BY-0780 W256Walker癌肉瘤256瘤株細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0780
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- 更新時間 2025/7/14 10:14:03
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W256Walker癌肉瘤256瘤株細(xì)胞系
W256Walker癌肉瘤256瘤株細(xì)胞系源自 Wistar 大鼠自發(fā)性癌肉瘤，是同時保留上皮源性惡性增殖與間葉組織侵襲特性的雙相型腫瘤模型，在癌肉瘤轉(zhuǎn)化機(jī)制、跨胚層分化及放hua療抵抗研究中具有不可替代的價值，為解析這種罕見雙相惡性腫瘤的生物學(xué)行為提供了經(jīng)典工具。
該細(xì)胞系呈現(xiàn)典型的癌肉瘤雙相形態(tài)與表型特征。顯微鏡下，細(xì)胞同時存在上皮樣與梭形細(xì)胞兩種形態(tài)：上皮樣細(xì)胞呈多邊形，排列成巢狀，胞質(zhì)豐富，可見細(xì)胞間連接；梭形細(xì)胞呈長梭形，排列成束狀，胞質(zhì)內(nèi)富含微絲，兩種細(xì)胞比例約 1:2。核質(zhì)比普遍較高，染色質(zhì)粗顆粒狀，核仁明顯（2-3 個），核分裂象活躍（每 10 個高倍視野 10-12 個），電鏡下可見上皮樣細(xì)胞含橋粒結(jié)構(gòu)，梭形細(xì)胞含肌動蛋白微絲，符合癌肉瘤的雙相分化特征。免疫表型分析顯示，細(xì)胞同時表達(dá)上皮標(biāo)志物 CK8/18（陽性率 80%）和間葉標(biāo)志物 vimentin（陽性率 90%），這種雙表型特征是其區(qū)別于單純癌或肉瘤的核心標(biāo)志，Western blot 可同時檢測到兩種蛋白的特異性條帶。
體外培養(yǎng)體系中，W256 細(xì)胞展現(xiàn)出混合生長特性與強(qiáng)轉(zhuǎn)移潛能。最適培養(yǎng)條件為含 10% 馬血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基（馬血清可維持雙相表型），37℃、5% CO?環(huán)境下，傳代周期約 60 小時，倍增時間約 45 小時，貼壁生長的上皮樣細(xì)胞與懸浮生長的梭形細(xì)胞動態(tài)平衡。其顯著特點是肝轉(zhuǎn)移傾向性ji強(qiáng)，Transwell 實驗中穿透肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的能力是單純癌細(xì)胞系的 2 倍，這種器官特異性轉(zhuǎn)移與高表達(dá)肝竇內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子 ICAM-1 相關(guān)，黏附率達(dá) 55%，較其他腫瘤細(xì)胞高 30%。軟瓊脂克隆形成率達(dá) 40%，克隆內(nèi)可見兩種細(xì)胞混雜分布，連續(xù)傳代 40 次后雙相特征穩(wěn)定，凍存復(fù)蘇存活率超 85%。
在動物模型中，W256 細(xì)胞的成瘤與轉(zhuǎn)移模式j(luò)i具特點。接種 1×10?個細(xì)胞至 Wistar 大鼠肌肉，7 天形成實體瘤，14 天出現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，21 天肝轉(zhuǎn)移率達(dá) 90%（肺轉(zhuǎn)移僅 30%），模擬人類癌肉瘤的肝轉(zhuǎn)移偏好。病理顯示腫瘤組織內(nèi)上皮樣細(xì)胞巢與梭形細(xì)胞束交錯分布，免疫組化可見 CK 與 vimentin 陽性區(qū)域相互穿插，肝轉(zhuǎn)移灶保留原發(fā)灶雙相特征。熒光追蹤證實，細(xì)胞通過門靜脈系統(tǒng)定植肝臟，分泌 MMP-13 降解肝竇基底膜，該酶活性是原發(fā)灶的 1.8 倍，抑制劑處理可使肝轉(zhuǎn)移率下降 65%。
發(fā)病機(jī)制研究揭示其du特的分子異常。基因測序顯示，細(xì)胞存在 p53 缺失與 K-ras 激活突變，同時伴隨上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）調(diào)控因子 Snail 高表達(dá)，使上皮細(xì)胞獲得間葉表型。Western blot 顯示，PI3K/Akt 與 MAPK 通路同時激活，磷酸化 Akt 與 ERK 水平分別是正常組織的 5 倍和 4 倍，雙通路抑制劑聯(lián)合處理可使增殖率下降 70%，顯著優(yōu)于單通路抑制。與單純癌或肉瘤相比，其表觀遺傳修飾異常更顯著，H3K27me3 水平低 30%，導(dǎo)致多能性基因 Oct4 異常表達(dá)，可能與雙相分化潛能相關(guān)。
轉(zhuǎn)移機(jī)制方面，W256 細(xì)胞的肝靶向轉(zhuǎn)移涉及多重調(diào)控。除 ICAM-1 介導(dǎo)的黏附外，細(xì)胞高表達(dá) CXCR4，可響應(yīng)肝組織高濃度 CXCL12 趨化因子，遷移能力是 CXCR4 陰性細(xì)胞的 2.5 倍，CXCR4 拮抗劑可使肝轉(zhuǎn)移灶減少 50%。代謝組學(xué)分析顯示，其依賴谷an酰胺分解供能，肝內(nèi)谷an酰胺豐富的微環(huán)境可促進(jìn)轉(zhuǎn)移灶生長，谷an酰胺酶抑制劑處理使肝轉(zhuǎn)移瘤體積縮小 40%。
在藥物篩選應(yīng)用中，該細(xì)胞系為癌肉瘤的聯(lián)合治療提供依據(jù)。體外實驗顯示，細(xì)胞對蒽環(huán)類藥物與抗血管生成藥物聯(lián)用敏感，殺傷率達(dá) 80%（單藥分別為 45% 和 30%），這種協(xié)同效應(yīng)與減少腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞浸潤相關(guān)。體內(nèi)實驗證實，聯(lián)合方案可使大鼠原發(fā)瘤縮小 60%，肝轉(zhuǎn)移率從 90% 降至 35%，生存期延長 50%。因其雙相特征，還可用于篩選同時針對癌與肉瘤成分的藥物，某新型雙靶點抑制劑對兩種細(xì)胞亞群的 IC50 均 < 1μM，展現(xiàn)治療潛力。
腫瘤微環(huán)境研究發(fā)現(xiàn)，W256 細(xì)胞可重塑基質(zhì)形成 “轉(zhuǎn)移前龕”。與肝星狀細(xì)胞共培養(yǎng)時，可誘導(dǎo)其分泌膠原 Ⅰ，形成有利于轉(zhuǎn)移的纖維化微環(huán)境，這種交互作用依賴 TGF-β1，中和抗體處理可使肝纖維化程度下降 50%，同時抑制轉(zhuǎn)移灶生長。缺氧條件下，細(xì)胞分泌 VEGF-C 促進(jìn)淋巴管生成，使區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率增加 40%，VEGF-C 抗體可阻斷這一過程。
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