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ELISA免疫測定，實驗技巧??！2017/09/12

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。ELISA免疫測定目的是？1.測定體液中的各種蛋白質，包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等；2.測定激素，包括小分子量的甾體激素等；3.測定抗生素和藥物；4.測定病原體抗原，HBsAg、H

1型糖尿病——也許受腸道細菌影響2017/09/07

一項新動物實驗的研究發現，出生后不久就接受抗生素，或者在無菌的環境中長大，小鼠會發展出嚴重的胰腺炎，這是1型糖尿病的前兆。科學家早已知道，HLA/MHC基因的某些常見變異，能防范各種自身免疫性疾病，特別是1型糖尿病。他們研究出一批小鼠進行動物實驗，擁有人類白細胞抗原(HLA)基因和主要組織相容性復合物(MHC)，由微小的表面蛋白質的細胞作為一些主力抑制免疫系統。然而，這些基因和微小的細胞蛋白質是如何調節immune-modulating影響收益率？仍籠罩在神秘之中?，F在，哈佛大學醫學院的科學家們

產后抑郁——也許和妊娠糖尿病有關2017/09/06

來自IcahnSchoolofMedicineatMountSinai和KarolinskaInstitutet的研究人員發現，妊娠糖尿病導致了初次母親產后抑郁（PPD）的風險。這是迄今為止大的同類研究，其中包括70多萬名婦女。結果在“journalDepressionａndAnxiety”雜志上。研究人員還確定，抑郁癥史女性比沒有診斷過抑郁癥的母親更有可能體驗PPD，數值達20倍以上。妊娠糖尿病單獨增加PPD的風險，孕婦抑郁癥與妊娠糖尿病的病史進一步增加了PPD的可能性。“大多數從業者認為這是

建立胃癌動物模型2017/08/31

1．甲基膽蒽誘發小鼠胃癌動物模型（1）取20g左右的小鼠，無菌手術下，在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽（MC）線結。（2）含MC的線結是用普通細線，在一端打結后，將線結置于盛有MC小玻璃試管內，在酒精燈上微微加溫，使MC液化滲入線結。MC濃度為0.05～0.1g20-甲基膽蒽內浸入10～20根線。（3）手術埋線后4～8個月可誘發成功胃癌。2．不對稱亞硝胺誘發小鼠胃癌動物模型劑量為0.25ml/kg體重，3個月后全部動物發生前胃乳頭狀癌，7～8個月后有85～發生前胃癌。昆明種敏感。A系次之，615系小鼠

建立食管癌動物模型2017/08/30

1．(CH3)2NNO（MBNA）誘發大鼠食管癌動物模型（1）取體重100g以上的Wistar大鼠；（2）任其食用含(CH3)2NNO的飲水，并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達0.75～1.5mg/kg體重；（3）80～100天可誘發成食管癌。2．二烴黃樟素（Dihydrosafrole）誘發大鼠食管癌動物模型（1）二烴黃樟素是一種制備啤酒的調味品，在大鼠飼料中加入百萬分之二千五百至一萬（2500～10000ppm）黃樟素，就能引起20～75%的食管癌。3．(CH3)2NNO誘發大鼠食管癌動物

幾種核酸提取方法2017/08/24

(1)濃鹽法利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95％乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.以稀鹽酸溶液提取DNA時,加入適量去污劑,如SD

2017年度國自然基金結果公布了！2017/08/23

?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間，自然科學基金委員會（以下簡稱自然科學基金委）共接收項目申請190840項，經初步審查和復審后共受理187135項。依據《自然科學基金條例》和自然科學基金相關管理辦法，經專家評審和委務會議審批，決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點（地區）合作研究項目107項、青年科學基金項目17523項、青年科學基金項目399項、創新研究群體項目38項、海外及港澳學者合作研究基金項目142項、地區科學基金項目3017項、部分聯合基

免疫沉淀實驗2017/08/17

一、服務介紹免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性，將抗原（我們感興趣的靶蛋白）-抗體復合物從樣品中分離出來，達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后，樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化，定性檢測蛋白的目的，即在蛋白質提取液中加入與抗原（靶蛋白質）特異性結合的抗體，抗體與抗原結合后形成免疫復合物，再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯的瓊脂糖珠子孵育，通過離心得到免疫復合物再經過純化，洗脫后

PAS染色法實驗2017/08/16

一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。隨著醫學實驗技術的發展，糖原染色應用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖

高質量RNA提取條件之一2017/08/09

1.迅速滅活內源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活：1）用含離液（如胍鹽）的細胞裂解液收獲樣品，并立即勻漿。2）用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是：組織塊足夠小，在浸入液氮的瞬間就能凍結，以瞬間令RNA酶失活。3）立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑，能立即穩定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠薄（），這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速滲入組織塊中。2.低

血清的保存方式2017/08/07

血清的保存應該注意以下幾點：（1）生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預留體積空間，否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作

結締組織類細胞培養2017/07/31

一、成纖維細胞培養用人或動物胚體為好；動物可用小鼠或雞胚，去頭和內臟，剪成小碎塊后，用胰蛋白酶消化法培養；如為人胚，可取皮膚培養。幼兒包皮是培養成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養1．實驗前三天，向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml（勿注入腸內）。2．引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70％酒精中3～5秒。3．置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。4．再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側用手指揉壓

動物交際實驗2017/07/26

一、動物交際實驗原理：動物交際實驗利用小鼠熟悉了環境后，檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間，來判斷小鼠的社交能力。二、動物交際實驗參數指標：活動距離、運動速度、測試時間區域指標各區域運動路程、逗留時間、靜止時間各區域（左區域、右邊區域、中央區域）次進入時間、進入次數長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數、接觸持續時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。

動物交際實驗2017/07/20

一、動物交際實驗用途用于檢測動物的自閉行為二、動物交際實驗原理：利用小鼠熟悉了環境后，檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間，來判斷小鼠的社交能力。三、動物交際實驗參數指標：活動距離、運動速度、測試時間區域指標各區域運動路程、逗留時間、靜止時間各區域（左區域、右邊區域、中央區域）次進入時間、進入次數長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數、接觸持續時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。

教你選擇和使用細胞培養板2017/07/20

細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具，形狀、規格、用途多樣，你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫？你是否正為如何方便、正確的使用培養板而苦惱？你對如何處理培養板是否也有困惑？對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會？1）細胞培養板的選擇：細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。平底和圓底（U型和

T迷宮實驗2017/07/10

（1）近半個世紀前，Kivy和Dember等人證明大鼠能辨別T-形迷宮（T-maze）兩臂顏色的變化。他們發現，將雄性大鼠置于T-形迷宮的主干臂15-30min，讓其能看見、但不能進入黑白兩臂。然后，改變其中一個臂的顏色，使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇T-形臂。結果顯示，大鼠總是選擇改變了顏色的那個臂（新異臂）。這一過程要依靠動物的記憶來完成。由此發展而成的T-形迷宮實驗成為目前用于評價空間記憶的常用的動物模型之一。當然，現在的T-形迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動物探究的動力。通常用