諾博萊德 檢測用病毒核酸DNA/RNA快速提取試劑盒

DNA/RNA Kit for Virus Detection檢測用病毒he酸（DNA/RNA）提取試劑盒 

目錄號：91517

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙醇

保存條件

Poly Carrier 置于-20℃保存，其他組分置于室溫（15 ~ 25℃）保存。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介

本試劑盒適用于動物組織、血漿、血清、淋巴液、培養(yǎng)上清、分泌物、拭子、糞便、牛奶、尿液等樣品中病毒核酸的提取，可同時提取樣本中的DNA 和 RNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特you新型材料，配合本公司獨te的裂解液配方可以可最大限度的回收高純度病毒核酸。提取的病毒 RNA/DNA 純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，可直接適用于 PCR、RT-qPCR分析。

產(chǎn)品特點

1. 節(jié)省時間，簡捷，單個樣品操作一般可在 20 min 內(nèi)完成;

2. 應(yīng)用廣泛：可提取多種不同的液體樣本。

注意事項

1. Poly Carrier：

如果起始處理量很少，我們推薦使用 Poly Carrier，如果預(yù)期有較大量

核酸產(chǎn)量，用戶可以根據(jù)需要選擇是否加入 Poly Carrier。

2. Poly Carrier 的使用方法：在每個樣品提取所需裂解液 VLB 中加入 4 μl Poly Carrier，將裂解液 VLB 與 Poly Carrier 溶液充分顛倒混勻即可(裂解液 VLB 容易起泡沫，請勿使用渦旋振蕩混勻)。也可根據(jù)樣品數(shù)量，在總共需要的裂解液 VLB 中加入總共需要的 Poly Carrier 混勻備用。混合液在室溫 24 小時內(nèi)穩(wěn)定。

操作步驟

提示：

第一次使用前，請先在漂洗液 RW 瓶中加入無水乙醇，請參照瓶上的標(biāo)簽。

操作前，請將樣品平衡至室溫。

所有離心步驟均需要在室溫下進行。

1. 無細胞體液（例如：血漿/血清/淋巴液/無細胞體液/細胞培養(yǎng)上清液/

尿液）：

a. 200μl 血清等體液（需回復(fù)到室溫，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS補足）轉(zhuǎn)入 1.5ml 離心管，加入 400μl 裂解液 VLB， 立刻渦旋振蕩 15 sec 充分混勻。

b. 室溫(15-25℃)放置 10 min。

c. 加入 450μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩 15 sec 充分混勻。

注意：如果周圍環(huán)境高 30℃，乙醇需要再在冰上預(yù)冷后再加入。

d. 立刻接操作步驟的步驟 5。

2. 糞便樣品：

a. 取 500μl 0.5-1 ml 糞便樣本懸浮于 5 ml 生理鹽水中，徹di渦旋振蕩混勻后，4,000×g (6,000 rpm)離心20min后取上清200μl 轉(zhuǎn)入 1.5ml離心管，加入400μl 裂解液VLB， 立刻渦旋振蕩15sec 充分混勻。

b. 室溫(15-25℃)放置 10 min。

c. 加入 450μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩 15 sec 充分混勻。

d. 立刻接操作步驟的步驟 5。

3. bi拭子/yan拭子：

a. 理鹽水或病毒運輸液徹di顛倒或渦旋振蕩混勻后取 200 μl 轉(zhuǎn)入1.5 ml 離心管，加入 400 μl 裂解液 VLB， 立刻渦旋振蕩 15 sec充分混勻。

b. 室溫 (15-25℃) 放置 10 min。

c. 加入 450 μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩 15 sec 充分混勻。

d. 立刻接操作步驟的步驟 5。

4. 組織樣本（氣管、肺、喉頭、脾臟、扁桃體、法氏囊、腎臟和淋巴結(jié)

等）:

a. 變明顯的組織塊剪取樣品約 20 mg（備注：A.可選擇多部位剪碎混勻后再取。B.一粒大米重約 20 mg。C.請勿使用過量組織，影響提取效果），依次加入 150 μl 裂解液 VLB、450 μl 實驗室純水或者去離子水（不用滅菌）和 20μl 蛋白酶 K，用眼科剪反復(fù)多次剪

碎混勻或用電動勻漿器勻漿，置 56℃水浴中消化 15-30 min（視消化情況）后瞬時離心取上清。

b. 將上述處理后樣本離心取上清 100 μl 轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管，加入300 μl 裂解液 VLB，立刻渦旋振蕩充分混勻。

c. 加入 250 μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩 15 sec 充分混勻。

d. 立刻接操作步驟的步驟 5。

5. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中，12,000 rpm 離心 1 min，倒棄濾液。吸重復(fù)此過程，直到溶液全部上柱。

6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

7. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 漂洗液 RW，12,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入無水乙醇，用后立即蓋緊瓶蓋，以防乙醇揮發(fā)）

8. 可選步驟：重復(fù)步驟 6 一次。

9. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 離心 2min，甩干膜上殘留

的乙醇。

10. 將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 塑料離心管中，加入 30 ~ 50 ul 的RNase-Free ddH2O 洗脫，室溫放置 1 min。12,000 rpm 離心 1 min，管底即 RNA 溶液。

（注意：如要提高 RNA 濃度，可將得到的溶液重新加到吸附柱中，室溫放置 1 min，

再次離心收集）

11. 病毒 DNA 可以存放在 2-8℃，如果要長時間存放，可以放置在-20℃。病毒 RNA 建議最好立刻使用，否則立刻短期放置在-70℃?zhèn)溆谩?/span>

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71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

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