體多種功能細(xì)胞,且可以在體外培養(yǎng),如心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、胰島細(xì)胞等,在臨床治療、藥物研發(fā)、醫(yī)療美容等多個(gè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。02iPSC在研情況近年來(lái),iPSC領(lǐng)域的關(guān)注度持續(xù)上漲,且隨著細(xì)胞治療藥物的上市,市場(chǎng)發(fā)展?jié)摿薮蟆H蛞延卸嗉夜緭碛衖PSC產(chǎn)品管線,但多數(shù)產(chǎn)品均處于臨床前
  • 漲知識(shí) | 克隆專題五:分子克隆轉(zhuǎn)化方法

    克隆技術(shù),又稱為“生物放大技術(shù)”,目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”,即通過(guò)重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來(lái),在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生新的遺傳性狀的技術(shù)。大部分的分子克隆方法,諸如傳統(tǒng)分子克隆、TA克隆、Gatway克隆、TOPO克隆、無(wú)縫克隆等都繞不開(kāi)目的片段制備、載體制備、連接、轉(zhuǎn)化、篩選等等步驟。其中,轉(zhuǎn)化是分子克隆的關(guān)鍵步驟,其目的是產(chǎn)生重組DNA質(zhì)粒的多個(gè)拷貝。接下來(lái)小翌就具體解析一下重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞的過(guò)程,為您的實(shí)驗(yàn)提供好方法。轉(zhuǎn)化是細(xì)菌細(xì)
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