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轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的制成的實(shí)驗(yàn)步驟2017/09/26: 轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)在有膠原的底物上可能利于生長(zhǎng)，另外人或小鼠表皮在以3T3細(xì)胞為飼養(yǎng)層（用射線(xiàn)照射后）時(shí)，細(xì)胞易生長(zhǎng)并可發(fā)生一定程度的分化現(xiàn)象。降低PH、Ca2含量和溫度，向培養(yǎng)基中加入表皮生長(zhǎng)因子，均有利于表皮細(xì)胞生長(zhǎng)。以表皮細(xì)胞為例，用皮膚表皮和分離培養(yǎng)法可獲得純上皮細(xì)胞，方法如下：1、取材：外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好，去角化層薄者，切成0.5-1平方厘米小塊。2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。3、換入0.25%胰蛋白酶中，4攝氏度過(guò)夜。4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷

間質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)原理的概述2017/09/21: 間質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcell，MSC）是一群中胚層來(lái)源的具有自我更新和多向分化潛能的多能干細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)條件下可分化成多種組織細(xì)胞，包括成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等。間質(zhì)干細(xì)胞zui早是從骨髓中分離得到的，正常情況下，它在骨髓中的比例非常低，僅占單核細(xì)胞的1/105~1/104。骨髓中單個(gè)核細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同，紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞密度較大，為1.090g/ml左右，而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞密度為1.075~1.090g/m

用于轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的人血清制備秘方2017/09/19: 轉(zhuǎn)化細(xì)胞認(rèn)為天然培養(yǎng)基主要取自動(dòng)物體液或從動(dòng)物組織分離提取,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等,其中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖發(fā)揮著難以替代的作用。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、條件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異,其中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)能極大的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。血清中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分,故主要供組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)和診斷試劑等用。常見(jiàn)用于培養(yǎng)基的血清制品,按不同研究及使用目的,包括胎牛

成熟紅干細(xì)胞的抗癌機(jī)制是什么？2017/09/14: 美國(guó)和加拿大科學(xué)家日前發(fā)現(xiàn)，在紅干細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中，有一種酶充當(dāng)著“拆遷規(guī)劃員”的角色，負(fù)責(zé)把不需要的蛋白質(zhì)打上標(biāo)記以便拆除，使細(xì)胞變成高度專(zhuān)門(mén)化的成熟紅細(xì)胞。該發(fā)現(xiàn)將有助醫(yī)學(xué)界開(kāi)發(fā)治療血液疾病和癌癥的新方法。美國(guó)哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院等機(jī)構(gòu)的研究人員在美國(guó)《科學(xué)》雜志上報(bào)告說(shuō)，這種名叫UBE的酶是紅細(xì)胞完成分化的關(guān)鍵因素，缺少這種酶會(huì)導(dǎo)致貧血。紅細(xì)胞是哺乳動(dòng)物體內(nèi)zui簡(jiǎn)潔的細(xì)胞之一，主要由血紅蛋白組成，其余部分極度精簡(jiǎn)，以便盡量地運(yùn)輸氧氣。骨髓中的造血干細(xì)胞分化成半成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞，后者即將發(fā)育成熟時(shí)

人正常組織來(lái)源細(xì)胞試管內(nèi)造出大量紅細(xì)胞和血小板2017/09/12: 科學(xué)家們一般通過(guò)對(duì)成人人正常組織來(lái)源細(xì)胞進(jìn)行重組，讓其回到初始的干細(xì)胞狀態(tài)，從而獲得iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞可以利用皮膚細(xì)胞、血液細(xì)胞等成熟的身體細(xì)胞生成，并可進(jìn)一步分化成各種其他類(lèi)型的細(xì)胞。由于其源于病人體內(nèi)，不會(huì)引發(fā)免疫排斥反應(yīng)，從而成為生物研究領(lǐng)域的一個(gè)強(qiáng)大工具以及再生醫(yī)療的重要來(lái)源。據(jù)物理學(xué)家組織網(wǎng)近日?qǐng)?bào)道，美國(guó)科學(xué)家采用一種新奇的方法，對(duì)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）進(jìn)行分化，在試管內(nèi)出了無(wú)數(shù)的人類(lèi)紅血細(xì)胞和血小板。他們表示，得到的紅血細(xì)胞有望用于診查瘧疾和鐮狀細(xì)胞血癥，而血小板則可用來(lái)探

腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題的對(duì)策2017/09/07: 腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題的對(duì)策：1.細(xì)菌或真菌污染。?建議解決方法1.丟棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁?可能原因1.胰蛋白酶消化過(guò)度。2.支原體污染。3.培養(yǎng)瓶瓶底不干凈。4.培養(yǎng)液pH值過(guò)堿（NaHCO3分解）。5.消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過(guò)期儲(chǔ)存、儲(chǔ)存不當(dāng)。6.細(xì)胞老化（如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性）。7.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。?建議解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度。2.分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。3.注意刷洗，或換

轉(zhuǎn)化細(xì)胞遭受壓力時(shí)2017/09/05: 轉(zhuǎn)化細(xì)胞就像一個(gè)小型的工廠，負(fù)責(zé)生成超過(guò)2.5萬(wàn)種具有非常特異性的三維形狀的不同蛋白質(zhì)。就像一條不堪重負(fù)的流水線(xiàn)會(huì)出錯(cuò)那樣，壓力狀態(tài)下的細(xì)胞zui終會(huì)生成未折疊或錯(cuò)誤折疊的畸形蛋白質(zhì)。研究人員證實(shí)細(xì)胞能夠識(shí)別出這些錯(cuò)誤折疊蛋白的累積，就像飽受壓力的員工有可能暫時(shí)將文件從擠爆了的收件箱移動(dòng)到“雜物抽屜”中一樣，細(xì)胞會(huì)重新安排它的工作量以此來(lái)作出反應(yīng)。這項(xiàng)研究，有可能提供有關(guān)錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)堆積導(dǎo)致的一些疾病，如阿爾茨海默氏癥、肌萎縮側(cè)索硬化癥、亨廷頓氏病、帕金森病和2型糖尿病的新認(rèn)識(shí)。在近幾十年來(lái)

肝轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的多倍性2017/08/31: 多肝轉(zhuǎn)化細(xì)胞是多倍體，含有4倍、8倍、16倍或更多倍的單倍體染色體組，盡管這一現(xiàn)象的重要性并不清楚。現(xiàn)在，用小鼠所進(jìn)行的一項(xiàng)研究表明，肝細(xì)胞在活體中既可增加也可降低它們的多倍性。多倍性逆轉(zhuǎn)以前被認(rèn)為是減數(shù)分裂所*的，但這項(xiàng)工作表明，它也可出現(xiàn)在正常體細(xì)胞中。多倍性的增加是通過(guò)失敗的胞質(zhì)分裂出現(xiàn)的，而多倍性的減少則是多極性有絲分裂的一個(gè)結(jié)果。所導(dǎo)致的遺傳異質(zhì)性在肝受傷之后也許是有利的，在這個(gè)時(shí)候，具有遺傳穩(wěn)定性的轉(zhuǎn)化細(xì)胞將會(huì)從事先存在的一組多樣化基因型中被選擇出來(lái)。小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELI

解析轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)方法2017/08/29: 轉(zhuǎn)化細(xì)胞比乳鼠心肌難養(yǎng)，用無(wú)血清培養(yǎng)基，呈桿狀，橫紋清楚，在培養(yǎng)基里細(xì)胞不搏動(dòng)。大鼠心肌細(xì)胞分離一般是采用二型膠原酶分離，濃度為1mg/ml（用無(wú)鈣臺(tái)氏液配制），同時(shí)酶液里加入牛磺酸，BSA。一般采用Langendorff灌流的方法，大鼠開(kāi)胸后，迅速取出心臟，放入冰的臺(tái)氏液中，找到主動(dòng)脈后，掛上Langendorff裝置，衡流泵灌入無(wú)鈣臺(tái)氏液（37度），開(kāi)始心臟會(huì)搏動(dòng)幾下，這樣把心臟中的淤血擠出（此處也有人用有鈣臺(tái)氏液灌流，好讓心臟充分搏動(dòng)，把淤血擠出，不過(guò)我們摸索發(fā)現(xiàn)只要取心臟到掛上去的時(shí)間短

*干細(xì)胞捕獲和制備的平臺(tái)2017/08/24: 干細(xì)胞有了用新興的微流體方法和分子生物學(xué)技術(shù)，從群體噪音中提取單細(xì)胞信號(hào)已不再是遙不可及。作為單細(xì)胞基因組學(xué)領(lǐng)域的者，F(xiàn)luidigm自2007年以來(lái)就一直為研究人員提供BioMark™和BioMarkHD平臺(tái)，讓我們能夠輕松檢測(cè)到單細(xì)胞水平上的基因組特征。如今，F(xiàn)luidigm又推出市場(chǎng)上*單細(xì)胞捕獲和制備的平臺(tái)——C1™單細(xì)胞全自動(dòng)制備系統(tǒng)。C1系統(tǒng)，基于Fluidigm創(chuàng)新的微流體技術(shù)，能夠讓研究者們快速可靠地分離單個(gè)細(xì)胞并進(jìn)行基因組分析。地將分離細(xì)胞、提取RNA、逆轉(zhuǎn)錄和預(yù)擴(kuò)增mRNA的

離體人正常組織來(lái)源細(xì)胞培養(yǎng)需要的生理?xiàng)l件2017/08/22: 簡(jiǎn)言之，即人正常組織來(lái)源細(xì)胞需要什么就提供什么，道理是如此，真正能做到這點(diǎn)尚需時(shí)日，人們至今對(duì)細(xì)胞的生命周期控制機(jī)理認(rèn)識(shí)不足，癌細(xì)胞雖然也來(lái)自正常細(xì)胞，但至今不知道究竟為什么癌細(xì)胞很難停止已經(jīng)啟動(dòng)的有害分裂，盡管如此，人們長(zhǎng)期的研究結(jié)果表明，離體細(xì)胞培養(yǎng)需要的基本條件就是下列細(xì)胞生理?xiàng)l件。1.溫度溫度過(guò)低時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢甚至不生長(zhǎng)。利用冷凍保藏細(xì)胞可保持細(xì)胞的原有分裂分化能力。溫度過(guò)高導(dǎo)致細(xì)胞死亡。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的zui適溫度決定的。多數(shù)生物大分子遇到高溫后容易導(dǎo)致空間結(jié)構(gòu)改變或者喪失

轉(zhuǎn)化細(xì)胞成功修復(fù)小鼠受損視神經(jīng)2017/08/17: 在轉(zhuǎn)化細(xì)胞重建小鼠的視神經(jīng)之前，小鼠的癥狀類(lèi)似于人類(lèi)的青光眼，這是除白內(nèi)障之外的第二大致盲原因。該研究的作者、神經(jīng)生物學(xué)副教授安德魯.休伯曼（AndrewHuberman）指出，白內(nèi)障通常可以通過(guò)手術(shù)移除，但青光眼則沒(méi)有有效的治療方法。該研究的主要作者為加州大學(xué)圣地亞哥分校的研究生Jung-HwanAlbertLim。青光眼由視神經(jīng)受壓過(guò)高引起，*有將近7千萬(wàn)人深受此疾病之苦。外傷、視網(wǎng)膜脫落、垂體瘤、多種腦癌以及其它原因也會(huì)對(duì)視神經(jīng)造成損傷，導(dǎo)致視力下降。視網(wǎng)膜由一層薄薄的細(xì)胞構(gòu)成，不超過(guò)的一

分析人正常組織來(lái)源細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)辦法2017/08/15: 人正常組織來(lái)源細(xì)胞是指歸于割裂期的細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分率．用于表明細(xì)胞增殖旺盛的程度，也可用于檢查藥物對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響。用蓋玻片培育法培育細(xì)胞，做固定和染色后，鏡下調(diào)查和計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞中處于割裂期的細(xì)胞數(shù)并核算MI。(一)資料1．待檢資料(藥物)。2．細(xì)胞培育成層的貼壁細(xì)胞。3．試劑甲醇、3％吉姆薩染液。4．器材CO2培育箱、倒置顯微鏡、蓋玻片(2．2cm×2．2cm，需預(yù)先清潔和滅菌處理)、塑料培育皿(3．5cm)、載玻片、封片用蓋玻片、中性樹(shù)膠。(二)試驗(yàn)辦法1．將細(xì)胞消化成單個(gè)細(xì)胞

免疫監(jiān)視干細(xì)胞如何特赦有益細(xì)菌2017/08/10: 所謂的干細(xì)胞在維持這種重要平衡方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。DC具有兩個(gè)*不同的生理作用：在感染的情況下，它們對(duì)于激活免疫應(yīng)答是必需的，但它們也參與促進(jìn)免疫耐受，即它們能夠主動(dòng)抑制免疫應(yīng)答。在這個(gè)意義上，DC細(xì)胞既是戰(zhàn)士，也是外交官。在后者，它們刺激所謂的誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（iTreg），其控制免疫耐受性的發(fā)展并抑制免疫系統(tǒng)的活化。為了觸發(fā)對(duì)腸微生物群的耐受性，腸上皮中的DC識(shí)別和內(nèi)化微生物蛋白質(zhì)并遷移到與腸相關(guān)的淋巴結(jié)。在途中，細(xì)菌蛋白質(zhì)被加工成小片段。然后將這些標(biāo)簽顯示在DC的表面上，與被調(diào)節(jié)性T細(xì)胞識(shí)別

正確的復(fù)蘇轉(zhuǎn)化細(xì)胞方法2017/08/08: 轉(zhuǎn)化細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?請(qǐng)看下文：活力檢查–千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查–檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液–在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5x106cells/ml(根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)凍存液–用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液

次利用熒光探針解析干細(xì)胞膜的奧秘2017/08/03: 近日，來(lái)自日本、美國(guó)和印度的科學(xué)家們?cè)诟杉?xì)胞中觀察到了細(xì)胞膜中的筏區(qū)域，即細(xì)胞膜中攜帶特殊分子群體的活性部位，相關(guān)研究刊登于雜志NatureChemicalBiology上。文章中研究人員NaokoKomura說(shuō)道，對(duì)于俗稱(chēng)為筏區(qū)域的特殊細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)域的推測(cè)已經(jīng)超過(guò)25年了，但科學(xué)家們從來(lái)沒(méi)有在活細(xì)胞中真正觀察到該結(jié)構(gòu)，而本文中研究者就做出了重大的突破。文章中研究人員觀察了神經(jīng)節(jié)甘脂的行為，神經(jīng)節(jié)甘脂是一種特殊的脂質(zhì)分子，其在機(jī)體多種生物學(xué)過(guò)程中扮演著重要角色，包括脂質(zhì)筏區(qū)域的形成、毒素進(jìn)入細(xì)胞以

人正常組織來(lái)源細(xì)胞的凍存步驟2017/08/01: 人正常組織來(lái)源細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。下面我們就來(lái)介紹一下細(xì)胞凍存的步驟：1.選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞,在凍存前1d換液。2.按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×107／ml左右密度，離心，去上清。3.加入配制好的凍存液，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10％二甲基亞砜或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外。4.分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加1.5m懸液。5.旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做

干細(xì)胞傳代吹打減少氣泡的方法2017/07/27: 1.有一些干細(xì)胞可以不用消化液就能夠吹打下來(lái)。個(gè)人認(rèn)為能不用消化液是的。譬如巨噬細(xì)胞。我一直維持巨噬細(xì)胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時(shí)候我一般會(huì)用瓶?jī)?nèi)未換的剩余舊培養(yǎng)液，這樣子比用新的培養(yǎng)基可以減少點(diǎn)泡沫的生成。當(dāng)然這個(gè)一定要求原培養(yǎng)基未被污染。2.吹打的時(shí)候我們都知道要一點(diǎn)挨著一點(diǎn)吹，這樣子不會(huì)漏掉地方。而我每次都會(huì)首先沿著兩條對(duì)角線(xiàn)的方向吹打，然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣子就可以比較容易把細(xì)胞吹下來(lái)，因?yàn)槭紫燃?xì)胞的各個(gè)方向都受力了，而且比較均勻，細(xì)胞比較容易下來(lái)，而且對(duì)細(xì)胞形態(tài)的維護(hù)

脂肪干細(xì)胞的應(yīng)用情況2017/07/25: 脂肪干細(xì)胞組織是人體內(nèi)含量十分豐富的組織。隨著肥胖癥患者的增多，人類(lèi)脂肪開(kāi)始“富余”，并漸成為累贅。人們一直以為，脂肪僅僅只有儲(chǔ)存熱量作用，過(guò)量?jī)?chǔ)存會(huì)導(dǎo)致脂肪肝、血管硬化。殊不知，脂肪還蘊(yùn)藏有十分稀缺的干細(xì)胞資源。Zuk等人將脂肪抽吸術(shù)后的脂肪細(xì)胞(processedlipoaspiratecell，PLA)收集、消化后進(jìn)行體外培養(yǎng)研究。經(jīng)過(guò)不同的細(xì)胞因子的誘導(dǎo)，PLA能夠向骨、軟骨、骨骼肌、脂肪、神經(jīng)等組織轉(zhuǎn)化。PLA經(jīng)轉(zhuǎn)化后細(xì)胞表面的CD標(biāo)記物與骨髓干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化標(biāo)記物有所不同，如兩者CD

腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的介紹2017/07/20: 腫瘤細(xì)胞與體內(nèi)正常細(xì)胞相比，不論在體內(nèi)或在體外，在形態(tài)、生長(zhǎng)增值、遺傳性狀等方面都有顯著的不同。生長(zhǎng)在體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞和在體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞，其差異較小，但也并非*相同。培養(yǎng)中的腫瘤細(xì)胞具以下突出特點(diǎn)：（一）形態(tài)和性狀培養(yǎng)中癌細(xì)胞無(wú)光學(xué)顯微鏡下特異形態(tài)，大多數(shù)腫瘤細(xì)胞鏡下觀察比二倍體細(xì)胞清晰，核膜、核仁輪廓明顯，核糖體顆粒豐富。電鏡觀察癌細(xì)胞表面的微絨毛多而細(xì)密，微絲走行不如正常細(xì)胞規(guī)則，可能與腫瘤細(xì)胞具有不定向運(yùn)動(dòng)和錨著不依賴(lài)性有關(guān)。（二）生長(zhǎng)增殖腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)具有不受控增殖性，在體外培養(yǎng)中仍如

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