BY-0102 SK-N-SH SKNSH人神經母細胞瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0102
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/31 15:27:13
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SK-N-SH [SKNSH]人神經母細胞瘤細胞系
SK-N-SH [SKNSH]人神經母細胞瘤細胞系是研究神經母細胞瘤的經典模型,以兼具神經元和神經膠質分化潛能、表達多種神經標志物及穩定的增殖特性為顯著特征,在神經母細胞瘤的發生機制、細胞分化及靶向藥物研發中應用廣泛,為解析神經母細胞瘤從原始神經嵴細胞惡性轉化到腫瘤進展的過程提供了可靠實驗工具。
來源與背景:該細胞系于 1970 年從一名 4 歲女性神經母細胞瘤患者的骨轉移灶中分離建立,屬于未分化型神經母細胞瘤細胞系。與原發灶來源的細胞系相比,其保留了神經母細胞瘤的轉移特性,尤其適合研究神經母細胞瘤的遠處轉移機制。作為首ge被發現具有雙向分化潛能的神經母細胞瘤細胞系,其長期傳代后仍能保持這種特性,填bu了神經母細胞瘤分化研究模型的空白,至今仍是神經母細胞瘤細胞分化研究的重要參照。
細胞特性:形態上呈現多形性,主要有兩種形態的細胞:一種是小型圓形細胞,類似未分化的神經母細胞;另一種是大型多極細胞,具有神經元樣形態。細胞貼壁生長,部分區域可形成神經突樣結構,細胞質豐富,可見神經顆粒,細胞核呈圓形或橢圓形,核仁明顯,核質比約 1:1.2,具有神經母細胞瘤細胞的典型形態特征。核心特性體現為雙向分化潛能,在特定誘導條件下(如加入視huang酸),可向神經元方向分化,表達神經元特異性烯醇化酶(NSE)、微管相關蛋白 2(MAP2)等神經元標志物;在另一些誘導條件下(如加入佛波酯),可向神經膠質細胞方向分化,表達膠質纖維酸性蛋白(GFAP),這種特性使其成為研究神經母細胞瘤細胞分化調控機制的理想模型;神經標志物表達,基礎狀態下即表達神經絲蛋白(NF)、突觸素(Syn)等神經標志物,其中 NF 的表達水平是其他神經母細胞瘤細胞系的 1.5-2 倍;增殖與侵襲能力,體外培養時倍增時間約 48-60 小時,克隆形成率約 55%,裸鼠皮下接種后 3-4 周可形成腫瘤,成瘤率 100%,Transwell 實驗中穿透基質膜的細胞數是正常神經嵴細胞的 5-7 倍,具有較強的侵襲能力。傳代時采用常規消化液處理,因細胞貼壁程度不一,消化時間需控制在 2-4 分鐘,傳代比例 1:3-1:5,連續傳代 50 次后仍保持雙向分化潛能,但分化效率可能略有下降。
培養條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,添加 1% 非必需氨基酸和 1% 抗菌混合液以維持細胞活性。培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 2-3 天更換一次培養基,細胞密度維持在 30%-70% 之間,過度匯合會導致細胞分化比例升高,未分化細胞比例下降 15%-20%。與其他腫瘤細胞系相比,其對誘導分化劑敏感,培養基中若加入 10μM 視huang酸,72 小時后即可觀察到神經元樣細胞比例增加(可達 40% 以上),傳代時消化后需用含血清培養基終止反應,以保護細胞表面的分化相關受體,凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清,復蘇后存活率可達 80% 以上,復蘇后 24 小時貼壁率超過 85%。
檢測鑒定:經微生物篩查,無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細胞質量標準。免疫細胞化學檢測顯示,NF、Syn 呈陽性表達,NSE 在誘導后表達顯著上調,GFAP 在特定誘導條件下呈陽性,符合神經母細胞瘤的分子表型。染色體核型分析呈現亞二倍體核型,存在 1 號染色體短臂缺失、17 號染色體三體等異常,與 60% 的神經母細胞瘤患者的遺傳學改變吻合。功能驗證實驗中,經視huang酸處理后,細胞增殖速率下降 30%,神經突長度增加 2-3 倍,證實其分化潛能,與臨床神經母細胞瘤在誘導分化治療中的反應特征一致。
應用領域:在分化機制研究中,該細胞系被用于揭示神經母細胞瘤細胞分化的調控網絡,研究發現 MYCN 基因擴增是其維持未分化狀態的關鍵,沉默 MYCN 可使細胞自發向神經元方向分化,NSE 表達上調 2-3 倍,為理解神經母細胞瘤的分化阻滯機制提供了重要線索。在藥物篩選方面,是評估神經母細胞瘤誘導分化藥物的常用模型,通過檢測藥物對其分化比例、增殖速率及凋亡的影響,篩選有效的誘導分化藥物,如視huang酸類藥物可顯著促進其分化,且與其他靶向藥物聯用具有協同效應。在轉移機制研究中,該細胞系可用于探索神經母細胞瘤的轉移途徑,其高表達基質金屬蛋白酶(MMP-2、MMP-9),可降解神經周圍基質,促進腫瘤細胞侵襲轉移,靶向抑制這些酶可顯著降低其侵襲能力,為開發抗轉移藥物提供潛在靶點。此外,該細胞系還可用于研究神經母細胞瘤與神經微環境的相互作用,其分泌的神經營養因子可影響周圍神經細胞的功能,同時周圍神經細胞分泌的因子也可促進其增殖,這種相互作用為研究神經母細胞瘤的微環境依賴性提供了實驗基礎。
與其他神經母細胞瘤細胞系(如 SH-SY5Y)相比,SK-N-SH 的優勢在于其更強的雙向分化潛能,能更全面地模擬神經母細胞瘤在不同分化階段的特征。通過對該細胞系的研究,可為神經母細胞瘤的 “分化誘導治療” 提供實驗依據,推動神經母細胞瘤治療策略的優化。
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