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流式細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用2022/12/09: 流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種基于激光的技術(shù)，用于生物顆粒的多參數(shù)分析。隨著技術(shù)的發(fā)展，F(xiàn)CM已進(jìn)入許多使用領(lǐng)域。FCM也用于免疫表型研究。因此，它可以用于確定細(xì)胞亞群、譜系、細(xì)胞分化和激活階段以及克隆性。隨著FCM分析的發(fā)展，B細(xì)胞發(fā)育和分化的各個(gè)階段已變得可識(shí)別。此外，F(xiàn)CM已經(jīng)開始識(shí)別和表征幾個(gè)不同B細(xì)胞亞群和相關(guān)診所中的表達(dá)譜。流式細(xì)胞術(shù)分析血小板功能有較多優(yōu)勢(shì)。它可以血小板直接在全血的生理環(huán)境中進(jìn)行分析（包括紅細(xì)胞和白細(xì)胞，兩者都影響血小板活化）。樣本的簡(jiǎn)化操作可防止人為的體外活化和血小板

使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板的注意事項(xiàng)2022/12/09: 通過使用使用流式細(xì)胞儀可以對(duì)血小板進(jìn)行信號(hào)傳遞、細(xì)胞骨架架構(gòu)、糖蛋白結(jié)構(gòu)、血小板活化反應(yīng)，糖蛋白缺陷檢測(cè)，RNA含量，血小板抗體等分析檢測(cè)。使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行血小板分析檢測(cè)時(shí)需要注意以下幾點(diǎn)：一)抗體的選擇選擇CDWorkshop中的單克隆抗體.單克隆抗體反應(yīng)特異性高,非特異性結(jié)合少,但由于血小板富含F(xiàn)cRⅡ(CD32,FeⅡ受體),而Fc受體對(duì)不同抗體亞類具有不同親和力,所以在業(yè)類選擇上,對(duì)于人的抗體以選擇IgG1為好.二)抗凝劑的選擇盡量避免使用肝素;EDTA在室溫20~25℃時(shí)其抗凝效果與

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟2022/12/08: 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是指將細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或平板上，待細(xì)胞融合后用槍頭或其他硬物在中央?yún)^(qū)域畫一條線，這條線內(nèi)的細(xì)胞被機(jī)械力去除掉了，然后將細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)，觀察細(xì)胞向無細(xì)胞的劃痕區(qū)域遷移的情況，來判斷細(xì)胞的遷移能力。其意義在于：價(jià)格低廉，操作簡(jiǎn)單，還有很重要的一點(diǎn)在于細(xì)胞外圍環(huán)境簡(jiǎn)單、單純，容易控制，是腫瘤細(xì)胞基本的研究方法。一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)開始前，將離心管、吸管筒、移液槍、槍頭，直尺等放入無菌超凈工作臺(tái)，以紫外線照射30min。然后，采用通風(fēng)機(jī)通風(fēng)3min。取出無菌6孔板，用黑色記號(hào)筆在6孔板底部，用直

移液槍壞了怎么維修2022/12/08: 移液槍是實(shí)驗(yàn)室里的常用工具，無論是分子生物學(xué)、蛋白組化免疫、細(xì)胞生物學(xué)、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，科研所都經(jīng)常用到。移液器的準(zhǔn)確度很重要，稍有偏差就會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成影響，甚至實(shí)驗(yàn)失敗。所以建議移液器的保養(yǎng)周期為1年，若長(zhǎng)時(shí)間不保養(yǎng)不僅會(huì)影響移液器的準(zhǔn)確度，還會(huì)出現(xiàn)移液卡頓，漏液、殘液等更多的問題，不當(dāng)?shù)牟僮鞣椒ㄒ矔?huì)對(duì)移液器造成不同程度的損壞。移液槍壞了怎么維修，下面小編歸納一下移液過程中的常見的問題及解決方案，以供參考。一、移液器吸液嘴內(nèi)有殘液，排液不盡：出現(xiàn)這種情況主要是因?yàn)橐埔簶寴岊^不匹配，建議使用換移液器原配

移液槍壞了怎么辦？你還在為移液器校準(zhǔn)苦惱嗎2022/12/08: 最近和很多移液器用戶聊移液器校準(zhǔn)的話題時(shí)，很多移液的操作人員居然也是抱著“佛系心態(tài)”。當(dāng)被問及：你們移液器會(huì)定期送給專業(yè)的機(jī)構(gòu)做校準(zhǔn)嗎，佛系用戶們的回答大致是這樣幾類：1.移液器校準(zhǔn)啊，好啊，那你們能上門來幫我們校一下嗎？2.定期校準(zhǔn)啊？不清楚哎，我們一般移液器出問題都找采購(gòu)的。3.是免費(fèi)的嗎？哦，收費(fèi)的啊，那我們自己測(cè)測(cè)吧。對(duì)于移液器校準(zhǔn)，小編需要嚴(yán)肅地和用戶們探討幾個(gè)知識(shí)點(diǎn)。一、移液器的校準(zhǔn)能否上門進(jìn)行？移液器的校準(zhǔn)，需要在規(guī)定的條件下（一般是溫濕度和環(huán)境氣流的控制）、在滿足稱量要求的天平上

GMP車間環(huán)境潔凈要求2022/12/06: 藥品生產(chǎn)企業(yè)必須有整潔的生產(chǎn)環(huán)境，有一定的綠化面積；廠區(qū)的地面要全部硬化，路面及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對(duì)藥品的生產(chǎn)造成污染；生產(chǎn)、行政、生活和輔助區(qū)的總體布局應(yīng)合理，相互分開，不得互相妨礙。GMP對(duì)藥品生產(chǎn)環(huán)境和潔凈室的潔凈要求有哪些呢？一、潔凈區(qū)表面應(yīng)符合哪些要求？潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無裂縫、接口嚴(yán)密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與場(chǎng)面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少積聚和便于清潔。潔凈區(qū)的光照度應(yīng)不低于300勒克斯；對(duì)照度有特殊要求的生產(chǎn)部位可設(shè)置局部照明。二、藥品生產(chǎn)潔凈室

GMP制藥企業(yè)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求是什么2022/12/06: 一、制藥廠區(qū)環(huán)境的衛(wèi)生要求：GMP制藥企業(yè)廠區(qū)環(huán)境清潔整齊，無雜草和積水、無蚊蠅孳生地，空氣質(zhì)量符合國(guó)家規(guī)定的大氣標(biāo)準(zhǔn)；⑵生產(chǎn)區(qū)、生活區(qū)、輔助區(qū)分開，人流物流分開；⑶廠區(qū)內(nèi)無廢物和垃圾，廠區(qū)外的垃圾站必須遠(yuǎn)離生產(chǎn)區(qū)，有隔離消毒措施，并及時(shí)清運(yùn)，不對(duì)廠區(qū)環(huán)境造成污染；⑷廠區(qū)內(nèi)的衛(wèi)生設(shè)施要清潔、通暢，無堵塞物及排泄物，由專人及時(shí)清掃、消毒；⑸廠區(qū)內(nèi)車輛及其他物品須放在規(guī)定區(qū)域，不得在其他地方任意堆放。二、普通生產(chǎn)區(qū)的衛(wèi)生要求⑴門窗、玻璃、墻面、頂棚應(yīng)清潔，無灰塵，地面應(yīng)平整，無積水、雜物。建筑結(jié)構(gòu)設(shè)

關(guān)于FDA機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)耗材短缺事件解答2022/12/06: 美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)意識(shí)到，由于公共衛(wèi)生緊急事件期間需求增加以及最近的供應(yīng)商供應(yīng)挑戰(zhàn)，美國(guó)的血液樣本采集（抽血）管供應(yīng)正經(jīng)歷重大中斷。2022年1月19日，F(xiàn)DA更新了設(shè)備短缺清單，包括所有血液樣本采集管（產(chǎn)品代碼GIM和JKA）。此前，2021年6月10日，F(xiàn)DA僅將檸檬酸鈉（淺藍(lán)色頂部）管添加到設(shè)備短缺清單中。FDA建議醫(yī)療保健提供者、實(shí)驗(yàn)室主任、抽血醫(yī)生和其他人員考慮采樣管保存策略，以盡量減少采樣管的使用，并為那些在醫(yī)學(xué)上需要檢測(cè)的患者提供優(yōu)質(zhì)和安全的患者護(hù)理。問：所有采樣管都缺

如何做移液器的CNAS 認(rèn)證2022/12/02: 移液器作為轉(zhuǎn)移液體的計(jì)量工具并非強(qiáng)檢產(chǎn)品。但因通常應(yīng)用于精準(zhǔn)的液體轉(zhuǎn)移，對(duì)性能要求很嚴(yán)格，用戶往往需要檢定或校準(zhǔn)。移液器的檢定工作一般由計(jì)量院執(zhí)行，出具合格或不合格的定性結(jié)論；校準(zhǔn)則可以由企業(yè)內(nèi)部或外部校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室完成，出具校準(zhǔn)報(bào)告。校準(zhǔn)報(bào)告不直接體現(xiàn)合格或不合格，可間接通過校準(zhǔn)依據(jù)的法規(guī)進(jìn)行參數(shù)比對(duì)，從而間接確認(rèn)是性能否符合要求。CNAS認(rèn)證是通過CNAS認(rèn)可并能對(duì)外證明儀器設(shè)備的準(zhǔn)確度。目前校準(zhǔn)的檢定規(guī)程有三種：企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)標(biāo)（JJG-646）和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（ISO8655-2）。不同規(guī)程在具體準(zhǔn)

PCR實(shí)驗(yàn)中DNA回收實(shí)驗(yàn)步驟2022/12/02: 【實(shí)驗(yàn)原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當(dāng)濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進(jìn)行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個(gè)非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產(chǎn)物插入到質(zhì)粒載體的多克隆位點(diǎn)，可用于PCR產(chǎn)物的克隆和測(cè)序。商品化的T載體有很多。本實(shí)驗(yàn)采用TaKaRa公司的pMDTM18-TSim

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀-細(xì)胞計(jì)數(shù)方法2022/12/01: 細(xì)胞計(jì)數(shù)是確定培養(yǎng)中鋪板的細(xì)胞濃度、確定細(xì)胞活力和評(píng)估細(xì)胞分離程序結(jié)果的一個(gè)組成部分。建議在細(xì)胞分離之前進(jìn)行初始細(xì)胞計(jì)數(shù)；然后可以將該數(shù)字與細(xì)胞分離后的細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行比較，以計(jì)算細(xì)胞恢復(fù)率。此外，當(dāng)預(yù)期細(xì)胞活力可能會(huì)降低時(shí)，應(yīng)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，例如，在處理冷凍保存的細(xì)胞或離體操作的細(xì)胞時(shí)。本文描述了如何使用3%乙酸和亞-CH3藍(lán)進(jìn)行總有核細(xì)胞計(jì)數(shù)，以及如何通過臺(tái)盼藍(lán)染料排除進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)步驟和方法：I部分：樣品制備選項(xiàng)1：用3%乙酸和亞-CH3藍(lán)對(duì)總有核細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行細(xì)胞稀釋使用磷酸鹽緩沖鹽水或

SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA簡(jiǎn)介2022/12/01: 近些年來，隨著PCR技術(shù)的出現(xiàn)，以及DNA克隆和測(cè)序方法的發(fā)展，對(duì)大量質(zhì)粒載體和重組子的需求也大大減少。在本方案中，通過堿裂解法的放大（BirnboimａndDoly1979）,質(zhì)粒DNA可從清亮的細(xì)菌裂解物中通過含有漠化乙錠的CsCl梯度離心來進(jìn)行純化。無論是高拷貝數(shù)的質(zhì)粒還是低拷貝數(shù)的質(zhì)粒，通過這種方法可以得到每毫升3?5^g的DNA。重組子的質(zhì)粒一般產(chǎn)量較少，這取決于克隆的DNA片段的大小和特點(diǎn)。材料為正確使用本方案中的器材和危險(xiǎn)試劑，必須查閱相應(yīng)的材料安全數(shù)據(jù)表并咨詢所在機(jī)構(gòu)的環(huán)境衛(wèi)生和

高效消毒劑有哪些2022/11/25: 潔凈室和潔凈區(qū)必須定期清潔和消毒。這通常使用清潔劑步驟進(jìn)行，然后使用消毒劑。可能需要用水去除消毒劑的殘留物。清潔和消毒也應(yīng)延伸到設(shè)備。此外，對(duì)于人員，消毒對(duì)于制藥企業(yè)來說很重要。那么高效消毒劑有哪些？本文介紹了在制藥設(shè)施中實(shí)際應(yīng)用清潔和驗(yàn)證程序時(shí)要考慮的關(guān)鍵點(diǎn)，重點(diǎn)是消毒劑的選擇。洗滌劑對(duì)于潔凈室，需要使用清潔劑去除“污垢”（蛋白質(zhì)、油脂等）。洗滌劑滲透污垢并降低表面張力（將土壤固定在表面）以使其去除。為了使消毒劑有效工作，這是必要的。此外，懸浮中的微生物很容易通過沖洗去除或用消毒劑殺死。對(duì)于這

潔凈室消毒方法和使用消毒劑的注意事項(xiàng)2022/11/25: 潔凈室是實(shí)驗(yàn)室中重要的區(qū)域，潔凈室的消毒措施也是重要的，那么潔凈室消毒的注意事項(xiàng)有哪些？一、消毒制度的制定潔凈室清潔和消毒涉及許多重要步驟，所以需要制定嚴(yán)格的消毒標(biāo)準(zhǔn)、消毒方法等。二、清潔、打掃在制藥業(yè)中，清潔是指從表面去除殘留物和污垢的過程，以達(dá)到表面清潔的效果。在進(jìn)行清潔的過程中一般會(huì)使用清潔劑，因?yàn)榍鍧崉┛梢酝ㄟ^滲透污垢和降低表面張力（將污垢固定在表面）來去除污垢。對(duì)于潔凈室，在使用消毒劑之前同樣需要有清潔的步驟。也就是在使用消毒劑之前，清潔設(shè)備表面等，從而保證良好的消毒效果。三、消毒劑的

潔凈室消毒劑-消毒效果驗(yàn)證方法2022/11/24: 潔凈室消毒劑-消毒效果驗(yàn)證方法潔凈室消毒常常會(huì)用到多種不同類型的消毒劑，消毒力的效果驗(yàn)證，以及驗(yàn)證清潔和消毒程序的有效性，成為衡量消毒劑的重要指標(biāo)。關(guān)于潔凈室消毒劑效果驗(yàn)證方法主要可以分為四個(gè)階段來進(jìn)行，每個(gè)階段都可以根據(jù)法規(guī)要求獨(dú)立執(zhí)行。階段1：內(nèi)源性微生物污染的表征：識(shí)別被認(rèn)為是關(guān)鍵和最能代表消毒劑使用環(huán)境的內(nèi)源性微生物菌株，這有助于確定將進(jìn)行功效測(cè)試的微生物。階段2：實(shí)際使用條件下消毒效果的實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)：使用定量載體測(cè)試（參考方法：EN13697:2001）和代表待處理表面（例如玻璃、不銹鋼、

季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點(diǎn)是什么2022/11/24: 季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽(yáng)離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團(tuán)取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質(zhì)由其取代的R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環(huán)銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團(tuán)的碳鏈越長(zhǎng)，其水溶性越

季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點(diǎn)2022/11/24: 季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽(yáng)離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團(tuán)取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質(zhì)由其取代的R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環(huán)銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團(tuán)的碳鏈越長(zhǎng)，其水溶性越

PCR產(chǎn)物的克隆-DNA回收實(shí)驗(yàn)步驟2022/11/24: PCR產(chǎn)物的克隆-DNA回收實(shí)驗(yàn)步驟【實(shí)驗(yàn)原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當(dāng)濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進(jìn)行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個(gè)非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產(chǎn)物插入到質(zhì)粒載體的多克隆位點(diǎn)，可用于PCR產(chǎn)物的克隆和測(cè)序。商品化的T載體有很多。本實(shí)驗(yàn)采用TaK

選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢2022/11/24: 消毒是將存在的微生物數(shù)量減少到不存在風(fēng)險(xiǎn)的水平的過程。消毒不同于滅菌，其中物體不含所有活的微生物。那么選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢？生物消毒劑通常不會(huì)殺死它們接觸的所有微生物，也不能同樣好地消毒所有微生物，例如大多數(shù)不會(huì)殺死細(xì)菌孢子。選擇的消毒劑類型取決于微生物、應(yīng)用方法和待消毒材料的性質(zhì)。生物消毒劑應(yīng)用于非生命物體和材料，例如表面和儀器以控制和預(yù)防感染，而防腐劑（一種消毒劑）應(yīng)用于活體組織。選擇和使用生物消毒劑時(shí)需要考慮以下因素：1.功效：消毒劑必須對(duì)目標(biāo)微生物起作用。可以使用制造商的文獻(xiàn)

實(shí)時(shí)熒光pcr檢測(cè)DNA濃度常用的生物試劑2022/11/23: 實(shí)時(shí)熒光pcr檢測(cè)利用熒光分析法用特定結(jié)合DNA的染料來測(cè)定DNA的濃度。常用的DNA染料包括溴化乙錠、Hoechst33258、SYBRGreenI和II、SYBRGold及PicoGreen。溴化乙錠溴化乙錠含有三環(huán)菲嚏平面環(huán)系統(tǒng)，可嵌入到雙鏈DNA堿基之間。嵌入DNA雙螺旋后，溴化乙錠的菲嚏環(huán)平面位于與螺旋軸相垂直的位置，并通過范德瓦耳斯力與上下堿基結(jié)合。而其平面環(huán)系統(tǒng)被埋在底部，其外側(cè)的苯基和乙烷基處于DNA雙螺旋的大溝內(nèi)。在高強(qiáng)度離子溶液的飽和狀態(tài)，大約每2.5個(gè)堿基對(duì)嵌入一分子的溴化

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