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MTT和CCK8區別2020/12/24

MTT增殖曲線，基本上就是基礎的功能實驗了，養過細胞的你應該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養基的時候，容易把甲囋也吸走，導致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的，這篇

血清的保存2020/12/24

血清的保存應該注意以下幾點：（1）生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預留體積空間，否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作

行為學-水迷宮2020/09/18

1.將水迷宮加入適當的水，水溫控制在25±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環境。3.設置軟件。4.一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗（所有小鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內登上平臺區域，則錄像結束。若動物在60s內未登上平臺區域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓練4次，訓練天數為4天。5.每只動物實驗結束后需用干毛巾擦拭，必要時需要使用電吹風吹干。6.二階段（空間探索）：待一象限到第四象限全部做完后，將水迷宮中的平臺撤走，將

行為學-曠場實驗2020/09/18

一、曠場實驗介紹曠場實驗是利用動物對新開闊環境的恐懼而主要在周邊區域活動，在區域活動較少，但動物的探究特性又促使其產生在區域活動的動機，也可觀察由此而產生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實驗原理該實驗（openfieldtest)又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環境之中某些行為的發生頻率和持續時間等，反應實驗動物在陌生環境中的自主行為與探究行為，以尿便次

慢性支氣管炎動物模型2020/08/26

基本原理慢性支氣管炎(chronicbronchitis)是指由感染或非感染因素引起的氣管、支氣管黏膜及其周圍組織的慢性非特異性炎性反應。慢性支氣管炎的病理特點是支氣管腺體增生、黏液分泌增多。臨床常以咳嗽、咳痰或伴有喘息反復發作，每次持續3個月以上，連續2年以上的慢性過程為特點，嚴重時可并發阻塞性肺氣腫，甚至肺源性心臟病。慢性支氣管炎以老年人居多，病程初期一般癥狀比較輕微，發病季節以冬季較為多見，至春季天氣轉暖后癥狀緩解;晚期-般表現為炎性反應較前加重，且癥狀不分季節、常年存在。目前，慢性支氣管

心肌梗死動物模型2020/08/26

造模機制通過結扎引起模型動物的冠狀動脈狹窄或閉塞，使該冠脈所供應的心肌缺血、壞死，從而引起模型動物心肌梗死。造模方法簡要的來說，-般冠狀動脈結扎術主要分為三步:首先，動物在麻醉后，在第四肋間行左胸開胸術;然后小心地將心包膜打開，在左心耳尖遠端結扎左冠狀動脈前降支(leftanteriordescending,LAD),如果結扎成功的話。心電圖(electrocardiogram,ECG測顯示典型的ST段抬高，而觀察左心室前壁也會變白;后關閉胸腔。如需制作心肌缺血再灌注損傷模型，可在結扎LAD后3

糖尿病模型2020/08/20

一、服務簡介動物:大小鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:Streptozocin鏈脲佐菌素誘發糖尿病動物模型1，I型糖尿病模型造模前普通飼料喂養;II型糖尿病模型造模前高脂高糖飼料(含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇)喂養1-2個月，誘發出胰島素抵抗2，STZ注射前禁食12小時以上，尾靜脈或者腹腔注射STZ溶液3，I型糖尿病模型STZ注射2次，--8-次，即成;II型糖尿病模型STZ注射--次后，高脂高糖詞料喂養12周二、技術流程1、制作動物模型2、根據客戶要求觀察記錄，給藥治療3、取材做后續

AD模型2020/08/20

一、服務簡介動物:大鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:1,經腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發后固定于腦立體定位以上，手術區皮膚消毒，切開皮膚，暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國內多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜)，在前后囟2mm、中線外1mm處，用牙科鉆鑿開顱骨，切開硬腦殼膜,用雙刃刀置于上述部位的腦表面，降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm，外移1.5mm,后上下抽動刀20次，以*切斷穹隆海馬傘。可行單側，也可行雙側穹隆海馬傘切除。術后連續應用頭孢唑啉鈉(50mg/kg體重，ip)或

誘發性高血壓動物模型2020/08/12

[造模機制]腎動脈狹窄或阻塞，腎臟血液灌注的減少,刺激腎素、血管緊張索合成和分泌增多，激活腎素-血管緊張素.醛固酮系統(renin-angiotensin-aldosteronesystem,RAAS),引起血管收縮,增加外周阻力而升高血壓。另外,醛固酮增高或者腎臟功能的降低.引起水鈉潴留,血容量增加，使血壓升高。同時引起的氧化應激、血流動力學改變以及炎癥反應,均可使多器官受到損害。主動脈縮窄法和腎裹法均引起交感神經興奮和內皮素釋放，包裹法還引起腎周炎癥，和肥胖引起的高血壓有類似機制。[造模方法

誘發性高脂血癥動物模型2020/08/12

[造模機制]長期喂飼高脂飲食，增加膽固醇和甘油三酯的攝入量，增加血漿富含膽固醇和富含甘油三酯脂蛋白，是高脂血癥模型的造模機制。還有一些特殊的高脂血癥模型，如:靜脈注射TritonWR-1339可以抑制IPL活性，形成-過性高甘油三酯血癥;橄欖油灌胃或脂肪乳靜脈注射,也能形成一過性高甘油三酯血癥。誘導糖尿病后，一般也伴有高甘油三酯血癥。[造模方法]1.高脂飲食喂飼法高脂飲食的組成和制作工藝，及喂飼方法在制備高脂血癥模型時起到了關鍵作用。目前主要有兩種飼料:合成飼料和混合飼料。因為天然物質混合飼料無

小鼠肝纖維化模型2020/08/07

乙醇與肝纖維化發生關系密切。乙醇自從胃腸道被吸收后，經機體酶系氧化生成乙I醛，并可繼續被氧化成乙酸鹽。乙醇轉變成乙醛及乙醛轉變成乙酸鹽或乙酰輔酶iA(NAD)的過程中還可產生還原性煙酰胺腺嘌呤二核甘酸(NADH)，而NAD/NADH1比例下降使肝內三羥酸循環受抑、糖異生作用減弱以及脂防酸合成增加，當其增多超過1肝臟的處理能力就形成脂肪肝，終形成肝纖維化，根據人類酒精性肝病的病因和發病!機制，采用在飼喂固體飼料的同時給大鼠胃內連續24周灌入乙醇的方法，復制了可在不.同時期觀察動物一般行為活動、血清

腦缺血模型2020/08/07

造模機制人的腦血管阻塞以大腦中動脈比較常見，在阻斷大鼠大腦中動脈后，可引起大腦半球皮層和基底核缺血性損傷，以海馬CA1研究。和人的病理改變相似。實驗方法1.大鼠大腦中動脈栓塞不同品種大鼠在阻斷大腦中動脈(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)后腦梗死面積(體積的大小和恒定性不同，Sprague-Dawley大鼠比較常見。MCAO引起的腦梗死范圍與年齡無關，-般用250~350g體重的大鼠，雌雄均可，但以雄性為宜。目前比較標準方法是:以12%水合三氯氣vy醛麻醉(3

NIH裸小鼠感染模型2019/09/27

NIH裸小鼠感染模型(1)復制方法取4周齡NIH裸小鼠，腹腔接種100TCID10的-4次方/0.5ml病毒0.2ml，毒株為EHFVLN-84L。病毒檢查：肺上皮細胞、毛細血管內皮細胞、大腦皮質神經細胞、腎小管上皮細胞、心肌細胞和部分肝細胞胞漿內均檢測到病毒抗原。病毒分布以肺、大腦、腎為主，心和肝臟次之，且病毒抗原主要分布于相應組織細胞胞漿內。電鏡檢查：腦、肺、腎等組織中發現大量的布尼亞樣病毒顆粒和病毒包涵體。(2)模型特點模型動物的腦、心、肝、脾、肺、腎均有特異抗原，腦內抗原熒光亮。從該模型

腦缺血嚙齒類動物模型的制備方法2019/09/27

腦缺血嚙齒類動物模型的制備方法一、嚙齒類動物全腦缺血模型研究表明，人類約50％心跳驟停的幸存者會的運動或認知功能障礙。嚙齒類動物急性全腦缺血模型可以模擬心跳驟停造成的選擇性腦損害。目前多采用沙鼠制備這種模型，沙鼠缺少完整的Willis動脈環，結扎或者夾閉雙側頸內動脈即可制作急性全腦缺血模型，移除動脈夾可以實現再灌注。沙鼠全腦缺血模型制作方法簡單，造模后沙鼠的海馬區神經元改變與人類心跳驟停后海馬CA1區神經元的改變具有相似性，24h后的病理生理過程也非常近似，現廣泛用于神經元遲發性死亡研究和神經保

乳小鼠HV感染模型2019/09/06

乳小鼠HV感染模型(I)復制方法出生后48～72h的昆明種乳鼠，經其腦內接種0.02ml已經過乳鼠傳代適應的漢坦病毒76/118株(LD5010的-6.5次方/0.02ml)。接種后乳鼠腦組織有典型的病毒性腦炎變化。光鏡下病理組織學觀察顯示，腦組織內呈彌散性小靜脈、毛細血管擴張充血，小血管間隙增寬，神經膠質細胞小灶狀增生，部分神經細胞變性；肺組織內可見散在出血灶、肺泡間隔小血管充血、擴張；腎組織內腎小管上皮細胞水樣變性，腎小管腔內可見管型。腦組織病變早出現于病毒感染后的第2日，表現為皮層下廣泛性

帕金森病嚙齒類動物模型的制備方法2019/09/06

帕金森病嚙齒類動物模型的制備方法一、通過耗竭單胺類神經遞質制作PD模型(一)利血平模型利血平是一種生物堿。通過不可逆地封閉囊內單胺運輸消耗中樞和外周單胺，從而影響細胞內囊泡的單胺再循環，于20世紀50年代被用于制作大鼠PD模型。當嚙齒類動物注射利血平后，囊內攝取的DA、5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NA)被封閉，在胞質內被降解，快速降低單胺水平，導致肌肉僵硬等PD的癥狀。制備方法：應用雄性Wistar大鼠，腹腔內注射一定劑量的利血平后即可使其出現骨骼肌僵硬、震顫、姿勢異常。該模型制作方法

高致病性禽流感（H5N1）病毒感染模型2019/08/30

禽流感(avianinfluenza，AI)是由A型流感病毒(avianinfluenzaviruses,AIV)引起的一種禽類的急性、高度接觸性、烈性傳染病，可引起禽類的感染或疾病綜合征。該病毒屬正黏病毒科、流感病毒屬，其含有神經氨酸酶和血凝素，可凝集某些動物的紅細胞，對消化道、呼吸道系統具有致病性。雞、火雞、鴨和鵪鶉等家禽及野鳥、水禽、海鳥等均可感染，而家養的雞和火雞引起的危害為嚴重，國外報道，已發現帶毒鳥類達88種。根據其對易感雞致病性強弱，可將禽流感病毒分為高致病性AIV(如H5N1等)

阿爾茨海默病嚙齒類動物模型的制備方法2019/08/30

一、衰老動物模型AD多發于老年人。衰老是AD肯定的危險因素。隨著世界人口的老齡化，AD的患病率顯著上升，已成為成人的第4位死因，于是出現了以衰老作為AD發病基礎的動物模型。(一)自然衰老認知障礙動物模型通過動物本身的自然衰老來獲得的AD動物模型，包括老齡大鼠、小鼠及猴等。這類模型的認知障礙等神經系統改變是自然發生的，更貼近AD的真實病理生理改變。Cummings等報道老齡犬腦中有Aβ沉淀斑塊，同時有相應的選擇性的行為能力損害；Higgins等報道老齡鼠可出現Aβ沉積于前腦基底區，并有記憶缺損。但

漢坦病毒感染動物模型2019/08/30

漢坦病毒(HantaVirus,HV)，亦稱流行性出血熱病毒，分類學上屬于布尼亞病毒科，是有包膜分節段的負鏈RNA病毒。此屬病毒能引起人類兩種死亡率很高的疾病，即腎綜合征出血熱(HFRS)和漢坦病毒肺綜合征(HPS)。在亞洲流行的主要有HTNV株引起的重型HFRS及由SEOV株引起的輕型HFRS，分別由黑線姬鼠和褐家鼠攜帶傳播。自從國外研究者通過傳代適應建立個感染性實驗動物模型以來，國內外學者已分別建立了大鼠、長爪沙鼠、兔、金黃地鼠、乳小鼠和裸小鼠等HV感染動物模型

低溫冷凍腦損傷模型2019/08/16

低溫冷凍腦損傷模型低溫冷凍腦損傷模型是一種類似于人腦挫傷的動物模型，主要為血管源性腦水腫，是常用的顱腦損傷實驗模型。該模型具體制作方法：手術前大鼠禁食l晚，不禁水。動物稱重后，麻醉成功后，動物頭部固定于江灣Ⅰ型C立體定向儀上，頭部備皮，安爾碘消毒后，于中線切開頭皮，剝離骨膜，在冠狀縫后、人字縫前、矢狀縫右側顯微手術電鉆顱骨鉆孔。骨窗直徑為5mm，用于致傷和行顱內壓監測。將自制冷凍杯置入液氮中1min預冷，盛入液氮后迅速從液氮罐中取出，立即蓋上杯蓋，用冷凍杯底部與硬腦膜充分接觸15s，冷凍處硬腦膜