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藥物安全藥理主要研究內容2018/01/25

1.核心組合試驗安全藥理學的核心組合試驗的目的是研究受試物對重要生命功能的影響。中樞神經系統、心血管系統、呼吸系統通常作為重要器官系統考慮，也就是核心組合試驗要研究的內容。根據科學合理的原則，在某些情況下，可增加或減少部分試驗內容，但應說明理由。1.1中樞神經系統定性和定量評價給藥后動物的運動功能、行為改變、協調功能、感覺/運動反射和體溫的變化等，以確定藥物對中樞神經系統的影響。可進行動物的功能組合試驗。1.2心血管系統測定給藥前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓等）、心電圖（包括QT間期、PR

離心機的使用和管理2018/01/25

離心機是實驗室常用的基礎設備之一，主要用于各種生物樣品的分離。按轉速可分為低速、高速和超速離心機；按溫度可分為冷凍和常溫離心機。離心機轉動速度快，要注意安全，特別要防止在離心機運轉期間，因不平衡或試管墊老化，而使離心機邊工作邊移動，以致從實驗臺上掉下來，或因蓋子未蓋，離心管因振動而破裂后，玻璃碎片旋轉飛出，造成事故。因此使用離心機時，注意以下操作：(1)離心機的安裝：根據離心機的性能選擇合適的地點放置，對一般低速離心機和小型高速離心機(臺式)可放在平穩、堅固的臺面上(它的底座應裝有橡皮吸角)，水

用GEO腦補出來的外泌體2018/01/17

閑得沒事時候，我就比較喜歡隨便吹吹牛。嗯，比如編一個外泌體的看看。嗯，是這樣的：外泌體加LncRNA應該能算是有點意思了吧，反正我手上屁都沒有，所以我就用GEO挖挖看，看能挖出什么來：嗯，搜搜看LncRNA和外泌體的芯片，果然還是可以有點內容的：這是個前列腺癌的外泌體芯片，就是它了。隨便分下組：可以挑一些外泌體中表達量高那種LncRNA：但是光靠這些，就能腦補出一篇點的么？應該能吧，因為我們現在只有既然是外泌體里高表達的LncRNA，那會有靶細胞，這些LncRNA進入靶細胞后起到作用，而常見的L

免疫組化分析簡單介紹2017/12/07

你想要免疫組化的片子能更快更準確地識別么？你想要瞬間就把組畫里的陽性評級都算好么？下面簡單介紹下免疫組化簡單分析。是有這么個小插件能用一下的，這個插件是在ImageJ里的一個小插件。這個插件叫IHCProfiler，下載完有這么倆文件，全部復制粘貼到ImageJ的Plugin文件夾里:先通過ImageJ打開免疫組化的圖片：然后，從上面的Plugins的菜單里找到IHCProfiler：接著選擇細胞質中的表達：然后選擇DAB染色：于是，顏色就直接分開了：當然，這不能做為直接的評分，接著就要用IHC

細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？2017/11/30

MTT增殖曲線，基本上就是基礎的功能實驗了，養過細胞的你應該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養基的時候，容易把甲囋也吸走，導致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的，這篇

你真以為做ceRNA就這么簡單么？2017/11/23

大家一直都覺得ceRNA的研究，就是研究LncRNA的簡便機制了是吧。因為都不用來論證啥，就直接證明LncRNA和對應的mRNA能同時結合miRNA就行了，不是么？其實，也不全是，當然，要是把ceRNA作為低分的LncRNA研究機制的話，那簡單的就是做一個Luciferase實驗：也就是利用Luciferase的3'UTR結合miRNA，來驗證一下lncRNA和mRNA是不是分別能和miRNA結合。這個都是研究miRNA的基本套路。但LncRNA并不會表達蛋白，所以用Luciferase的方法，

發CNS文章，都用了哪些試劑盒？2017/11/23

你要知道哪個抗體好用么？哪個qPCR試劑盒用了以后發了高分蚊帳？我是不知道，但我知道要怎么樣才能知道。是不是很拗口？挖掘文獻，除了挖數據還能挖出點啥？能挖出試劑盒和試劑好不好用，嗯，沒錯，有很多文獻的MaterialsａndMethods里面會標明試劑盒的生產供應商。就是有這么一個文獻挖掘工具，可以幫你挖出文獻中的試劑盒：我們隨便輸入一個GFP的抗體查查看哈，就出現了這樣的結果：當然這樣的結果，你并不會看得很懂。我們拆解一下哈,左側那一欄，是挖掘出來的，與這個抗體相關的供應商以及相關實驗：接著，

如何快速找出miRNA相關的信號通路？2017/11/16

那天突然有人問我，miRNA是不是能做出那種network的網絡圖，就跟那種文章里一樣？其實我自己也忘了到底應該怎么整了，簡單點的話，就自己去搜搜看miRNA怎么樣對應基因做成列表就行了吧。但是負責任的我，還是搜到了一些miRNA分析的工具。對，就是上面這個工具，可以分析單個基因或者多個基因對單個miRNA和多個miRNA，實際上跟形成network圖沒什么關系。只是覺得這個做出來的東西，還蠻有意思的。我們可以搜多個miRNA與多個基因間的關系：然后，它就會生成這么一個特別草率的二型網絡圖……點

突破！科學家有望利用干細胞來開發出*糖尿病的新型療法2017/11/16

日前，一項在雜志NatureCellBiology上的研究報告中，來自哥本哈根大學的研究人員通過進行一項新型的干細胞研究，闡明了如何有效增加糖尿病患者機體中胰島素的產生，這項研究發現或能幫助研究者更加有效地以低成本通過人類干細胞來制造產生胰島素的β細胞，同時也能開發出治療糖尿病的有效療法，對于開發治療其它疾病的新型療法也具有重要的意義。目前有4.15億糖尿病患者，而且這一數字仍在繼續上升中，糖尿病患者的共同點就是機體中缺乏制造足夠胰島素的能力，進而誘發患者出現一系列并發癥和致死性疾病等；胰島素能

肥胖癥疾病研究中動物模型2017/11/10

肥胖癥是一組常見的代謝癥群。當人體進食熱量多于消耗熱量時，多余熱量以脂肪形式儲存于體內，其量超過正常生理需要量，且達值時遂演變為肥胖癥。正常男性成人脂肪組織重量占體重的15%～18%，女性占20%～25%。隨年齡增長，體脂所占比例相應增加。關于肥胖的評估方法，包括人體測量學、雙能X線吸收法、超聲、CT、紅外線感應法等多種。如無明顯病因者稱單純性肥胖癥，有明確病因者稱為繼發性肥胖癥。外因以飲食過多而活動過少為主。熱量攝入多于熱量消耗，使脂肪合成增加是肥胖的物質基礎。內因為脂肪代謝紊亂而致肥胖。1.

低血糖疾病動物模型2017/11/10

低血糖是指成年人空腹血糖濃度低于2.8mmol/L。糖尿病患者血糖值≤3.9mmol/L即可診斷低血糖。低血糖癥是一組多種病因引起的以靜脈血漿葡萄糖（簡稱血糖）濃度過低，臨床上以交感神經興奮和腦細胞缺氧為主要特點的綜合征。低血糖的癥狀通常表現為出汗、饑餓、心慌、顫抖、面色蒼白等，嚴重者還可出現精神不集中、躁動、易怒甚至昏迷等。臨床上反復發生空腹低血糖癥提示有器質性疾??；餐后引起的反應性低血糖癥，多見于功能性疾病。1.空腹低血糖癥（1）內源性胰島素分泌過多：常見的有胰島素瘤、自身免疫性低血糖等。（

SCTM：發現一種新的干細胞來源---骨膜組織2017/11/03

在一項新的研究中，研究人員發現在常規的髖關節置換術(hipreplacementsurgery)期間通常丟棄的骨膜組織富含成體干細胞，有望提供一種用于再生醫學的干細胞新來源。相關研究結果近期在StemCellsTranslationalMedicine期刊上，標題為“Arthriticperiostealtissuefromjointreplacementsurgery:anovel,autologoussourceofstemcells”。鑒于每年有上萬人接受髖關節置換術治療，這種組織可能在臨

小鼠干細胞的新突破2017/10/25

英國研究團隊在近日《自然》雜志上撰文指出，他們借助一種全新方法，利用小鼠發育初期的4—8個細胞胚胎，培育出了一種干細胞系——擴展潛能干細胞（EPSCs）。新細胞不僅能發育成類型的細胞，且發育潛力超過胚胎干細胞等，對人類的再生醫學意義重大，有望為研究治療流產和發育紊亂問題開辟新方向。目前得到的胚胎干細胞和誘導多能干細胞只能發育成某些特定的細胞譜系。為了發現新型干細胞用于再生醫學等領域，劍橋大學韋爾科姆基金會桑格研究所劉澎濤博士領導的團隊，發明了一種從發育初階段開始培育干細胞的新方法。在此階段，受精

高血壓疾病動物實驗研究2017/10/20

高血壓（hypertension）是指以體循環動脈血壓（收縮壓和/或舒張壓）增高為主要特征（收縮壓≥140毫米汞柱，舒張壓≥90毫米汞柱），可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質性損害的臨床綜合征。高血壓是常見的慢性病，也是心腦血管病主要的危險因素。正常人的血壓隨內外環境變化在范圍內波動。在整體人群，血壓水平隨年齡逐漸升高，以收縮壓更為明顯，但50歲后舒張壓呈現下降趨勢，脈壓也隨之加大。近年來，人們對心血管病多重危險因素的作用以及心、腦、腎靶器官保護的認識不斷深入，高血壓的診斷標準也在不斷調整，目前

動脈粥樣硬化研究動物實驗2017/10/20

動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質代謝障礙為動脈粥樣硬化的病變基礎，其特點是受累動脈病變從內膜開始，一般先有脂質和復合糖類積聚、出血及血栓形成，進而纖維組織增生及鈣質沉著，并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化，導致動脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動脈，一旦發展到足以阻塞動脈腔，則該動脈所供應的組織或器官將缺血或壞死。由于在動脈內膜積聚的脂質外觀呈黃色粥樣，因此稱為動脈粥樣硬化。動脈粥樣硬化模型，模型構建方式常見有幾種，現在介紹種

RACE技術的原理和操作2017/10/13

近年來隨著生物技術的不斷發展，出現了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術、轉座子標簽技術、mRNA差異顯示技術二基因組減法技術以及cDNA文庫篩選技術等。但上述方法人多具有實驗周期長、技術步驟煩瑣且工作量大等特點。cDNA末端快速擴增技術（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉錄本中快速擴增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡單、快速、廉價等優勢而受到越來越多的重視.經典的RACE技術是由Frohman等（1988）發明的一項

實驗助手——質粒圖譜如何“瞅”2017/09/28

每當拿到一個質粒圖譜，是不是一下就有點懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會解決你的困惑。質粒和載體傻傻分不清楚質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型。載體即要把一個有用的基因（目的基因——研究或應用基因）通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞，這種運載

實驗助手—六大要素讓你告別RNA反轉錄失敗2017/09/26

RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類：oligodT，隨機引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應用范圍更加廣泛，是因為可由此獲得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb，或者沒有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機引物進行RNA的反轉錄。隨機引物雖能長基因的5’末端的轉錄，但并不能獲得整個基因全長的cDNAs，且對RNA樣品質量要求比較高，此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR，長隨機引物和Oli

內外科大夫那些有趣的區別2017/09/18

雖然說內科和外科都是相親相愛的一家人，但是細數一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網友們是如何總結的。區別一：內科大夫多話癆皇上：此番遼國起傾國之力，那蕭皇后親率三十萬大軍南下，諸位愛卿如何是好？內科大臣:啟稟皇上，臣以為還當細細打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統帥？又或者是其他將領？這分型應當明確。三十萬兵力應當有所鑒別，據臣所知遼國連續三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬兵力實在存疑，打個問號。遼國大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完善相關檢查。至于如何

Western blot，內參蛋白選用技巧！2017/09/12

一、WesternBlot實驗為什么要用內參?WesternBlot實驗結果進行內參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結果的準確性；2、使用內參可以作為空白對照，檢測蛋白轉膜情況是否、整個WesternBlot顯色發光體系是否正常。二、你的內參選對了嗎？作為內參