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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟2023/06/13
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳原理:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中引進(jìn)SDS(十二烷基硫酸鈉),SDS會(huì)與變性的多肽,并使蛋白帶負(fù)電荷,由于多肽結(jié)合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關(guān),因此SDS多肽復(fù)合物在丙稀酰胺凝膠電泳中的遷移率只與多肽的大小有關(guān),在達(dá)到飽和的狀態(tài)下,每克多肽可與1.4g去污劑結(jié)合。當(dāng)分子量在15KD到200KD之間時(shí),蛋白質(zhì)的遷移率和分子量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW為分子量,X為遷移率,k、b均為常數(shù),若
蛋白質(zhì)電泳常用試劑配制方法2023/06/13
蛋白質(zhì)電泳常用試劑配制方法如下:一、3×SDS-PAGEloadingbuffer的配制3×SDS-PAGEloadingbuffer10ml1MTris-Hcl(PH6.8)1.5mlSDS0.6gBPB(溴酚藍(lán))30mg甘油(丙三醇)3ml去離子水5.5ml1、將除BPB以外的藥品溶解。SDS常溫下很難溶解,可以在37℃水浴溶解。溶解后,再加入BPB,進(jìn)行溶解;2、把溶好的buffer分裝到1.5ml的離心管中,1ml/管,常溫放置;3、使用前,每管加入30µL巰基乙醇。注意事項(xiàng):巰基乙醇為
高速冷凍離心機(jī)用途2023/06/13
高速離心機(jī)已經(jīng)成為生物學(xué)領(lǐng)域的重要工具,革命性地改變了生物樣品的處理、分離和分析方法。高速離心機(jī)能夠產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,為研究人員和科學(xué)家提供了一種有效分離和研究各種生物成分的手段,從細(xì)胞和亞細(xì)胞微粒到核酸和蛋白質(zhì)。這篇文章探討了高速離心機(jī)的應(yīng)用在生物學(xué)領(lǐng)域,突出它們?cè)跇悠诽幚怼⒎蛛x和分析方面的優(yōu)勢(shì)。高速離心機(jī)的主要優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)在以下幾個(gè)重要領(lǐng)域:快速樣品處理:高速離心機(jī)提供快速和高效處理樣品的能力。它們的高轉(zhuǎn)速使生物成分快速沉淀和分離,大大縮短了加工時(shí)間。這在時(shí)間敏感的實(shí)驗(yàn)中或在使用有限的樣品量時(shí)是
高速冷凍離心機(jī)作用2023/06/13
作為科學(xué)和技術(shù)的進(jìn)步推動(dòng)者,高速冷凍離心機(jī)在現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)和食品工業(yè)中扮演著重要的角色。這項(xiàng)創(chuàng)新的冷凍技術(shù)以其高效、精確和可靠的特點(diǎn),為我們帶來了許多好處。本文將帶您深入了解高速冷凍離心機(jī)的原理、離心機(jī)的功能以及對(duì)離心機(jī)的應(yīng)用。高速冷凍離心機(jī)是什么?高速冷凍離心機(jī)是一種能夠以較高速度將物質(zhì)冷凍的設(shè)備。它利用離心力和低溫環(huán)境,將液體或溶液中的微粒或樣本迅速冷凍,并將其轉(zhuǎn)化為固體狀態(tài)。其核心原理是利用高速旋轉(zhuǎn)的離心力將樣本迅速推向離心機(jī)壁,從而分離出冷凍的固態(tài)物質(zhì)。這種高速冷凍過程迅速凝固樣本,防止了
從微生物和細(xì)胞中中分離線粒體的基本步驟方法2023/06/09
在人體內(nèi),線粒體是我們身體的“能量中心”,它們可以將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為ATP等可用能源。除了在人體內(nèi)外動(dòng)植物細(xì)胞中都能發(fā)現(xiàn)線粒體存在。通過從微生物和細(xì)胞中分離出線粒體,我們可以更好地了解其內(nèi)在機(jī)制和功能。在本文中,我們將介紹從微生物和細(xì)胞中分離線粒體的基本步驟方法。什么是線粒體自20世紀(jì)初被發(fā)現(xiàn)以來,線粒體一直被認(rèn)為是細(xì)胞內(nèi)部的主要能量?jī)?chǔ)備所在。線粒體是由兩個(gè)膜界限組成的可變形的類囊體結(jié)構(gòu),在其內(nèi)側(cè)膜中包含酶群,參與三磷酸腺苷(ATP)的形成。線粒體可進(jìn)一步劃分為許多結(jié)構(gòu)不同的亞種,這些亞種通過形態(tài)
什么是細(xì)胞外基質(zhì)2023/06/06
什么是細(xì)胞外基質(zhì)?細(xì)胞外基質(zhì)是一種位于細(xì)胞外的復(fù)雜結(jié)構(gòu),由各種生物分子組成,包括蛋白質(zhì)、多糖類物質(zhì)和其他細(xì)胞外分子。細(xì)胞外基質(zhì)在維持組織結(jié)構(gòu)、提供支持和保護(hù)細(xì)胞方面發(fā)揮著重要的作用。這個(gè)復(fù)雜的基質(zhì)不僅填充著細(xì)胞之間的空間,還通過與細(xì)胞表面的受體相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能和行為。細(xì)胞外基質(zhì)在許多生物學(xué)過程中都起著重要的角色,如細(xì)胞遷移、細(xì)胞黏附、信號(hào)傳導(dǎo)和組織修復(fù)。在細(xì)胞外基質(zhì)中,蛋白質(zhì)是最為重要的組成部分之一。它們可以形成纖維蛋白網(wǎng)絡(luò),提供支持和機(jī)械強(qiáng)度,使細(xì)胞能夠維持其結(jié)構(gòu)。此外,蛋白質(zhì)還可以通
生物反應(yīng)器培養(yǎng)生產(chǎn)人造肉的方法2023/06/02
培養(yǎng)肉(CM)是指一種可持續(xù)替代品,通過生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞并將其結(jié)合到可食用微載體中,生產(chǎn)出與動(dòng)物源性肉類相似的素肉產(chǎn)品。為了減少對(duì)環(huán)境的影響、提高動(dòng)物福利并為不斷增長(zhǎng)的人口提供蛋白質(zhì)來源,CM產(chǎn)品開發(fā)引發(fā)了廣泛的學(xué)術(shù)界和工業(yè)界興趣。然而,要使這一領(lǐng)域發(fā)揮其全部潛力,必須克服重大挑戰(zhàn),主要是開發(fā)可擴(kuò)展的細(xì)胞擴(kuò)增和細(xì)胞到肉類加工的技術(shù)方法。可擴(kuò)展的細(xì)胞擴(kuò)增方法對(duì)于生成大量可用于進(jìn)一步加工成CM的細(xì)胞至關(guān)重要。長(zhǎng)期以來,使用微載體進(jìn)行細(xì)胞附著和增殖,在可擴(kuò)展生物反應(yīng)器中有效擴(kuò)增貼壁依賴性細(xì)胞。這種培
生化培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱的區(qū)別2023/06/02
在生物學(xué)研究領(lǐng)域,培養(yǎng)箱是非常重要的設(shè)備之一。不同種類的微生物需要不同種類的培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。這篇文章將會(huì)介紹生化培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱的區(qū)別。什么是生化培養(yǎng)箱?生化培養(yǎng)箱是一種常見的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,它主要用于在恒定的溫度、濕度和光照條件下培養(yǎng)細(xì)胞、組織和微生物。它通常由密封的箱體、溫度控制系統(tǒng)、濕度調(diào)節(jié)系統(tǒng)和光照裝置組成。生化培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)菌培養(yǎng)、酶反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)中。其溫度范圍通常可以調(diào)節(jié)到較高的溫度,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。這種設(shè)備有一個(gè)封閉的環(huán)境,可以控制溫度、濕度和二氧化碳濃度等參數(shù),以提供
高速冷凍離心機(jī)使用方法2023/06/01
高速冷凍離心機(jī)使用方法高速冷凍離心機(jī)是一種用于制備生物樣品的常見實(shí)驗(yàn)室儀器,它通過離心和低溫的作用將生物樣品快速凍結(jié),以保護(hù)樣品的原始狀態(tài)和結(jié)構(gòu),以及為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)的樣本。在正確的使用和操作下,高速冷凍離心機(jī)可以有效地提高生物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。本文將詳細(xì)介紹高速冷凍離心機(jī)的操作及注意事項(xiàng)。一、高速冷凍離心機(jī)操作1、準(zhǔn)備樣品在使用高速冷凍離心機(jī)之前,樣品必須被正確準(zhǔn)備。使用者需要確保樣品已被正確標(biāo)記和存儲(chǔ),并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的樣品量和離心管。2、準(zhǔn)備離心機(jī)在準(zhǔn)備使用高速冷凍離心機(jī)之前,
低溫冷凍高速離心機(jī)和普通離心機(jī)的區(qū)別2023/05/30
離心機(jī)是一種常見的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,用于分離混合物中的不同組分。它通過利用離心力將樣品離心分離成不同的層次,以實(shí)現(xiàn)分離的目的。冷凍離心機(jī)和普通離心機(jī)是兩種常見的離心機(jī),下面說明一下冷凍離心機(jī)和普通離心機(jī)的區(qū)別以及高速冷凍離心機(jī)的用途。普通離心機(jī)是一種常規(guī)離心機(jī),通常用于離心分離、沉淀、洗滌等常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作。普通離心機(jī)的工作原理是通過高速旋轉(zhuǎn)離心機(jī)轉(zhuǎn)子,產(chǎn)生離心力,將樣品離心分離成不同的層次。普通離心機(jī)的離心力一般在1萬(wàn)至2萬(wàn)g之間。轉(zhuǎn)速范圍通常在1000至15000rpm之間。它們通常在室溫下工作,適用
細(xì)胞微絲骨架染色失敗的原因及解決辦法2023/05/24
微絲骨架染色常見問題及解決方案微絲骨架是細(xì)胞的一種重要組成部分,其主要由微絲和微管兩部分組成。微絲是一種細(xì)胞內(nèi)直徑約為7納米的蛋白質(zhì)纖維,主要由肌動(dòng)蛋白組成,參與細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、收縮和細(xì)胞分裂等過程。微管則是一種細(xì)胞內(nèi)直徑約為25納米的管狀結(jié)構(gòu),主要由α-和β-微管蛋白組成,參與細(xì)胞的分裂、纖毛和鞭毛的運(yùn)動(dòng)等過程。微絲骨架染色無法染上的原因可能有以下幾點(diǎn):染色劑選擇不當(dāng):不同的染色劑對(duì)微絲骨架的染色效果不同,如果使用的染色劑不適合微絲骨架的染色,則會(huì)導(dǎo)致染色失敗。例如,熒光素酰亞胺(FITC)和三硝
恒溫培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱區(qū)別2023/05/24
恒溫培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱選購(gòu)只拿恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱都是實(shí)驗(yàn)室中常用的兩種設(shè)備,那么生化培養(yǎng)箱和恒溫培養(yǎng)箱區(qū)別是什么,下面將對(duì)這些方面進(jìn)行詳細(xì)的介紹。一、功能區(qū)別恒溫培養(yǎng)箱主要用于生物實(shí)驗(yàn)室中的生物培養(yǎng)和繁殖。其主要功能是提供穩(wěn)定的溫度、濕度和氧氣濃度等環(huán)境條件,以促進(jìn)生物的生長(zhǎng)和繁殖。恒溫培養(yǎng)箱具有溫度控制、濕度控制、氧氣控制等功能,可以根據(jù)不同的生物需求進(jìn)行調(diào)節(jié)。生化培養(yǎng)箱則主要用于生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室分析。其主要功能是提供嚴(yán)格的溫度、濕度和氣體控制,以保證實(shí)驗(yàn)的精確性和可重復(fù)性。生化培養(yǎng)箱還
瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟2023/05/19
(1)安裝電泳管選擇聚含均勻、無氣泡、無裂縫、膠面平整并與管壁沒有脫離現(xiàn)象的合格凝膠電泳管插入上電極槽底板的各圓孔中,留1/5在底板上方,保證使電泳管與底板垂直,密封處不致滲漏。(2)加樣可利用上述方法制成樣品膠,也可以用如下的一種方法加樣。將樣品溶于200mg/ml濃度的蔗糖溶液中,或溶在10%甘油中,然后加在濃縮膠的表面。或?qū)⑷刍沫傊c樣品溶液混合后加在濃縮膠表面。或用與電泳管內(nèi)徑相近的圓形厚濾紙片,將樣品溶液吸收后,緊貼在濃縮膠表面。如樣品是固體,應(yīng)先溶在濃縮膠緩沖液中,并加入足夠量lm
瓊脂糖凝膠電泳影響凝膠聚合的因素有哪些2023/05/19
對(duì)于一般的分析工作,特別是定量分析工作來講,人們強(qiáng)調(diào)制備的凝膠要有很好的可重復(fù)性。如果制備得到的凝膠本身沒有重復(fù)性,比如孔徑前后兩次凝膠相差頗大,那么在這樣的條件下,所得到的分析結(jié)果,其可信性就有問題,往往會(huì)使幾次結(jié)果不能重復(fù)。所以,為了要獲得可靠的分析結(jié)果,在制膠時(shí)對(duì)能影響凝膠聚合的種種因素必須加以控制。有哪些主要因素,又怎樣來控制它們的條件,分別簡(jiǎn)述如下:(1)制備凝膠用的主要試劑丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺至少是分析純級(jí)的試劑。存放時(shí)間一般不超過1年,如果存放時(shí)間過長(zhǎng),丙烯酰胺受潮水解,丙烯酸
原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟2023/05/18
原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟1、生長(zhǎng)培養(yǎng)好的試驗(yàn)材料(一般為生長(zhǎng)20天左右的擬南芥幼苗葉片)2、在擬南芥開花前取樣(30片葉子左右即可)3、切取葉片為0.5-1mm的細(xì)條(如果材料能達(dá)到每克107個(gè)原生質(zhì)體,10-20片葉子需要5-10mL酶解液)4、迅速將切下的樣品轉(zhuǎn)到酶解液中,要求全浸沒。5、黑暗條件下抽真空30min。6、連續(xù)酶解,室溫下23℃黑暗中靜止酶解3h7、利用光學(xué)顯微鏡檢查原生質(zhì)體(30-50μm大小)8、在過濾前加入等量的W5溶液9、洗干凈濾網(wǎng),并用W5潤(rùn)濕,之后過濾10、
HEK293培養(yǎng)基選購(gòu)指南2023/05/10
嘿,小伙伴,HEK293細(xì)胞咋養(yǎng)啊?用啥培養(yǎng)基呀?哈哈,這個(gè)簡(jiǎn)單,毋庸置疑地告訴你,DMEM和RPMI都行啊!HEK293細(xì)胞是廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的一種細(xì)胞模型,當(dāng)然要注意選用適合它們的培養(yǎng)基啦。妥妥地,你得選擇營(yíng)養(yǎng)豐富、含有充足生長(zhǎng)因子和營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基啊。DMEM和RPMI這兩個(gè)培養(yǎng)基都含有足夠的碳水化合物、氨基酸和維生素,供給細(xì)胞所需的能量和材料,保證細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。這兩種培養(yǎng)基各有千秋啊!DMEM培養(yǎng)基一般用于腫瘤細(xì)胞和無血清培養(yǎng);而RPMI培養(yǎng)基則多用在白血細(xì)胞培養(yǎng)和腫瘤細(xì)胞等黏附生長(zhǎng)
MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇2023/05/10
MRC-5細(xì)胞是一種常用的人類胚肺細(xì)胞,是由1966年從一個(gè)正常的男性胎兒的肺部組織獲得,具有良好的細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖特性,可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、病毒研究和毒性測(cè)試等領(lǐng)域。在MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)中,使用的培養(yǎng)基非常關(guān)鍵,不同的培養(yǎng)基可會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖特性。MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基必須包含合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能量來源和生長(zhǎng)因子以確保它們能夠健康地生長(zhǎng)和增殖。MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)基主要包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)充物以及抗生素。[1640培養(yǎng)基]其中常使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM/F12(Dulbecco的修改Ea
HEK293細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基配制方法2023/05/10
為了確保HEK293細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性和成功性,在使用HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí),需要注意以下事項(xiàng)。培養(yǎng)液的配制HEK293細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用兩種培養(yǎng)液:DMEM和PMI。在配制培養(yǎng)液時(shí)要嚴(yán)格按照說明書來操作,遵循一定的配方和流程。此外,建議在配制時(shí)使用熱處理的雙倍溶液,這樣能夠避免配制中出現(xiàn)pH值過高或低的問題。篩選培養(yǎng)基在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基的篩選過程中,還需要考慮不同穩(wěn)定性和適應(yīng)性的培養(yǎng)基,以便更好地滿足試驗(yàn)要求。例如,當(dāng)進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),選擇ProCHO5培養(yǎng)基,可以提高細(xì)胞的適應(yīng)性和生長(zhǎng)率。培
培養(yǎng)基種類和細(xì)胞培養(yǎng)基選擇2023/05/04
1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium(MEM)也稱非必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡(jiǎn)單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型
細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶和細(xì)胞工廠有哪些不同2023/04/27
近幾十年以來,隨著生命科技的快速發(fā)展,通過從動(dòng)物組織中提取細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達(dá)單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術(shù)。細(xì)胞的規(guī)模化擴(kuò)培成為新的細(xì)胞培養(yǎng)需求,目前細(xì)胞擴(kuò)增手段主要有:轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細(xì)胞工廠和生物反應(yīng)器擴(kuò)培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn):轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、技術(shù)成熟、擴(kuò)增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn),但是占地空間大、勞動(dòng)強(qiáng)度大、產(chǎn)率低、細(xì)胞生長(zhǎng)密度低、瓶間差異較難控制等,難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。生物反應(yīng)器培養(yǎng)雖然可以大大提高細(xì)胞產(chǎn)率但是剪切力會(huì)降低細(xì)胞的活率,并且微載體與細(xì)胞分
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