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BY-1229 NRK-52E正常大鼠腎細胞系

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NRK-52E正常大鼠腎細胞系
NRK-52E正常大鼠腎細胞系作為源自大鼠腎臟近曲小管的上皮細胞模型,因保留完整的腎小管重吸收功能及代謝活性,在腎臟生理功能、藥物腎毒性及腎小管損傷機制研究中應用廣泛,成為探究腎小管上皮細胞生物學特性的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠正常腎臟皮質近曲小管組織,經原代培養和永生化處理建立。細胞形態呈典型上皮樣,多為立方形或多邊形,排列緊密呈鋪路石樣,胞質豐富,可見刷狀緣結構,約 8% 細胞呈現雙核現象,細胞核呈圓形,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,具有明顯接觸抑制,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數表現出腎小管上皮特征:倍增時間約 60 小時,連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型(染色體數 42 條);近曲小管標志物 γ- 谷氨酰轉移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)活性分別為正常腎小管細胞的 82% 和 78%;細胞角蛋白 18(CK18)免疫熒光陽性率達 97%,水通道蛋白 1(AQP1)表達豐富;葡萄糖重吸收能力顯著,經 10mM 葡萄糖處理后,細胞內葡萄糖累積量是腎成纖維細胞的 5.3 倍;無微生物污染,細胞純度達 98%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在腎小管損傷機制研究中,NRK-52E 細胞經shun鉑類似物處理 24 小時后,乳酸脫氫酶(LDH)釋放量增加 3.8 倍,凋亡率升高 42%,緊密連接蛋白 occludin 表達量下降 56%,可模擬藥物誘導的腎小管上皮細胞損傷過程,為解析腎毒性分子機制提供理想模型。藥物篩選領域,該細胞對腎保護藥物反應敏感,經抗氧化劑處理后,高糖誘導的活性氧(ROS)水平下降 62%,細胞存活率提升 45%,適用于評估藥物的腎小管保護作用。在腎臟代謝研究方面,該細胞表達完整的藥物代謝酶系統,細胞色素 P450 1A1(CYP1A1)活性達原代細胞的 75%,可用于研究藥物在腎臟的代謝轉化過程。此外,將該細胞接種于人工基底膜上,可構建腎小管上皮極性模型,用于研究物質跨上皮轉運機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 3 天更換一次,更換時動作輕柔以避免細胞脫落。傳代時采用含 EDTA 的消化液處理,37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞間隙增大后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:2-1:3,每 5-6 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 92% 以上,3-4 代內可恢復正常的物質轉運功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。

NRK-52E 正常大鼠腎細胞系以其穩定的腎小管功能、完整的代謝活性及易于培養的優勢,在腎臟相關研究與藥物開發中發揮著重要作用,為揭示腎小管生理病理機制提供了可靠的細胞模型。

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